公开(公告)号：CN110628845A

公开(公告)日：2019-12-31

申请号：CN201910995475.1

申请日：2019-10-18

Applicant: 福州大学

Inventor： 魏峥 ,  黄海月 ,  林江慧 ,  梁群焘

IPC: C12P19/14 ,  C12P19/26 ,  C12P19/12 ,  G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/14 ,  G01N30/72

Abstract: 本发明提供一种蛤蟆油中硫酸乙酰肝素/肝素的提取与结构分析方法。所述方法为先用微量的胰蛋白酶酶解蛤蟆油，再通过DEAE阴离子交换色谱柱除去蛋白等杂质，并经透析、冻干、浓缩得到蛤蟆油糖胺聚糖（OR-GAG）。糖胺聚糖由重复的二糖单元构成，通过肝素酶Ⅰ、肝素酶Ⅱ、肝素酶Ⅲ特异性酶解OR-GAG，再利用分子排阻色谱法，得到硫酸乙酰肝素二糖/肝素二糖（HS/HP二糖）。HS/HP二糖经2-氨基吖啶酮（AMAC）荧光标记后，利用反相色谱柱C18柱进行质谱分析，得到蛤蟆油中各二糖组分的结构与摩尔百分比。最后，建立HS/HP区域结构模型。

公开(公告)号：CN110592165B

公开(公告)日：2021-04-27

申请号：CN201910996268.8

申请日：2019-10-18

Applicant: 福州大学

Inventor： 魏峥 ,  黄海月 ,  林江慧 ,  梁群焘

IPC: C12P19/26 ,  C12P19/14 ,  G01N30/88

Abstract: 本发明提供燕窝中硫酸乙酰肝素/肝素的提取方法与结构解析，属于天然产物制备纯化领域。该方法先将粉末状燕窝用胰蛋白酶酶解，再通过DEAE阴离子交换色谱柱、透析、冻干等一系列步骤得到燕窝糖胺聚糖。然后样品用肝素酶Ⅰ、肝素酶Ⅱ、肝素酶Ⅲ特异性酶解燕窝糖胺聚糖至硫酸乙酰肝素/肝素二糖，再利用分子排阻色谱法，分离纯化得到硫酸乙酰肝素二糖/肝素二糖。硫酸乙酰肝素二糖/肝素二糖以离子对试剂为流动相，利用LC/MS‑ITTOF分析二糖组分的结构并得到摩尔百分比，最后建立硫酸乙酰肝素二糖/肝素区域结构模型。

公开(公告)号：CN110669152B

公开(公告)日：2020-10-09

申请号：CN201910995448.4

申请日：2019-10-18

Applicant: 福州大学

Inventor： 魏峥 ,  黄海月 ,  林江慧 ,  梁群焘

IPC: C08B37/08 ,  C12P19/26 ,  C12P21/06 ,  G01N30/96 ,  G01N30/72 ,  G01N30/74 ,  G01N30/89 ,  G01N30/06 ,  G01N30/14 ,  G01N30/86 ,  G01N30/02

Abstract: 本发明提供一种从蛤蟆油中提取硫酸软骨素/硫酸皮肤素/透明质酸的方法。所述方法先将蛤蟆油充分溶胀后加入的胰蛋白酶酶解蛤蟆油，再通过DEAE阴离子交换色谱柱提取蛤蟆油中的糖胺聚糖OR‑GAG，然后经透析、冻干、浓缩后，用硫酸软骨素ABC酶特异性酶解OR‑GAG，足量的酶可将长链酶解至硫酸软骨素/硫酸皮肤素/透明质酸(CS/DS/HA)二糖单元。CS/DS/HA二糖单元经2‑氨基吖啶酮荧光标记后，利用LC/MS‑ITTOF进行结构分析，得到蛤蟆油中各二糖组分的结构与摩尔百分比。

