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公开(公告)号：CN114703207B
公开(公告)日：2023-05-23
申请号：CN202210359526.3
申请日：2022-04-07
Applicant: 华南农业大学 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于生物领域，公开了一种重组质粒的制备方法，将F1片段、F2片段、HA片段或HA‑2P片段、F4片段同源重组得到重组质粒。通过将H9N2亚型禽流感的血凝素蛋白HA茎端C环上第403位异亮氨酸、第411位缬氨酸均突变为脯氨酸，并分别将突变前后的HA基因插在rDHN3‑mF病毒基因组的P基因和M基因之间的非编码区，获得了两株能稳定表达H9N2AIV的HA蛋白的新城疫基因VII型减毒株重组病毒rDHN3mF‑HA‑2P，经WB验证表明双脯氨酸突变后的HA基因与原HA基因相比，其表达效率更高。该重组病毒有望进一步开发成抗新城疫和H9N2亚型禽流感病毒的二联疫苗。
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公开(公告)号：CN115094088A
公开(公告)日：2022-09-23
申请号：CN202210412508.7
申请日：2022-04-19
Applicant: 华南农业大学 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种pSFV‑flagX‑CMV复制子质粒，采用含塞姆利基森林病毒复制子的载体，并将p54，p22，p32，p72，pCD2v，M448R，MGF505‑7R和M1249L基因分别插入所述载体而得；所述p54，p22，p32，p72，pCD2v，M448R，MGF505‑7R基因序列依次如SEQ ID NO.15‑NO.21所示。该质粒通过插入非洲猪瘟抗原基因(X)，制得的pSFV‑flagX‑CMV复制子质粒在真核细胞能够高效表达ASFV抗原蛋白，有利于非洲猪瘟鸡尾酒DNA疫苗的研制，也有利于通过Flag抗体胶对这些蛋白进行纯化，制取有别于原核表达的，具备翻译后修饰的高质量抗原蛋白；同时，本发明还公开了该质粒的制备方法和鸡尾酒混合疫苗。
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公开(公告)号：CN108300704B
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN201810129825.1
申请日：2018-02-08
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一种用传代细胞系悬浮培养传染性支气管炎病毒的方法，包括：步骤1：取EB66细胞进行复苏与传代培养；步骤2：对步骤1所得EB66细胞进行鸡传染性支气管炎病毒的接种培养；步骤3：接毒后的EB66细胞每隔6‑12h进行取样，测定病毒的EID50，在病毒EID50达到最高时收获病毒并保存，得到培养后的鸡传染性支气管炎病毒。本发明采用EB66细胞作为鸡传染性支气管炎病毒的培养基质，利用提供用全悬浮传代细胞系EB66细胞进行高效的病毒生产，有效提高支气管炎病毒的培育滴度，从而为实现鸡传染性支气管炎病毒疫苗的大规模培养，降低病毒的培育成本。
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公开(公告)号：CN110551853B
公开(公告)日：2021-05-04
申请号：CN201910888108.1
申请日：2019-09-19
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
Abstract: 本发明公开了一种快速区分非洲猪瘟病毒野毒株与CD2V和/或360‑505R基因缺失株的三重PCR检测引物组，三对检测引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：1～6所示。本发明利用三对引物一次性扩增非洲猪瘟病毒CD2V、P72、360‑505R三个基因，减少了鉴定不同基因的检测成本和检测时间；且只需一次PCR反应即可扩增三个不同长度的基因，辨别毒株是否存在基因的缺失。仅需一次PCR扩增即可鉴别出三个基因，对于传统方法分别扩增检测三个基因的样本来说，成本降低了约2/3，具有广阔的市场前景。
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公开(公告)号：CN106916842B
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN201710184041.4
申请日：2017-03-24
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C12N15/70 , C07K14/435 , C07K1/113 , C07K1/22 , C07K1/34
