一种解脂耶氏酵母高拷贝数转化子的制备方法

    公开(公告)号:CN119639792A

    公开(公告)日:2025-03-18

    申请号:CN202411891032.5

    申请日:2024-12-20

    Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域,公开了一种解脂耶氏酵母高拷贝数转化子的制备方法。本发明方法通过将不带同源臂的DL4基因表达盒与营养缺陷标记基因表达盒共同转入解脂耶氏酵母中,可以实现NEHJ效率明显提升。本发明方法不需要在表达的关键基因上加入同源臂,在代谢改造过程中,将不带同源臂的DL4表达盒和关键基因共同转入解脂耶氏酵母细胞,DL4能够促进非同源过程的进行,使得外源基因随机插入基因组DNA的概率增大,提高NHEJ效率。因此,当关键基因为营养缺陷筛选标记时,较大菌落基本比较小菌落的关键基因拷贝数更高。综上所述,实现了构建解脂耶氏酵母高拷贝数转化子的简便方法。

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