公开(公告)号：CN110592165A

公开(公告)日：2019-12-20

申请号：CN201910996268.8

申请日：2019-10-18

Applicant: 福州大学

Inventor： 魏峥 ,  黄海月 ,  林江慧 ,  梁群焘

IPC: C12P19/26 ,  C12P19/14 ,  G01N30/88

Abstract: 本发明提供燕窝中硫酸乙酰肝素/肝素的提取方法与结构解析，属于天然产物制备纯化领域。该方法先将粉末状燕窝用胰蛋白酶酶解，再通过DEAE阴离子交换色谱柱、透析、冻干等一系列步骤得到燕窝糖胺聚糖。然后样品用肝素酶Ⅰ、肝素酶Ⅱ、肝素酶Ⅲ特异性酶解燕窝糖胺聚糖至硫酸乙酰肝素/肝素二糖，再利用分子排阻色谱法，分离纯化得到硫酸乙酰肝素二糖/肝素二糖。硫酸乙酰肝素二糖/肝素二糖以离子对试剂为流动相，利用LC/MS-ITTOF分析二糖组分的结构并得到摩尔百分比，最后建立硫酸乙酰肝素二糖/肝素区域结构模型。

公开(公告)号：CN110642963A

公开(公告)日：2020-01-03

申请号：CN201910995447.X

申请日：2019-10-18

Applicant: 福州大学

Inventor： 魏峥 ,  黄海月 ,  刘苏 ,  林江慧 ,  梁群焘

IPC: C08B37/08

Abstract: 本发明公开了一种提取阿胶中阿胶硫酸软骨素/硫酸皮肤素/透明质酸的方法，该提取方法通过酶解、DEAE离子交换、高效液相色谱分离等一系列步骤，能够将阿胶中硫酸软骨素/硫酸皮肤素/透明质酸提取出来，并利用液相色谱-离子阱/飞行时间质谱（LC-MS-ITTOF）确定阿胶中阿胶硫酸软骨素/硫酸皮肤素/透明质酸二糖组分含量，这对开发阿胶作为保健食品和药品的新功能有重要意义。

公开(公告)号：CN110628845B

公开(公告)日：2021-12-21

申请号：CN201910995475.1

申请日：2019-10-18

Applicant: 福州大学

Inventor： 魏峥 ,  黄海月 ,  林江慧 ,  梁群焘

IPC: C12P19/14 ,  C12P19/26 ,  C12P19/12 ,  G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/14 ,  G01N30/72

Abstract: 本发明提供一种蛤蟆油中硫酸乙酰肝素/肝素的提取与结构分析方法。所述方法为先用微量的胰蛋白酶酶解蛤蟆油，再通过DEAE阴离子交换色谱柱除去蛋白等杂质，并经透析、冻干、浓缩得到蛤蟆油糖胺聚糖（OR‑GAG）。糖胺聚糖由重复的二糖单元构成，通过肝素酶Ⅰ、肝素酶Ⅱ、肝素酶Ⅲ特异性酶解OR‑GAG，再利用分子排阻色谱法，得到硫酸乙酰肝素二糖/肝素二糖（HS/HP二糖）。HS/HP二糖经2‑氨基吖啶酮（AMAC）荧光标记后，利用反相色谱柱C18柱进行质谱分析，得到蛤蟆油中各二糖组分的结构与摩尔百分比。最后，建立HS/HP区域结构模型。

公开(公告)号：CN110669152A

公开(公告)日：2020-01-10

申请号：CN201910995448.4

申请日：2019-10-18

Applicant: 福州大学

Inventor： 魏峥 ,  黄海月 ,  林江慧 ,  梁群焘

IPC: C08B37/08 ,  C12P19/26 ,  C12P21/06 ,  G01N30/96 ,  G01N30/72 ,  G01N30/74 ,  G01N30/89 ,  G01N30/06 ,  G01N30/14 ,  G01N30/86 ,  G01N30/02

Abstract: 本发明提供一种从蛤蟆油中提取硫酸软骨素/硫酸皮肤素/透明质酸的方法。所述方法先将蛤蟆油充分溶胀后加入的胰蛋白酶酶解蛤蟆油，再通过DEAE阴离子交换色谱柱提取蛤蟆油中的糖胺聚糖OR-GAG，然后经透析、冻干、浓缩后，用硫酸软骨素ABC酶特异性酶解OR-GAG，足量的酶可将长链酶解至硫酸软骨素/硫酸皮肤素/透明质酸(CS/DS/HA)二糖单元。CS/DS/HA二糖单元经2-氨基吖啶酮荧光标记后，利用LC/MS-ITTOF进行结构分析，得到蛤蟆油中各二糖组分的结构与摩尔百分比。