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公开(公告)号:CN118091160A
公开(公告)日:2024-05-28
申请号:CN202410268314.3
申请日:2024-03-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种非诊断目的的非洲猪瘟病毒抗体检测方法,步骤为:在96孔板中用微生物保藏编号为CCTCC NO:V202404的非洲猪瘟病毒毒株感染微生物保藏编号为CCTCC NO:C2022258的野猪肾细胞,将感染的细胞在96孔板的孔内固定,将待检血清添加到96孔板中,将HRP标记的重组葡萄球菌蛋白A添加到孔中,将AEC显色液添加到孔中,清洗96孔板,用普通光学显微镜观察96孔板,根据是否能够观察到红棕色着染细胞判定血清中是否含有非洲猪瘟病毒抗体。本发明还公开了用于前述检测方法的病毒株与试剂盒。该方法敏感度高,安全性好,特异性好,操作方便,可推广应用。
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公开(公告)号:CN116590243B
公开(公告)日:2024-01-23
申请号:CN202310363645.0
申请日:2023-04-07
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 发明公开了一种非洲猪瘟病毒的基因工程病毒毒株,其亲本毒株微生物保藏号为CCTCC NO:V202318,其基因组中,MGF_505‑1R基因、MGF_505‑2R基因、MGF_505‑3R基因、MGF_360‑12L基因、MGF_360‑13L基因、MGF_360‑14L基因和EP402R基因为失活的基因。本发明还公开了该基因工程病毒毒株的制备方法,含有该基因工程病毒毒株的疫苗组合物,以及该基因工程病毒毒株的在制备用于预防非洲猪瘟的制剂中的用途。该基因工程病毒毒株安全性好,免疫有效性好,具备制备临床应用的疫苗的潜质。
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公开(公告)号:CN115896004B
公开(公告)日:2023-12-22
申请号:CN202211137583.3
申请日:2022-09-19
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/071 , C12N7/00 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种野猪肾细胞,微生物保藏号为CCTCC NO:C2022258。本发明还公开了一种试剂盒,包含前述野猪肾细胞、非洲猪瘟病毒和FITC标记的抗猪IgG抗体,配合常规设备和试剂,应用该试剂盒能够良好地检测猪血清样本中是否含有抗非洲猪瘟病毒抗体。本发明还公开了一种抗非洲猪瘟病毒抗体检测方法,步骤为:用非洲猪瘟病毒感染前述野猪肾细胞,培养感染的细胞后进行固定,将待测血清样本添加到固定的细胞,孵育后再添加FITC标记的抗猪IgG抗体,然后用荧光显微镜拍照,根据拍照结果判定所述待测样本中是否存在抗非洲猪瘟病毒抗体。该方法敏
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公开(公告)号:CN117192111A
公开(公告)日:2023-12-08
申请号:CN202311107452.5
申请日:2023-08-31
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明涉及非洲猪瘟病毒膜蛋白MGF_110‑13L的制备方法及应用,属于动物疫苗与兽用生物制品技术领域。为了获得更多具有免疫保护功能的病毒膜蛋白,并将其用于制备预防非洲猪瘟毒病的疫苗药物或诊断试剂,本发明对ASFV Pig/HLJ/18株基因组编码的蛋白质组进行序列分析,针对多种膜蛋白构建表达质粒,转染细胞后进行免疫学检测与分析,发现ASFV MGF_110‑13L蛋白具抗原性;构建含有表达MGF110‑13L蛋白基因的重组表达质粒,利用该质粒转染细胞,获得了稳定表达该蛋白的重组细胞系,通过实验证实该重组细胞系或其培养物能够用于制备预防非洲猪瘟病毒的疫苗药物或非洲猪瘟病毒的检测试剂。
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公开(公告)号:CN115896004A
公开(公告)日:2023-04-04
申请号:CN202211137583.3
申请日:2022-09-19
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/071 , C12N7/00 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种野猪肾细胞,微生物保藏号为CCTCC NO:C2022258。本发明还公开了一种试剂盒,包含前述野猪肾细胞、非洲猪瘟病毒和FITC标记的抗猪IgG抗体,配合常规设备和试剂,应用该试剂盒能够良好地检测猪血清样本中是否含有抗非洲猪瘟病毒抗体。本发明还公开了一种抗非洲猪瘟病毒抗体检测方法,步骤为:用非洲猪瘟病毒感染前述野猪肾细胞,培养感染的细胞后进行固定,将待测血清样本添加到固定的细胞,孵育后再添加FITC标记的抗猪IgG抗体,然后用荧光显微镜拍照,根据拍照结果判定所述待测样本中是否存在抗非洲猪瘟病毒抗体。该方法敏感度高,特异性好,可推广应用。
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公开(公告)号:CN115724991A
