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公开(公告)号：CN114507613A
公开(公告)日：2022-05-17
申请号：CN202210093958.4
申请日：2022-01-26
Applicant: 浙江大学杭州国际科创中心
IPC: C12N1/19 , C12N15/52 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12N15/61 , C12N15/81 , C12P15/00 , C12R1/84 , C12R1/865 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种发酵生产α‑檀香烯的酵母工程菌及其应用，属于生物工程领域。以酵母作为出发菌株，通过导入基因构建获得所述发酵生产α‑檀香烯的酵母工程菌。本发明的酵母工程菌可以高效生产α‑檀香烯，其摇瓶发酵产量近3.0g/L，1L发酵罐发酵产量最高可达15g/L。通过高表达代谢途径中关键限速酶、增强前体供应以及多拷贝策略，提高α‑檀香烯生物合成途径中的代谢通量，利用毕赤酵母高效生成α‑檀香烯，具有周期短、环保和节约资源的特点。本发明高产α‑檀香烯的酵母工程菌具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN113621634A
公开(公告)日：2021-11-09
申请号：CN202110769874.3
申请日：2021-07-07
Applicant: 浙江大学杭州国际科创中心
Abstract: 本发明公开了一种增加基因组突变率的碱基编辑系统及碱基编辑方法，所述碱基编辑系统包括编码胞嘧啶脱氨酶的基因和编码特异性单链DNA结合蛋白的基因。利用本发明构建的碱基编辑系统，对酿酒酵母基因组进行进化，在操作上具有简单，效率高等优点，在功能上，能提高β‑胡萝卜素的产量、提高对有机试剂的耐受性。并且本发明构建的基因组碱基编辑系统在毕赤酵母、大肠杆菌以及罗尔斯通氏菌等大部分工业菌株中同样适用。所以，使用本发明碱基编辑系统能够用于提高菌株的基因组突变率，基因组中突变碱基累积，造成菌体性状和功能的多样性，根据工业生产要求，可对某一性状进行连续性状筛选和定向进化。
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公开(公告)号：CN114507613B
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202210093958.4
申请日：2022-01-26
Applicant: 浙江大学杭州国际科创中心
IPC: C12N1/19 , C12N15/52 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12N15/61 , C12N15/81 , C12P15/00 , C12R1/84 , C12R1/865 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种发酵生产α‑檀香烯的酵母工程菌及其应用，属于生物工程领域。以酵母作为出发菌株，通过导入基因构建获得所述发酵生产α‑檀香烯的酵母工程菌。本发明的酵母工程菌可以高效生产α‑檀香烯，其摇瓶发酵产量近3.0g/L，1L发酵罐发酵产量最高可达15g/L。通过高表达代谢途径中关键限速酶、增强前体供应以及多拷贝策略，提高α‑檀香烯生物合成途径中的代谢通量，利用毕赤酵母高效生成α‑檀香烯，具有周期短、环保和节约资源的特点。本发明高产α‑檀香烯的酵母工程菌具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN114574516B
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202210053387.1
申请日：2022-01-18
Applicant: 浙江大学杭州国际科创中心
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9的酵母基因组稳定整合方法。本发明通过筛选在酵母基因组中筛选到了17个稳定整合的位点，可以用于外源基因的稳定整合，特别是对于需要整个多个基因的化合物生物合成途径的整合，具有很好的效果。本发明开发的基于CRISPR/Cas9的酵母基因组稳定整合方法，能够实现外源基因的稳定整合，为外源基因在酵母体内的稳定组装提供了有力工具。
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公开(公告)号：CN117946883A
公开(公告)日：2024-04-30
申请号：CN202410232823.0
申请日：2024-02-29
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种用于高通量基因组编辑和文库构建的基因工程菌及其应用，涉及生物工程领域。本发明的酵母基因工程菌以酵母作为出发菌株，通过敲除基因构建获得，所述酵母基因工程菌能够在不添加修复模板的基础上满足文库构建和高通量基因组编辑所需的转化效率，可达105级别。非同源末端连接效率增强的巴斯德毕赤酵母菌株可用于建库筛选各种提升菌株抗逆性或提升目标产物产量的靶点，该基因工程策略可用于改造其他非常规酵母。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117625618A
