公开(公告)号：CN119876039A

公开(公告)日：2025-04-25

申请号：CN202510085252.7

申请日：2025-01-20

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 刘军 ,  唐姣美 ,  周群莉 ,  张涌 ,  祝振亮 ,  韩静

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/867 ,  C12N15/37 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种提高乳腺上皮细胞系传代次数的方法及其应用，属于乳腺上皮细胞系技术领域。本发明首次发现将绝缘子‑支架附着区外源性片段HS4‑SAR片段，与p‑Ef1a‑SV40LT‑Puro载体或pEF1a‑eGFP载体连接，转染商业化的永生化细胞系和原代细胞系，均可以显著提高乳腺上皮细胞系的传代次数，传代120代细胞形态仍然正常、未恶性转化、基因表达水平仍然未出现降低的现象，实现了永生化；建成的奶山羊乳腺上皮细胞系仍然具有合成和分泌蛋白的能力；提供的提高乳腺上皮细胞系传代次数的方法，简单易操作，对永生化细胞系和原代细胞系均具有显著的效果，有望提高多种乳腺上皮细胞系的稳定传代的传代次数，降低相关研究的细胞成本。