公开(公告)号：CN101914522A

公开(公告)日：2010-12-15

申请号：CN201010107448.5

申请日：2010-01-30

Applicant: 浙江省海洋水产养殖研究所

Inventor： 陈少波 ,  丁文勇 ,  仇建标 ,  陈骁 ,  刘伟成 ,  艾为明 ,  谢起浪 ,  李尚鲁 ,  王成义 ,  王广银 ,  郑春芳 ,  池伟 ,  黄丽

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明涉及红树植物的DNA提取方法，包括以下步骤：(1)、取叶片研磨，加入预热的2％CTAB提取液溶解，然后加入2％体积的PVP；(2)、温浴后加入少量RNase保温，再加入氯仿-异戊醇混合液后，常温下高速离心；(3)、取上清液转入离心管，加入预热的2％CTAB提取液，再加入氯仿-异戊醇混合液混合后，常温下高速离心；(4)、取上清液再转入离心管，加入NaCl溶液，并加入冰冷异丙醇混合后，低温条件下放置沉淀DNA；(5)、低温下高速离心，弃上清液，回收沉淀，用乙醇洗涤风干后加入TE缓冲液，置于低温下保存，本发明能有效除去DNA提取过程中产生的多糖和单宁，得到的红树植物DNA含量大、纯度高。

公开(公告)号：CN102321149A

公开(公告)日：2012-01-18

申请号：CN201110275526.7

申请日：2011-09-16

Applicant: 浙江省海洋水产养殖研究所

Inventor： 郑春芳 ,  于冯 ,  陈少波 ,  施梦茄 ,  刘伟成 ,  艾为明 ,  谢起浪 ,  李尚鲁 ,  陈骁 ,  仇建标 ,  周志明 ,  黄丽 ,  马小伟

IPC: C07K1/30 ,  C07K1/14 ,  C07K1/28 ,  C07K1/26

Abstract: 本发明提供经济、简便、易行、快速的适用于红树植物的总蛋白的提取以及双向电泳方法，经反复实验证明该方法样品制备的重复性好且图谱清晰，其技术方案可专门适用于红树植物的蛋白质提取以及双向电泳方法。本发明使用20%TCA-丙酮溶液提取蛋白质，20%的TCA可以更好的去除盐离子，其中80%浓度的丙酮则对蛋白质与缩合单宁的复合物的分离作用效果显著，可较好分离该复合物，去除单宁，提高蛋白质浓度，用20%TCA-丙酮所提取的红树植物蛋白质含量较高，2-DE电泳图谱清晰，且操作简单，重复性好，试剂毒性较低。

公开(公告)号：CN102321149B

公开(公告)日：2013-03-27

申请号：CN201110275526.7

申请日：2011-09-16

Applicant: 浙江省海洋水产养殖研究所

Inventor： 郑春芳 ,  于冯 ,  陈少波 ,  施梦茄 ,  刘伟成 ,  艾为明 ,  谢起浪 ,  李尚鲁 ,  陈骁 ,  仇建标 ,  周志明 ,  黄丽 ,  马小伟

IPC: C07K1/30 ,  C07K1/14 ,  C07K1/28 ,  C07K1/26

Abstract: 本发明提供经济、简便、易行、快速的适用于红树植物的总蛋白的提取以及双向电泳方法，经反复实验证明该方法样品制备的重复性好且图谱清晰，其技术方案可专门适用于红树植物的蛋白质提取以及双向电泳方法。本发明使用20%TCA-丙酮溶液提取蛋白质，20%的TCA可以更好的去除盐离子，其中80%浓度的丙酮则对蛋白质与缩合单宁的复合物的分离作用效果显著，可较好分离该复合物，去除单宁，提高蛋白质浓度，用20%TCA-丙酮所提取的红树植物蛋白质含量较高，2-DE电泳图谱清晰，且操作简单，重复性好，试剂毒性较低。