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202311644193.X
申请日：2023-12-01
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/81 , C12N15/65 , C12N1/19 , C12N15/10 , G01N21/64 , G01N30/02 , G01N30/72 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种檀香醇生物传感器及应用，涉及生物工程领域。本发明首次筛选到4个檀香醇响应的启动子，以之构建红色有荧光蛋白表达盒，建立了一定范围内檀香醇浓度与红色荧光蛋白强度的正相关关系，首次建立檀香醇生物传感器，打破了该领域的技术壁垒。本发明构建的檀香醇生物传感器为产物响应型生物传感器，鲜有报道，该生物传感器用于檀香醇高产菌株的筛选，解决了檀香醇本身无色，缺少显色反应，仅能通过质谱分析定量的技术难题。本发明所构建的檀香醇生物传感器核酸结构式为P‑RP‑T，其中的RP可以用抗生素抗性基因代替，以建立檀香醇与抗生素浓度的正相关关系，扩展其应用前景。
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公开(公告)号：CN113621634B
公开(公告)日：2023-09-15
申请号：CN202110769874.3
申请日：2021-07-07
Applicant: 浙江大学杭州国际科创中心
Abstract: 本发明公开了一种增加基因组突变率的碱基编辑系统及碱基编辑方法，所述碱基编辑系统包括编码胞嘧啶脱氨酶的基因和编码特异性单链DNA结合蛋白的基因。利用本发明构建的碱基编辑系统，对酿酒酵母基因组进行进化，在操作上具有简单，效率高等优点，在功能上，能提高β‑胡萝卜素的产量、提高对有机试剂的耐受性。并且本发明构建的基因组碱基编辑系统在毕赤酵母、大肠杆菌以及罗尔斯通氏菌等大部分工业菌株中同样适用。所以，使用本发明碱基编辑系统能够用于提高菌株的基因组突变率，基因组中突变碱基累积，造成菌体性状和功能的多样性，根据工业生产要求，可对某一性状进行连续性状筛选和定向进化。
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公开(公告)号：CN112322512A
公开(公告)日：2021-02-05
申请号：CN201910717181.2
申请日：2019-08-05
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N1/19 , C12N15/113 , C12N15/90 , C12P19/40 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR技术改造酿酒酵母利用DL‑蛋氨酸合成S‑腺苷蛋氨酸的方法及应用：在二倍体工业酿酒酵母中构建了一种基于CRISPR/Cas9技术的基因敲入，基因敲除和Delta位点整合等基因组改造方法；进一步的利用该方法对该酵母菌株HPA3基因位点敲入DAAO与L‑PheDH表达框，SAH1基因位点敲入DAAO与L‑PheDH表达框，SPE2基因位点敲入SAM2基因表达框，GLC3基因位点敲入SAM2基因表达框，获得的工程菌利用DL‑蛋氨酸合成S‑腺苷蛋氨酸的能力得到显著提高。
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公开(公告)号：CN112301050A
公开(公告)日：2021-02-02
申请号：CN201910680780.1
申请日：2019-07-26
Applicant: 浙江大学
Abstract: 一种构建高产谷胱甘肽重组菌株的方法与应用，属于生物工程领域。本发明提供的高产谷胱甘肽的重组菌株方法的特征在于：以自身大量合成谷氨酸的谷氨酸棒杆菌为出发菌株，引入来源无乳链球菌的gshF基因或来源大肠杆菌的gshA和gshB基因赋予谷胱甘肽合成能力；进一步基因组缺失基因aceD，mcbR和sdaA；同时表达截短的serA基因，pgk基因，来源大肠杆菌的cysE基因和cysK基因，来源拟南芥的cysE基因，强化半胱氨酸途径；鉴于谷氨酸棒杆菌株自身可以合成大量谷氨酸，半胱氨酸途径已被强化，获得的工程菌发酵过程中仅需添加甘氨酸即可高产谷胱甘肽。
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公开(公告)号：CN119570646A
公开(公告)日：2025-03-07
申请号：CN202411784003.9
申请日：2024-12-05
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种发酵生产固醇类及其硫酸化衍生物和提高硫酸化度的方法，属于生物工程领域。以酵母作为出发菌株，通过敲除和导入基因构建获得所述发酵生产固醇类及其硫酸化衍生物的酵母工程菌。本发明的酵母工程菌可以高效生产7‑脱氢胆固醇、胆固醇、特别是硫酸胆固醇，其摇瓶发酵产量近249.0mg/L，5L发酵罐发酵产量可达544.7mg/L。通过高表达代谢途径中关键限速酶、增强前体供应以及增强辅因子PAPS供应，提高硫酸胆固醇产量和其硫酸化度，利用毕赤酵母高效生成硫酸胆固醇，具有周期短、环保和节约资源的特点。本发明高产硫酸胆固醇的酵母工程菌具有广阔的应用前景，为其它硫酸化产物生产提供重要参考。
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