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公开(公告)号：CN102640745A
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN201210135123.7
申请日：2012-05-04
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种胚性材料的超低温冷冻保存复苏方法，包括：取待保存的胚性材料接种入高渗液体培养基，25℃培养3~10d；过滤胚性材料装入冷冻管，加入复合玻璃化保护剂，0℃脱水0～70min，然后装入冷冻盒直接投入液氮速冻，液氮中长期保存；取保存的材料依次经过洗涤、高渗培养、低渗培养、常规培养即可复苏。本发明的胚性材料的超低温冷冻保存方法，操作简单，方便可行，解决了林木体胚产业化的重要瓶颈问题，可实现胚性材料长期保存到1年以上，并能使其保持高频增殖能力，具有很好的实用性，能够产生很好的经济效益和社会效应。
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公开(公告)号：CN102037896B
公开(公告)日：2012-04-11
申请号：CN201010298850.6
申请日：2010-09-28
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸体胚发生同步化调控方法。该方法利用生长激素调节机理，逐步降低2，4-D浓度，附加0.5mg·L-1KT诱导出较为均一的胚性细胞团，然后采用机械过筛的方法将胚性细胞团分级培养，并根据细胞团大小和体胚发生方式的不同，选用不同的后续同步化控制方法。经上述同步化调控后，在球形胚阶段的经分级筛选的杂交鹅掌楸体胚发育同步率达90％左右；而在心形及鱼雷形胚阶段的分级处理同步化率在室温条件下为40％左右，经过适当时间的冷藏会使同步化的比率有所提高；由球形胚阶段的材料发育而来的成熟体胚向再生植株转化率可达70％～80％。
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公开(公告)号：CN102217534A
公开(公告)日：2011-10-19
申请号：CN201110097798.2
申请日：2011-04-19
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种福建山樱花体细胞胚胎发生方法，该方法包括：在诱导培养基上诱导未成熟胚的胚性愈伤组织、采用增殖培养基进行胚性愈伤组织增殖、采用培育培养基和生长培养基分别进行胚状体的发育和成熟，直至长成完整小苗。本发明的福建山樱花体细胞胚胎发生技术为福建山樱花的大规模无性繁殖育苗提供一种周期短、繁殖率高、成本低廉的方法，有效解决了福建山樱花现存林分极为稀少、种子成熟时极易爆裂、种子的采收贮存与发芽极为困难、传统育种方法困难、且育种效率低，无法满足园林绿化及生产需要问题。
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公开(公告)号：CN102037896A
公开(公告)日：2011-05-04
申请号：CN201010298850.6
申请日：2010-09-28
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸体胚发生同步化调控方法。该方法利用生长激素调节机理，逐步降低2，4-D浓度，附加0.5mg·L-1KT诱导出较为均一的胚性细胞团，然后采用机械过筛的方法将胚性细胞团分级培养，并根据细胞团大小和体胚发生方式的不同，选用不同的后续同步化控制方法。经上述同步化调控后，在球形胚阶段的经分级筛选的杂交鹅掌楸体胚发育同步率达90％左右；而在心形及鱼雷形胚阶段的分级处理同步化率在室温条件下为40％左右，经过适当时间的冷藏会使同步化的比率有所提高；由球形胚阶段的材料发育而来的成熟体胚向再生植株转化率可达70％～80％。
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公开(公告)号：CN101112178B
公开(公告)日：2011-03-09
申请号：CN200710131251.3
申请日：2007-09-07
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种杂交鹅掌楸无性系营养体悬浮细胞系诱导体细胞胚胎发生和植株再生的方法，采用母树不同部位的芽、茎尖、叶、花器官及新枝为体细胞胚胎发生诱导材料，经历愈伤组织诱导，悬浮细胞系建立和增殖，悬浮细胞胚胎发育诱导，胚胎发育成熟、体胚萌发和植株再生阶段获得幼苗。本方法突破了无法直接用杂交鹅掌楸成年树营养体诱导体细胞胚胎发生和植株再生技术的难关，为工厂化育苗提供了一种周期短、繁殖率高、成本低廉的新方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN100577796C
公开(公告)日：2010-01-06
申请号：CN200710132706.3
