公开(公告)号：CN101892308B

公开(公告)日：2012-09-26

申请号：CN201010170843.8

申请日：2010-05-13

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 孙广宇 ,  朱刚 ,  张荣 ,  张利娜

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种用于检测苹果褐斑病的特异扩增引物，利用特异性引物快速获取苹果褐斑病基因片段的方法，避免了病原菌分离困难给实际研究带来的障碍。还公开了利用该特异扩增引物对苹果褐斑病菌快速分子检测方法：先采集田间发病叶片，用灭过菌的昆虫针将苹果褐斑病分生孢子盘挑置于白色纸片；再配制PCR反应体系；然后将分生孢子盘转至装有PCR反应体系的PCR扩增小管中，离心，使分生孢子盘完全浸没于配制的PCR反应体系中；最后进行PCR扩增并对扩增物进行检测。本发明通过改变PCR扩增反应体系和扩增程序，就可以达到直接对病原菌目标片段的扩增目的。避免了对病原菌的分离及DNA的另外提取，缩短了实验流程，提高了检测效率。

公开(公告)号：CN101892308A

公开(公告)日：2010-11-24

申请号：CN201010170843.8

申请日：2010-05-13

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 孙广宇 ,  朱刚 ,  张荣 ,  张利娜

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种用于检测苹果褐斑病的特异扩增引物，利用特异性引物快速获取苹果褐斑病基因片段的方法，避免了病原菌分离困难给实际研究带来的障碍。还公开了利用该特异扩增引物对苹果褐斑病菌快速分子检测方法：先采集田间发病叶片，用灭过菌的昆虫针将苹果褐斑病分生孢子盘挑置于白色纸片；再配制PCR反应体系；然后将分生孢子盘转至装有PCR反应体系的PCR扩增小管中，离心，使分生孢子盘完全浸没于配制的PCR反应体系中；最后进行PCR扩增并对扩增物进行检测。本发明通过改变PCR扩增反应体系和扩增程序，就可以达到直接对病原菌目标片段的扩增目的。避免了对病原菌的分离及DNA的另外提取，缩短了实验流程，提高了检测效率。