细胞外囊泡介导高效繁殖非洲猪瘟病毒的方法

    公开(公告)号:CN116970573A

    公开(公告)日:2023-10-31

    申请号:CN202211490645.9

    申请日:2022-11-25

    Abstract: 本发明提供了一种高效繁殖非洲猪瘟病毒的方法。传统非洲猪瘟病毒繁殖依赖于原代巨噬细胞,成本高,批次间变异大,无法大规模工业化生产,严重阻碍了非洲猪瘟疫苗的研发和生产。本发明首先提取非洲猪瘟病毒感染的猪肺泡巨噬细胞的细胞外囊泡,再将提取的细胞外囊泡与非洲猪瘟病毒共同孵育永生化野猪肺细胞,72小时感染阳性率可达到100%,病毒滴度可以达到107 TCID50/mL以上。该方法可以满足非洲猪瘟病毒疫苗工业化生产的低成本、稳定性和安全性的要求,避免原代巨噬细胞的缺点,摆脱对原代巨噬细胞的依赖,为工业化生产非洲猪瘟疫苗提供了一种新型繁殖病毒方式。

    一种检测疯草内生真菌中苦马豆素含量的方法

    公开(公告)号:CN102590378B

    公开(公告)日:2013-09-11

    申请号:CN201210024222.8

    申请日:2012-02-05

    Abstract: 本发明为一种测定疯草内生真菌中苦马豆素含量的方法,该方法是将内生真菌菌丝样品经预处理,制备成供试溶液;用高效液相色谱仪蒸发光散射检测器检测,以体积比为0.2~2:0.2~2的乙腈:乙酸铵缓冲液的混合液为流动相,经HILIC柱,将待检样品中的苦马豆素与其他物质分离;以不同浓度苦马豆素的对数与对应的响应峰面积的对数作图,得到苦马豆素的标准曲线。该方法有效地分离内生真菌Undifilum oxytropis中的苦马豆素,直接应用于苦马豆素的定量分析。该方法分离效果好、专属性强、准确性高,分析方法可靠。

    一种降解苦马豆素的节杆菌HW08及其应用

    公开(公告)号:CN101724590B

    公开(公告)日:2011-12-14

    申请号:CN200910218983.5

    申请日:2009-11-16

    Abstract: 本发明公开了一种降解苦马豆素的节杆菌(Arthrobacter sp.)HW08,该菌株于2009年9月28日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,保藏编号CGMCC No.3313。该菌株的菌落呈圆形,随着培养时间的延长由乳白色逐渐转变为淡黄色,表面光滑,湿润,隆起,边缘整齐,不透明。在无机盐培养基中培养48h以内,基本属于杆状细胞,大小为0.3~0.5μm×0.5~1.0μm;培养48h以后逐渐变为球形,直径约为0.6~0.8μm。该菌株从埋置有黄花棘豆(疯草)的上壤中分离、筛选获得,该菌株具有高效降解疯草毒素苦马豆素的能力。

    一种苦马豆素降解酶的编码基因及其应用

    公开(公告)号:CN104845987A

    公开(公告)日:2015-08-19

    申请号:CN201510025831.9

    申请日:2015-01-20

    Abstract: 本发明属于生物技术及酶基因工程领域,涉及一种苦马豆素降解酶的编码基因及其应用。一种苦马豆素降解酶的编码基因(基因AAur_2040),其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。一种所述的编码基因所编码的蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明从能够有效降解苦马豆素的Arthrobacter sp.HW 08中克隆得到负责苦马豆素降解的基因片段—AAur_2040。本发明能够为苦马豆素降解提供有效的生物技术手段,对于动物采食疯草引起的中毒修复具有重要意义。

    一种检测疯草内生真菌中苦马豆素含量的方法

    公开(公告)号:CN102590378A

    公开(公告)日:2012-07-18

    申请号:CN201210024222.8

    申请日:2012-02-05

    Abstract: 本发明为一种测定疯草内生真菌中苦马豆素含量的方法,该方法是将内生真菌菌丝样品经预处理,制备成供试溶液;用高效液相色谱仪蒸发光散射检测器检测,以体积比为0.2~2:0.2~2的乙腈:乙酸铵缓冲液的混合液为流动相,经HILIC柱,将待检样品中的苦马豆素与其他物质分离;以不同浓度苦马豆素的对数与对应的响应峰面积的对数作图,得到苦马豆素的标准曲线。该方法有效地分离内生真菌Undifilum oxytropis中的苦马豆素,直接应用于苦马豆素的定量分析。该方法分离效果好、专属性强、准确性高,分析方法可靠。

    一种苦马豆素降解酶的编码基因及其应用

    公开(公告)号:CN104845987B

    公开(公告)日:2018-04-17

    申请号:CN201510025831.9

    申请日:2015-01-20

    Abstract: 本发明属于生物技术及酶基因工程领域,涉及一种苦马豆素降解酶的编码基因及其应用。一种苦马豆素降解酶的编码基因(基因AAur_2040),其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。一种所述的编码基因所编码的蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明从能够有效降解苦马豆素的Arthrobacter sp.HW 08中克隆得到负责苦马豆素降解的基因片段—AAur_2040。本发明能够为苦马豆素降解提供有效的生物技术手段,对于动物采食疯草引起的中毒修复具有重要意义。

    一种降解苦马豆素的节杆菌HW08及其应用

    公开(公告)号:CN101724590A

    公开(公告)日:2010-06-09

    申请号:CN200910218983.5

    申请日:2009-11-16

    Abstract: 本发明公开了一种降解苦马豆素的节杆菌(Arthrobacter sp.)HW08,该菌株于2009年9月28日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,保藏编号CGMCC No.3313。该菌株的菌落呈圆形,随着培养时间的延长由乳白色逐渐转变为淡黄色,表面光滑,湿润,隆起,边缘整齐,不透明。在无机盐培养基中培养48h以内,基本属于杆状细胞,大小为0.3~0.5μm×0.5~1.0μm;培养48h以后逐渐变为球形,直径约为0.6~0.8μm。该菌株从埋置有黄花棘豆(疯草)的上壤中分离、筛选获得,该菌株具有高效降解疯草毒素苦马豆素的能力。

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