公开(公告)日:2023-03-03
申请号:CN202210854769.4
申请日:2022-07-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K19/00 , C07K14/01 , C12N5/20 , C12N15/70 , C07K16/08 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/58
Abstract: 本发明涉及医药技术领域,具体涉及可溶性表达的重组蛋白rP22、杂交瘤细胞株及其应用。一种可溶性表达的重组蛋白rP22,所述的可溶性表达的重组蛋白rP22为重组质粒pMAL‑C5x‑p22经诱导表达获得重组p22蛋白。本发明的优点:(1)重组P22蛋白具有良好的免疫原性。(2)单克隆抗体的效价高。(3)非洲猪瘟病毒p22蛋白单克隆抗体用于ASFV抗体的检测,敏感性高,特异性高,变异系数小,重复性高。
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公开(公告)号:CN118813550B
公开(公告)日:2025-04-22
申请号:CN202411177779.4
申请日:2024-08-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/58 , G01N33/569 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种杂交瘤细胞,其微生物保藏编号为CCTCC NO:C2024215。本发明还公开了一种bELISA方法,其核心步骤为:用非洲猪瘟病毒P22蛋白包被微孔板底面,将待检血清添加到微孔板,用辣根过氧化物酶标记的前述杂交瘤细胞分泌的抗非洲猪瘟病毒P22蛋白单克隆抗体孵育微孔板,向微孔板中加入用TMB底物显色液,测定OD450nm值来判断待检血清中是否含有抗非洲猪瘟病毒P22蛋白抗体。该方法特异性强,敏感性高,可用于非洲猪瘟病毒抗体检测,具备临床应用前景。
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公开(公告)号:CN118909962B
公开(公告)日:2025-04-01
申请号:CN202411174866.4
申请日:2024-08-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , C12N15/13 , C12N15/63 , C07K14/01 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种胶体金检测卡,该检测卡中含有底板、样品垫、吸水垫,胶体金垫和设置有质控线和检测线的透水膜,胶体金垫中含有胶体金标记的微生物保藏编号为CCTCC NO:C2024210的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体,检测线中含有微生物保藏编号为CCTCC NO:C2024212的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体。该检测卡检测非洲猪瘟病毒P72蛋白,特异性强,敏感性高,可用于非洲猪瘟病原检测,具备临床应用前景。
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公开(公告)号:CN117946258B
公开(公告)日:2025-02-14
申请号:CN202410123918.9
申请日:2024-01-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , C07K19/00 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种杂交瘤细胞,其微生物保藏编号为CCTCC NO:C202402。本发明还公开了该杂交瘤细胞分泌得到的单克隆抗体。本发明还公开了基于辣根过氧化物酶标记的该单克隆抗体和非洲猪瘟病毒p72蛋白的阻断ELISA方法与试剂盒。该ELISA方法能够有效检测非洲猪瘟抗体,具有良好的敏感性和特异性,具备临床应用价值。
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公开(公告)号:CN119060172A
公开(公告)日:2024-12-03
申请号:CN202411177636.3
申请日:2024-08-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K16/08 , C12N5/16 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/558 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种胶体金检测卡,该检测卡中含有底板、样品垫、吸水垫,胶体金垫和设置有质控线和检测线的透水膜,胶体金垫中含有胶体金标记的微生物保藏编号为CCTCC NO:C2024207的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体,检测线中含有微生物保藏编号为CCTCC NO:C2024208的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体。该检测卡检测非洲猪瘟病毒P30蛋白,特异性强,敏感性高,可用于非洲猪瘟病原检测,具备临床应用前景。
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