公开(公告)号：CN111172185A

公开(公告)日：2020-05-19

申请号：CN202010102716.8

申请日：2020-02-19

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 郭抗抗 ,  赵娣 ,  张亮 ,  张彦明 ,  刘勇

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12P21/02 ,  C07K14/18

Abstract: 本发明公开了一种原核表达载体及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明公开的一种原核表达载体，以pET-32a为原始载体，在其基础上进行改造；双酶切pET-32a原核表达载体，并合成两条含rbs序列及分别含有BamHⅠ、EcoRⅠ的酶切位点的单链，退火形成带缺口的双链，进而连入双酶切的pET-32a原核表达载体，形成仅含单一his标签的原核表达载体pET-32a-gai。PCR扩增C蛋白的基因序列，将其连入pET-32a-gai原核表达载体形成pET-32a-gai-C原核表达载体。本发明的原核表达载体将在外源小分子蛋白(特别是猪瘟病毒石门株衣壳蛋白C)表达的生产中发挥重要作用。