一种基于杂交瘤细胞的单链抗体的制备方法

    公开(公告)号:CN103160515A

    公开(公告)日:2013-06-19

    申请号:CN201110420334.0

    申请日:2011-12-15

    Abstract: 本发明公开了一种基于杂交瘤细胞的单链抗体的制备方法。本发明的制备方法,步骤为:以杂交瘤细胞总mRNA为模板反转录得cDNA,选用简并性低的通用引物扩增全套抗体重链可变区和轻链可变区基因;将扩增出的重、轻链可变区基因序列输入IMGT数据库进行分析,排除来源瘤细胞的抗体基因和无义基因,得到候选重链和轻链可变区基因;将该基因翻译成氨基酸序列后进行三维结构同源模建,获得单链抗体的三维模拟结构,与相应抗原靶标分子进行分子对接分析;分析结果正确的候选重链和轻链通过重叠延伸PCR法拼接成单链抗体基因,进行表达及抗体活性鉴定。本发明的制备方法适合所有源于单克隆杂交瘤细胞的单链抗体制备,过程简易、快速,产品质量高。

    3,5-二硝基水杨酸肼酶联免疫检测试剂盒及其使用方法

    公开(公告)号:CN101408544B

    公开(公告)日:2013-06-05

    申请号:CN200810219297.5

    申请日:2008-11-21

    Abstract: 本发明公开了一种3,5-二硝基水杨酸肼酶联免疫检测试剂盒,包括盒体、特异性抗体溶液、3,5-二硝基水杨酸肼标准溶液、酶标板、样品稀释液、洗涤液、二抗溶液、显色液A液、显色液B液和终止液,所述特异性抗体为兔抗3,5-二硝基水杨酸肼抗体,所述酶标板为孔内包被有半抗原与卵清蛋白偶联物的ELISA板条,所述二抗溶液为辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体稀释液。待测样品经过盐酸水解、邻硝基苯甲醛衍生、乙酸乙酯提取、样品稀释液复溶和正己烷脱脂等样品前处理步骤后,使用本试剂盒进行检测分析。本发明所述试剂盒特异性强、最低检测限为74.8ppt,适合于卫生、质监、海关、肉品加工厂、家畜养殖场对饲料、肉类、尿液、乳品等样品中的3,5-二硝基水杨酸肼进行快速检测。

    黄曲霉毒素M1的化学发光酶联免疫检测试剂盒及使用方法

    公开(公告)号:CN103091494A

    公开(公告)日:2013-05-08

    申请号:CN201310013604.5

    申请日:2013-01-14

    Abstract: 本发明公开了一种黄曲霉毒素M1的化学发光酶联免疫检测试剂盒及使用方法,属于化学发光酶联免疫检测技术领域。该检测试剂盒包括包被有黄曲霉毒素M1抗原的化学发光酶标板,黄曲霉毒素M1标准品,黄曲霉毒素M1抗体,酶标抗抗体,化学发光液A液和B液。该试剂盒的使用方法包括如下步骤:(1)待测样品的前处理;(2)依次加入黄曲霉毒素M1标准品溶液或样品、黄曲霉毒素M1抗体,竞争反应后加入酶标抗抗体,最后加入化学发光液通过化学发光免疫分析仪进行黄曲霉毒素M1的定量检测;(3)结果处理与分析。本发明提供的检测试剂盒灵敏度高、稳定性好,适合大量样品的筛查,具有重要的实际应用推广意义。

    细交链孢菌酮酸的半抗原和抗原及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN102516148A

    公开(公告)日:2012-06-27

    申请号:CN201110375159.8

    申请日:2011-11-23

    Abstract: 本发明公开了细交链孢菌酮酸的半抗原和抗原及其制备方法与应用。可作为细交链孢菌酮酸半抗原的化合物,具有如式I所示的结构。细交链孢菌酮酸的抗原是将TeAH和载体蛋白混合后溶解于PBS溶液中,滴入戊二醛溶液,搅拌反应,然后用生理盐水透析得到;或者是将TeAHGA溶于N,N-二甲基甲酰胺中,加入二环已基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺,搅拌过夜;离心,取上清液为A液;取载体蛋白溶解于PBS中,搅拌溶解为B液;将A液滴入B液中反应,然后用生理盐水透析得到。用本发明的抗原免疫动物得到的抗血清的效价可达1:3.2×104,对TeAH的线性范围为0.130ng/mL~8.789ng/mL(IC20-IC80),半抑制浓度为1.095ng/mL,产生的抗体特异性高、灵敏度高、准确度高。式I。

    一种检测克百威的酶联免疫试剂盒

    公开(公告)号:CN101008645B

    公开(公告)日:2012-05-30

    申请号:CN200610122596.8

    申请日:2006-09-30

    Abstract: 本发明公开了一种检测克百威的酶联免疫试剂盒,包括盒体和酶标板,其特征在于还包括抗克百威抗体、辣根过氧化物酶标记抗原、克百威标准溶液、底物液、底物缓冲液与终止液;所述酶标板内包被有能与抗克百威抗体特异结合的第二抗体。本发明的酶联免疫试剂盒采用第二抗体预包被酶标板,节约了克百威抗体的用量,而且克服了直接包被第一抗体不利于试剂盒长期保存的问题。另外,本发明的酶联免疫试剂盒灵敏度高、准确度高、精密度好,能用于水、土壤、农产品等样品中克百威残留的检测,操作简单、快速,能同时检测大批量的样品,成本远低于传统克百威检测方法。

    荧光素标记物及基于荧光偏振的有机磷农药均相多残留免疫检测方法

    公开(公告)号:CN102206485A

    公开(公告)日:2011-10-05

    申请号:CN201110090857.3

    申请日:2011-04-12

    Abstract: 本发明公开了一种荧光素标记物及基于荧光偏振的有机磷农药均相多残留免疫检测方法。本发明通过将待测样品、荧光示踪物和有机磷农药多特异性抗体混合,荧光示踪物和有机磷农药多特异性抗体结合后产生可检测的荧光偏振值,测量混合物的荧光偏振值,通过一系列已知浓度的有机磷农药标准物建立的标准曲线,利用标准曲线计算待测样品中有机磷农药的浓度。本发明方法样品前处理简单,反应过程中无需洗涤分离,检测时间低于3~5min,操作方便;可以同时测定20种有机磷农药,灵敏度在0.003~1.0mg/kg之间;采用96微孔板可以同时测定42个样品(每个样品2次平行),是一种快速、简便、高灵敏度的有机磷农药高通量检测方法。

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