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    人源OAT1-MRP2-UGT2B7三重稳定转染细胞株及其构建方法
    1.
    发明授权
    人源OAT1-MRP2-UGT2B7三重稳定转染细胞株及其构建方法 有权

    公开(公告)号：CN109652448B

    公开(公告)日：2021-03-12

    申请号：CN201811642796.5

    申请日：2018-12-29

    Applicant: 苏州大学

    Inventor： 张洪建 ,  王美玉

    IPC: C12N15/85 ,  C12N5/10

    Abstract: 本发明涉及一种人源OAT1‑MRP2‑UGT2B7三重稳定转染细胞株的构建方法及功能验证：将hOAT1的目的基因与pcDNA3.1/Hygro(+)表达载体组装，hMRP2的目的基因与pcDNA3.1/G418(+)表达载体组装，hUGT2B7的目的基因与pcDNA3.1/Puromycin(+)表达载体组装，构建pcDNA3.1/Hygro(+)‑hOAT1质粒、pcDNA3.1/G418(+)‑hMRP2质粒和pcDNA3.1/Puromycin(+)‑hUGT2B7质粒；其中，hOAT1、hMRP2和hUGT2B7目的基因的核苷酸序列分别如SEQ ID No.1‑3所示；采用脂质体法将构建的三种质粒依次转染至MDCKII细胞、Caco2细胞或HEK293细胞，分别使用特异抗生素筛选出阳性克隆，并通过使用阳性化合物进行转运或代谢功能验证，确认细胞株同时稳定表达OAT1、MRP2和UGT2B7基因及其蛋白。本发明的三重稳定转染细胞株可用于模拟肝内OAT1介导的摄取、MRP2介导的外排及UGT2B7介导的二相代谢功能，是评价药物处置机制的重要体外研究手段。

    基于吉西他滨结构的前体药物及其应用
    2.
    发明授权
    基于吉西他滨结构的前体药物及其应用 有权

    公开(公告)号：CN104961786B

    公开(公告)日：2018-09-25

    申请号：CN201510305991.9

    申请日：2015-06-05

    Applicant: 苏州大学

    Inventor： 张洪建 ,  祁慧昕

    IPC: C07H19/10 ,  C07H1/00 ,  A61K31/7068 ,  A61P35/00

    Abstract: 本发明涉及一种基于吉西他滨结构的前体药物设计及其应用，该前体药物在吉西他滨五元糖环的5’‑OH位置上引入磷酸酯长链基团，增强化合物的脂溶性，改善化合物透膜率，在一些缺乏核酸转运蛋白的肿瘤中，脂溶性的前药能够通过被动扩散及主动转运进入肿瘤，进而抑制肿瘤的生长，此外本发明通过口服方式给予前药，能够获得较腹腔注射吉西他滨盐酸盐更好或相同的抑制肿瘤生长的疗效。

    基于吉西他滨结构的前体药物及其应用
    5.
    发明公开
    基于吉西他滨结构的前体药物及其应用 有权

    公开(公告)号：CN104961786A

    公开(公告)日：2015-10-07

    申请号：CN201510305991.9

    申请日：2015-06-05

    Applicant: 苏州大学

    Inventor： 张洪建 ,  祁慧昕

    IPC: C07H19/10 ,  C07H1/00 ,  A61K31/7068 ,  A61P35/00

    Abstract: 本发明涉及一种基于吉西他滨结构的前体药物设计及其应用，该前体药物在吉西他滨五元糖环的5’-OH位置上引入磷酸酯长链基团，增强化合物的脂溶性，改善化合物透膜率，在一些缺乏核酸转运蛋白的肿瘤中，脂溶性的前药能够通过被动扩散及主动转运进入肿瘤，进而抑制肿瘤的生长，此外本发明通过口服方式给予前药，能够获得较腹腔注射吉西他滨盐酸盐更好或相同的抑制肿瘤生长的疗效。

    人源OAT1-MRP2-UGT2B7三重稳定转染细胞株及其构建方法
    7.
    发明公开
    人源OAT1-MRP2-UGT2B7三重稳定转染细胞株及其构建方法 有权

    公开(公告)号：CN109652448A

    公开(公告)日：2019-04-19

    申请号：CN201811642796.5

    申请日：2018-12-29

    Applicant: 苏州大学

    Inventor： 张洪建 ,  王美玉

    IPC: C12N15/85 ,  C12N5/10

    Abstract: 本发明涉及一种人源OAT1-MRP2-UGT2B7三重稳定转染细胞株的构建方法及功能验证：将hOAT1的目的基因与pcDNA3.1/Hygro(+)表达载体组装，hMRP2的目的基因与pcDNA3.1/G418(+)表达载体组装，hUGT2B7的目的基因与pcDNA3.1/Puromycin(+)表达载体组装，构建pcDNA3.1/Hygro(+)-hOAT1质粒、pcDNA3.1/G418(+)-hMRP2质粒和pcDNA3.1/Puromycin(+)-hUGT2B7质粒；其中，hOAT1、hMRP2和hUGT2B7目的基因的核苷酸序列分别如SEQ ID No.1-3所示；采用脂质体法将构建的三种质粒依次转染至MDCKII细胞、Caco2细胞或HEK293细胞，分别使用特异抗生素筛选出阳性克隆，并通过使用阳性化合物进行转运或代谢功能验证，确认细胞株同时稳定表达OAT1、MRP2和UGT2B7基因及其蛋白。本发明的三重稳定转染细胞株可用于模拟肝内OAT1介导的摄取、MRP2介导的外排及UGT2B7介导的二相代谢功能，是评价药物处置机制的重要体外研究手段。

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