调控百合萜类化合物含量的方法

    公开(公告)号:CN111837689A

    公开(公告)日:2020-10-30

    申请号:CN202010530599.5

    申请日:2020-06-11

    Abstract: 本发明提供一种调控百合萜类化合物含量的方法。所述调控为下调。该方法包括:使百合与BTH接触。本发明通过不同浓度的外源BTH瓶插液处理百合,显著抑制了百合单萜类物质的释放,且BTH处理后的百合花被片的单萜类物质代谢路径中的主要三个关键酶基因LiDXS、LiDXR和LiTPS的表达量在BTH的处理下均有下降。通过下调相关基因和减少萜类物质的释放,最终达到调节百合花香浓度的需求。

    一种绿萼梅原生质体分离的方法及其应用

    公开(公告)号:CN111718886A

    公开(公告)日:2020-09-29

    申请号:CN202010378846.4

    申请日:2020-05-07

    Abstract: 本发明涉及一种绿萼梅原生质体分离的方法及其应用,所述方法包括:选取绿萼梅枝条,剥皮后完全浸入酶解液中,在27~28℃温度酶解40~50min;酶解液包括:1.5~2.0%纤维素酶R-10、0.75~1.0%离析酶R-10、0.5M甘露醇、10mM KCl、20mM CaCl2、10mM MES、0.1%BSA和0.3%PVP,pH值为5.7~5.8。本发明将绿萼梅茎段木质部通过酶解进行原生质体分离,制备的原生质体产量大,活性高,产量最高为2.3×107个/g,活性达到93%以上。本发明制备得到的绿萼梅原生质体转化效率较高,在绿萼梅遗传转化和基因功能验证方面具备较大的应用价值。

    一种梅花花芽休眠状态的分子检测方法

    公开(公告)号:CN107345247B

    公开(公告)日:2020-09-22

    申请号:CN201710487120.2

    申请日:2017-06-23

    Abstract: 本发明涉及分子生物学领域,具体公开了Pm011905基因(SEQ ID NO.1)在监测梅花休眠状态方面的应用以及一种梅花花芽休眠状态的分子检测方法。所述方法包括如下步骤:(1)分两次采集待测梅花的花芽,分别提取所述花芽的RNA并反转录成cDNA,以所述cDNA为模板,利用SEQ ID NO.2~3所示的引物对Pm011905基因进行荧光定量PCR;(2)比较两次采集的花芽的Pm011905基因的表达量,判断梅花花芽处于何种休眠阶段。本发明首次发现了可通过梅花花芽中Pm011905基因的表达量的变化,监测或判断梅花花芽的休眠状态。提供了一种简单方便、快速准确,能够在分子层面检测梅花花芽休眠状态的方法。

    梅花垂枝性状紧密连锁的纯合SNP分子标记及其检测方法与应用

    公开(公告)号:CN110819732A

    公开(公告)日:2020-02-21

    申请号:CN201911038349.3

    申请日:2019-10-29

    Abstract: 本发明涉及分子生物学及植物分子育种技术领域,具体涉及梅花垂枝性状紧密连锁的纯合SNP分子标记及其检测方法与应用。本发明提供两个梅花垂枝性状紧密连锁的纯合SNP分子标记,分别位于梅花第7号染色体第10245464bp处和第10284630bp处,多态性分别为G/A和G/T。这两个分子标记在垂枝/直枝性状的个体中均表现为纯合基因型,在梅花杂交后代分离群体的垂枝/直枝性状鉴定中重复性好、准确性高,可实现垂枝/直枝性状的幼苗期分子辅助选择,有助于缩短育种周期和提高育种效率。基于该SNP分子标记,本发明还提供梅花垂枝性状调控基因Pm024074,为梅花垂枝性状的调控和遗传育种提供了基础。

    菊花对称性基因CmCYC2c及其应用

    公开(公告)号:CN105695479B

    公开(公告)日:2020-02-21

    申请号:CN201610136742.6

    申请日:2016-03-10

    Abstract: 本发明涉及植物基因,具体公开了一个新的菊花对称性基因CmCYC2c及其在调控菊花舌状花花瓣性状中,尤其是在增加舌状花花瓣数目和增长花瓣长度方面的新应用。所述菊花对称性基因CmCYC2c的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。基于该基因及其上述应用,本发明进一步提供了采用转基因技术,将CmCYC2c基因整合到甘菊基因组中,初步定向改良花型,使其舌状花数目增多,花瓣长度增长,为利用基因工程技术初步选育菊花花型新品种提供了新颖实用的方法。

    一种梅花垂枝性状紧密连锁的SNP分子标记及其检测方法与应用

    公开(公告)号:CN109554493A

    公开(公告)日:2019-04-02

    申请号:CN201811504968.2

    申请日:2018-12-10

    Abstract: 本发明涉及一种梅花垂枝性状紧密连锁的SNP分子标记及其检测方法与应用。本发明提供一种梅花垂枝性状紧密连锁的SNP分子标记,其位于梅花第7号染色体第11182911bp处,多态性为A/C。本发明联合GWAS分析和群体选择方法开发了梅花垂枝性状紧密连锁的SNP分子标记,该SNP分子标记在梅花杂交后代分离群体的垂枝/直枝性状鉴定中重复性好、准确性高,实现了单分子标记鉴定垂枝/直枝性状的准确率达到96%以上。本发明提供的梅花垂枝性状紧密连锁的SNP分子标记及其检测方法可实现垂枝/直枝性状的幼苗期选择,极大缩短了育种周期,提高了育种效率,降低了育种成本,可以在实践中用于梅花分子辅助选择育种。

    百合叶肉原生质体的制备方法

    公开(公告)号:CN109136167A

    公开(公告)日:2019-01-04

    申请号:CN201810762876.8

    申请日:2018-07-12

    CPC classification number: C12N5/04

    Abstract: 本发明公开了百合叶肉原生质体的制备方法,包括步骤:(1)取带有未开放花蕾的百合植株,进行暗处理;(2)取植株的叶片,清洗、消毒;(3)向叶肉材料中加入酶解溶液,于暗处真空抽提,然后暗处静置酶解数小时,得到含有叶肉原生质体的酶解液;(4)所得酶解液用W5溶液稀释,网筛过滤,所得滤液经低速离心,弃上清,用W5溶液重悬原生质体沉淀,低速离心,弃上清,重复洗一次;用MMG溶液重悬原生质体沉淀。本发明克服了百合叶肉原生质体分离效率低的问题,有效建立了百合叶肉原生质体制备的方法。

    一种连翘叶片TRV载体介导病毒诱导基因沉默的方法

    公开(公告)号:CN108949809A

    公开(公告)日:2018-12-07

    申请号:CN201810729116.7

    申请日:2018-07-05

    CPC classification number: C12N15/8218 C12N9/001 C12Y103/99

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体公开了一种连翘叶片TRV载体介导病毒诱导基因沉默的方法。所述方法为:将含有特定目标基因片段的TRV2载体和TRV1载体分别转化到农杆菌感受态中;筛选得到阳性菌株后,进行增殖培养得到含有不同载体的两种单克隆菌体;将两种单克隆菌体离心并利用侵染液分别重悬菌体至OD600=0.9~1.1后,将二者等体积混合,得到混合侵染液;将所述混合侵染液注入连翘中,实现对特定目标基因的沉默。本发明深入探究了可提高侵染成功效率的关键因素,筛选出了最优的侵染液组成配方和侵染时含有菌体的侵染液的OD值。利用本发明所述方法对连翘进行侵染,可使连翘叶片VIGS侵染的成功率达90%以上。

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