公开(公告)号：CN117512172B

公开(公告)日：2024-12-13

申请号：CN202311568877.6

申请日：2023-11-23

Applicant: 海南大学

Inventor： 万迎朗 ,  陆忠亮 ,  周广振

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供了用于快速鉴别槟榔鲜果果形的SSR分子标记引物，属于生物技术领域，所述引物包括SSR‑2‑F和SSR‑2‑R，所述SSR‑2‑F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述SSR‑2‑R的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该SSR分子标记引物对槟榔鲜果果形的鉴别具有较高的特异性，利用该SSR分子标记引物对槟榔基因组进行PCR扩增，扩增产物进行凝胶电泳，根据所得凝胶电泳图谱即可鉴别槟榔鲜果果形，将该SSR分子标记引物用于鉴别槟榔鲜果果形，具有易于操作、鉴别效率高和结果可靠的特点,具有极大的潜在应用价值。本发明还提供了用于快速鉴别槟榔鲜果果形的试剂盒及应用。

公开(公告)号：CN113403419A

公开(公告)日：2021-09-17

申请号：CN202110878832.3

申请日：2021-08-02

Applicant: 海南大学

Inventor： 万迎朗 ,  崔闯

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种实时荧光定量PCR检测试剂盒、判断槟榔幼苗缺锌状态的方法，实验基地进行槟榔缺锌的处理；进行样品的采集；进行ZIP家族分析和引物设计；进行引物的特异性验证；进行实时荧光定量PCR检测。本发明的基于ZIP家族的实时荧光定量的槟榔缺锌的诊断试剂盒，只需提供样品按照所提供的方法进行检测，即可确定槟榔幼苗缺铁和缺锌状态的原因，为后续预防提供依据。本发明通过结构域的差异获得ZIP家族基因，并通过实时荧光定量PCR验证，获得可以判断槟榔缺锌的状态的AcZIP基因；通过引物凝胶成像以及熔解曲线说明了引物的特异性，实时荧光定量PCR结果的相互印证说明了结果的可靠性。

公开(公告)号：CN117512172A

公开(公告)日：2024-02-06

申请号：CN202311568877.6

申请日：2023-11-23

Applicant: 海南大学

Inventor： 万迎朗 ,  陆忠亮 ,  周广振

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供了用于快速鉴别槟榔鲜果果形的SSR分子标记引物，属于生物技术领域，所述引物包括SSR‑2‑F和SSR‑2‑R，所述SSR‑2‑F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述SSR‑2‑R的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该SSR分子标记引物对槟榔鲜果果形的鉴别具有较高的特异性，利用该SSR分子标记引物对槟榔基因组进行PCR扩增，扩增产物进行凝胶电泳，根据所得凝胶电泳图谱即可鉴别槟榔鲜果果形，将该SSR分子标记引物用于鉴别槟榔鲜果果形，具有易于操作、鉴别效率高和结果可靠的特点,具有极大的潜在应用价值。本发明还提供了用于快速鉴别槟榔鲜果果形的试剂盒及应用。

公开(公告)号：CN113433327A

公开(公告)日：2021-09-24

申请号：CN202110791548.2

申请日：2021-07-13

Applicant: 海南大学

Inventor： 万迎朗 ,  赵宏伟 ,  李漪琳 ,  王云鹤

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  G01N33/58 ,  G01N33/543 ,  G01N33/53 ,  G01N21/31

Abstract: 本发明属于生理与生物化学技术领域，公开了一种通过槟榔碱与脯氨酸含量检测槟榔幼苗干旱状态的方法，包括槟榔幼苗干旱处理：将槟榔幼苗栽种于塑料盆中，放置在光照培养箱内培养，进行不浇水处理；样品的采集：分别在处理后0、2、4、6、8、10 天后收集槟榔叶片和根系样品，液氮速冻后存于冰箱储存；使用间接ELISA法对槟榔碱含量进行测定；使用水浴浸提法对脯氨酸含量进行测定；通过测定槟榔碱含量与脯氨酸含量的比值来判断槟榔幼苗的干旱状态。本发明通过测定槟榔碱含量与脯氨酸含量，并且计算二者比值，即可判断槟榔幼苗的干旱状态，只需取槟榔幼苗的微量组织，即可进行测定，测量结果相对准确，易于判断。

公开(公告)号：CN113403418A

公开(公告)日：2021-09-17

申请号：CN202110878790.3

申请日：2021-08-02

Applicant: 海南大学

Inventor： 万迎朗 ,  安启源

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种检测槟榔缺铁的试剂盒及判断槟榔幼苗缺铁状态的方法，快速检测槟榔缺铁的实时荧光定量PCR检测试剂盒，包括一组基于ZIP家族的检测引物以及内参引物；所述基于ZIP家族的检测引物，包括特异性引物ZIP1和特异性引物ZIP2。本发明利用缺铁处理引起基因表达量的差异，根据差异基因在不同处理的表达量的趋势变化不同，得到检测槟榔缺铁的检测引物，对后续处理提供依据；试剂盒内的检测引物具有很高的特异性，只需提供正常的样品以及出现黄化的样品，即可通过实时荧光定量PCR技术判断槟榔幼苗是否缺铁的情况，具有特异性强、易于操作、结果可靠的特征，具有极大的潜在应用价值。

公开(公告)号：CN111808184A

公开(公告)日：2020-10-23

申请号：CN202010670380.5

申请日：2020-07-13

Applicant: 海南大学

Inventor： 赵洪伟 ,  万迎朗 ,  马华青

IPC: C07K14/77 ,  C07K14/795 ,  C07K16/44 ,  C07K1/34 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了槟榔次碱作为槟榔碱半抗原在制备槟榔碱抗原中的应用，并公开了相应的槟榔碱抗原和槟榔碱抗体及其制备方法和应用。本发明采用槟榔次碱作为半抗原，与载体蛋白进行偶联后所得的偶联物作为槟榔碱的完全抗原，可有效刺激小鼠产生特异性好灵敏度高的槟榔碱抗体，所获得的槟榔碱单抗与槟榔次碱、去甲槟榔碱和去甲槟榔次碱等类似物无显著交叉反应。采用本发明的槟榔碱特异性抗体制成试纸条和酶联免疫检测试剂盒，能够特异性识别槟榔碱，而不会是被与槟榔碱结构类似的槟榔次碱、去甲槟榔碱和去甲槟榔次碱等，具有高灵敏度、高特异性的特点，检测过程方便快捷，操作简便，可适用于大范围筛选和检测。