申请日：2007-09-26
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 一种福建柏体细胞胚胎发生和克隆植株再生技术，其特征是采用未成熟合子胚诱导出胚性胚柄细胞团，经过维持、增殖、预成熟和成熟阶段诱导获得体细胞胚，再经萌发培养实现植株再生，其各阶段使用的基本培养基分别为DCR基本培养基和大量元素减半的改良DCR培养基。采用本发明所提供的方法，可以获得大量遗传基础一致的无性系再生植株，为珍稀遗传资源的保存和福建柏苗木的大量生产提供了一种周期短、繁殖效率高、成本低廉的新技术。
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公开(公告)号：CN101165174A
公开(公告)日：2008-04-23
申请号：CN200710132706.3
申请日：2007-09-26
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 一种福建柏体细胞胚胎发生和克隆植株再生技术，其特征是采用未成熟合子胚诱导出胚性胚柄细胞团，经过维持、增殖、预成熟和成熟阶段诱导获得体细胞胚，再经萌发培养实现植株再生，其各阶段使用的基本培养基分别为DCR基本培养基和大量元素减半的改良DCR培养基。采用本发明所提供的方法，可以获得大量遗传基础一致的无性系再生植株，为珍稀遗传资源的保存和福建柏苗木的大量生产提供了一种周期短、繁殖效率高、成本低廉的新技术。
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公开(公告)号：CN118680068A
公开(公告)日：2024-09-24
申请号：CN202410839022.0
申请日：2024-06-26
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种基于乙烯利调控杂交鹅掌楸体胚发生的方法，属于体胚发生技术领域。本发明公开的基于乙烯利调控杂交鹅掌楸体胚发生的方法，将杂交鹅掌楸胚性愈伤组织接种到含有乙烯利或硝酸银的诱导培养基中进行诱导处理，从而调控杂交鹅掌楸的体胚发生效率。外源施加乙烯利对XY‑TN、LWS‑TN、XY‑LWS、XY‑LP基因型均起促进作用；外源施加硝酸银对XY‑TN基因型起促进作用，但对LWS‑TN、XY‑LWS、XY‑LP三个基因型杂交鹅掌楸体胚发生起抑制作用。并且正交实验结果表明所有基因型在只添加乙烯利不添加脱落酸的时候体胚诱导效果最好，证明了脱落酸与乙烯共同作用不会对杂交鹅掌楸体胚发生起到增效作用。
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公开(公告)号：CN118562871A
公开(公告)日：2024-08-30
申请号：CN202410839125.7
申请日：2024-06-26
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高植物光合效率的方法，涉及基因工程技术领域。本发明公开的一种提高植物光合效率的方法，在植物中过表达杂交鹅掌楸LhGLK1基因或LhGLK2基因，培育筛选并获得光合效率提高的转基因植株。杂交鹅掌楸LhGLK1或LhGLK2基因，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.3所示。本发明构建杂交鹅掌楸LhGLK1或LhGLK2基因的表达载体；将构建的表达载体转化到拟南芥中；培育筛选并获得光合效率提高，非绿色组织中叶绿体异位合成，延迟开花，莲座叶数量显著增多，营养生长时期生物量积累增多，HEMA1、LHCA1以及LHCB3基因的表达量上调的转基因拟南芥植株。
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公开(公告)号：CN118562870A
公开(公告)日：2024-08-30
申请号：CN202410839021.6
申请日：2024-06-26
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/82 , C07K14/415 , C12N15/29 , A01H5/00 , A01H6/00
Abstract: 本发明公开了LhBBM基因的应用，涉及植物基因工程技术领域。本发明公开的LhBBM基因在提高良种遗传转化效率中的应用，所述LhBBM基因的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。LhBBM基因提高了杂交鹅掌楸良种的遗传转化效率，将带有LhBBM基因的农杆菌菌液与带有目的基因的农杆菌菌液1:1等量混合；将愈伤组织置于混合菌液中愈伤侵染，筛选培养获得遗传转化效率提高的转基因阳性愈伤。其细胞荧光发光率明显提高，转基因植株的阳性率也显著提高，利用LhBBM基因促进H2B‑mCherry的转化，为转基因效率的提升提供了一种新的思路。
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