一种携带attB高效定向整合假attP位点的载体及其转基因方法

    公开(公告)号:CN102399810A

    公开(公告)日:2012-04-04

    申请号:CN201110312992.8

    申请日:2011-10-14

    Abstract: 本发明公开了一种携带attB序列高效率定向整合基因组假attP位点的载体以及一种高效率定向整合基因组假attP位点的转基因方法。在携带外源功能基因的载体中插入多个互相间隔的attB序列,和表达噬菌体φC31整合酶的载体共转染宿主细胞,可以实现attB与基因组中的假attP位点的高效整合及外源基因的表达。载体携带3个attB和2个attB的整合率分别为携带1个attB载体的2.8和2.2倍。比不含整合酶的随机整合则分别提高了14.5和12倍多。有利于整合酶系统在基因治疗和转基因动物领域的应用。

    一种建立人/山羊造血干细胞异种移植模型的方法

    公开(公告)号:CN1353994B

    公开(公告)日:2011-01-12

    申请号:CN01132231.4

    申请日:2001-11-19

    Abstract: 本发明属生物细胞技术领域,具体涉及一种建立造血干细胞异种移植模型的方法。本发明从人脐血分离获得人HSC,移植入胎山羊体内,建立了人/山羊造血干细胞异种移植模型,实验证实移植山羊静脉血中,显示人HSC扩增至1000-10000倍,稳定保持人HSC表型达10个月以上,并处于不完全分化状态。本发明所建立的移植模型可为贮存和扩增人造血干/祖细胞提供潜在的活体仓库,可成为人造血干/祖细胞方便来源,为通过宫内HSC移植途径治疗疾病提供了理论和技术依据。

    一种同体细胞核移植方法

    公开(公告)号:CN1557946A

    公开(公告)日:2004-12-29

    申请号:CN200410016219.7

    申请日:2004-02-11

    Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种生物同体细胞核移植克隆技术。本发明采用生物克隆技术,取遗传背景清楚的同一个体的供核体细胞和去核卵母细胞,进行同体细胞核移植,制备克隆动物。本发明方法较好的解决了供核细胞的细胞核与受体细胞质DNA的匹配性以及核质内环境的相容性,能改善克隆胚胎的发育,提高克隆效率。可用于动物克隆获得高产优质家畜,能促进克隆技术在生物学,特别是在农牧业学上的应用,为家畜良种繁育提供新的途径。

    一种人转铁蛋白乳腺特异性表达载体的构建及应用

    公开(公告)号:CN103911393B

    公开(公告)日:2019-01-18

    申请号:CN201210594330.9

    申请日:2012-12-31

    Abstract: 本发明公开了一种利用转基因动物的乳腺生产人转铁蛋白的方法及其表达载体。本发明的方法包括利用含有人转铁蛋白基因表达盒的载体将人转铁蛋白基因表达盒转入哺乳动物基因组中获得转基因动物,从转基因动物乳汁中获得人转铁蛋白,其中,该表达盒从5’到3’依次包括启动子、人转铁蛋白基因和牛生长激素基因终止子,所述启动子是山羊β‑酪蛋白基因,其序列如SEQ ID NO.1所示,所述人转铁蛋白基因是序列表中SEQ ID NO.2所示,所述的载体是真核表达载体pcDNA3.1,所述的哺乳动物不包括人。本发明的方法,在动物的乳汁中人转铁蛋白的浓度至少可达到5g/L,比现有的方法提高了160倍以上,具有巨大的商业利用价值。

    一种人转铁蛋白乳腺特异性表达载体的构建及应用

    公开(公告)号:CN103911393A

    公开(公告)日:2014-07-09

    申请号:CN201210594330.9

    申请日:2012-12-31

    Abstract: 本发明公开了一种利用转基因动物的乳腺生产人转铁蛋白的方法及其表达载体。本发明的方法包括利用含有人转铁蛋白基因表达盒的载体将人转铁蛋白基因表达盒转入哺乳动物基因组中获得转基因动物,从转基因动物乳汁中获得人转铁蛋白,其中,该表达盒从5’到3’依次包括启动子、人转铁蛋白基因和牛生长激素基因终止子,所述启动子是山羊β-酪蛋白基因,其序列如SEQ?ID?NO.1所示,所述人转铁蛋白基因是序列表中SEQ?ID?NO.2所示,所述的载体是真核表达载体pcDNA3.1,所述的哺乳动物不包括人。本发明的方法,在动物的乳汁中人转铁蛋白的浓度至少可达到5g/L,比现有的方法提高了160倍以上,具有巨大的商业利用价值。

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