Abstract: 本发明公开一种猫桎首蚤跳蚤唾液过敏原FSA1的表达方法，包括以下步骤：1)使用如SEQ ID No.1和PCR SEQ ID No.2所示的引物对进行PCR扩增；2)构建原核表达载体；3)筛选；4)诱导表达；5)纯化和6)复性。该方法各步骤操作简单，快速高效，是一种针对跳蚤唾液过敏原FSA1原核表达蛋白的纯化工艺，该工艺克服了已有工艺复性后复性浓度小，蛋白易聚集的缺陷，并且大大提高生产效率，降低生产成本，适合工业化大规模生产。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106434568B
公开(公告)日：2020-08-04
申请号：CN201610828630.7
申请日：2016-09-18
Applicant: 广东温氏大华农生物科技有限公司 , 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种抗猪流行性腹泻病毒S蛋白杂交瘤细胞株及其应用，该杂交瘤细胞株命名为杂交瘤细胞株7D3F11，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉·武汉大学，保藏号为CCTCC NO：C201660。本发明通过生物技术手段制备的抗猪流行性腹泻病毒S蛋白杂交瘤细胞株7D3F11，为检测PEDV的感染建立了基础。
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公开(公告)号：CN107556380B
公开(公告)日：2020-07-10
申请号：CN201710787730.4
申请日：2017-09-04
Applicant: 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种减少抗猪圆环病毒多克隆抗体中非特异性抗体的方法，具体为：通过应用PK‑15细胞碎片及由不同动物血清包被的ELISA板与抗猪圆环病毒多克隆抗体在常温下培育，使抗猪圆环病毒多克隆抗体中的非特异性抗体与PK‑15细胞碎片及ELISA板中的抗原相结合，进而除去抗猪圆环病毒多克隆抗体中的部分非特异性抗体。本发明的方法可以有效降低抗猪圆环病毒多克隆抗体中的非特异性抗体含量。
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公开(公告)号：CN111074000A
公开(公告)日：2020-04-28
申请号：CN201911127987.2
申请日：2019-11-18
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与CD2V和/或360-505R基因缺失株的三重荧光定量PCR检测材料及试剂盒，检测材料包括引物和探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1～9所示。本发明利用三组引物探针进行三重荧光定量PCR扩增非洲猪瘟病毒P72、CD2V和360-505R基因，减少了鉴定不同基因的检测成本和检测时间；可以辨别毒株是否存在基因的缺失，且具有良好的特异性及灵敏度。对于传统qPCR，每次仅扩增一个基因来说，本发明每次PCR反应同时扩增3个基因，成本降低了约2/3。
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公开(公告)号：CN110791591A
公开(公告)日：2020-02-14
申请号：CN201911127959.0
申请日：2019-11-18
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与CD2V和360-505R双基因缺失疫苗株LAMP检测引物及其LAMP检测试剂盒，所述检测引物包括两套引物，一套引物针对非洲猪瘟病毒野毒株的CD2v序列，能特异性检测非洲猪瘟病毒野毒株；另一套针对双基因缺失疫苗株,引物的位置在于360-505R基因27942-35500位缺失区两侧，能特异性的检测出该非洲猪瘟疫苗株。该检测方法采用恒温反应的检测手段，仅需加热即可实现整个反应，可以实现快速现场检测，所述方法检测灵敏度高、特异性强、重复性好、检测速度快，可以作为有效的非洲猪瘟病毒野毒株与CD2v和360-505R双基因缺失疫苗株的的基层检测手段。
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公开(公告)号：CN110551853A
公开(公告)日：2019-12-10
申请号：CN201910888108.1
申请日：2019-09-19
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
Abstract: 本发明公开了一种快速区分非洲猪瘟病毒野毒株与CD2V和/或360-505R基因缺失株的三重PCR检测引物组，三对检测引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：1～6所示。本发明利用三对引物一次性扩增非洲猪瘟病毒CD2V、P72、360-505R三个基因，减少了鉴定不同基因的检测成本和检测时间；且只需一次PCR反应即可扩增三个不同长度的基因，辨别毒株是否存在基因的缺失。仅需一次PCR扩增即可鉴别出三个基因，对于传统方法分别扩增检测三个基因的样本来说，成本降低了约2/3，具有广阔的市场前景。
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