公开(公告)号：CN111849977B

公开(公告)日：2023-04-25

申请号：CN202010485787.0

申请日：2020-06-01

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 樊宝良 ,  褚素乔 ,  倪慧勇 ,  代敏敏 ,  李德娟 ,  催梦笛 ,  耿琳烨 ,  任子珍

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N15/66 ,  A61D19/02 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明涉及转基因动物技术领域，具体涉及一种精子载体制备转基因动物的方法以及一种制备转基因鸡的sgRNA和制备方法。该方法根据用于制备sgRNA的crRNA编码序列构建sgRNA与Cas9蛋白构建出共表达质粒，以精子为载体制备转基因动物。该方法通过精子载体与第三代基因编辑技术CRISPR/Cas9的结合，使转基因动物的制备过程操作简单，成本低，效率高，既能够用于转基因禽类动物的制备，也可以用于其他有性繁殖的转基因动物的制备。

公开(公告)号：CN109456962B

公开(公告)日：2022-03-04

申请号：CN201811574997.6

申请日：2018-12-21

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 樊宝良 ,  倪慧勇 ,  王学静 ,  刘慧芳 ,  代敏敏 ,  臧素敏

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明涉及一种从蛋壳中提取DNA的方法和试剂盒。该方法包括以下步骤：用DNAaway清洁蛋壳表面；获得蛋壳粉末；将所述蛋壳粉末与水和裂解液混匀，冰浴1.5～2.5h后煮沸8～15min，离心，将上清液置于92～97℃金属浴中，敞口保温0.8～1.2h；提取、纯化DNA。该方法能够大大降低提取成本，并具有更高的可重复型，能够保证从长期储存(至少60天)的每一枚鸡蛋蛋壳样品中提取到能够满足多种研究所需DNA。

公开(公告)号：CN110295237B

公开(公告)日：2023-07-25

申请号：CN201910567495.9

申请日：2019-06-27

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 樊宝良 ,  许利军 ,  倪慧勇 ,  王学静 ,  臧素敏 ,  李德娟 ,  代敏敏 ,  郭欣

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6858

Abstract: 本发明涉及动物遗传育种技术领域，具体公开一种改进的鸡隐性白羽基因型的分子鉴定方法，其使用检测鸡隐性白羽等位基因和有色羽等位基因的引物，以鸡全血生理盐水稀释液作为模板，进行PCR扩增，根据扩增结果鉴定鸡隐性白羽基因型。本发明方法可快速有效且低成本地鉴别不同个体隐性白羽的基因型，筛选隐性纯合白羽基因型个体，进而达到加速隐性白羽纯合群体的建立、缩短育种时间的目的。

公开(公告)号：CN111849977A

公开(公告)日：2020-10-30

申请号：CN202010485787.0

申请日：2020-06-01

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 樊宝良 ,  褚素乔 ,  倪慧勇 ,  代敏敏 ,  李德娟 ,  催梦笛 ,  耿琳烨 ,  任子珍

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N15/66 ,  A61D19/02 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明涉及转基因动物技术领域，具体涉及一种精子载体制备转基因动物的方法以及一种制备转基因鸡的sgRNA和制备方法。该方法根据用于制备sgRNA的crRNA编码序列构建sgRNA与Cas9蛋白构建出共表达质粒，以精子为载体制备转基因动物。该方法通过精子载体与第三代基因编辑技术CRISPR/Cas9的结合，使转基因动物的制备过程操作简单，成本低，效率高，既能够用于转基因禽类动物的制备，也可以用于其他有性繁殖的转基因动物的制备。

公开(公告)号：CN110295237A

公开(公告)日：2019-10-01

申请号：CN201910567495.9

申请日：2019-06-27

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 樊宝良 ,  许利军 ,  倪会勇 ,  王学静 ,  臧素敏 ,  李德娟 ,  代敏敏 ,  郭欣

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6858

Abstract: 本发明涉及动物遗传育种技术领域，具体公开一种改进的鸡隐性白羽基因型的分子鉴定方法，其使用检测鸡隐性白羽等位基因和有色羽等位基因的引物，以鸡全血生理盐水稀释液作为模板，进行PCR扩增，根据扩增结果鉴定鸡隐性白羽基因型。本发明方法可快速有效且低成本地鉴别不同个体隐性白羽的基因型，筛选隐性纯合白羽基因型个体，进而达到加速隐性白羽纯合群体的建立、缩短育种时间的目的。

公开(公告)号：CN109456962A

公开(公告)日：2019-03-12

申请号：CN201811574997.6

申请日：2018-12-21

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 樊宝良 ,  倪慧勇 ,  王学静 ,  刘慧芳 ,  代敏敏 ,  臧素敏

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明涉及一种从蛋壳中提取DNA的方法和试剂盒。该方法包括以下步骤：用DNAaway清洁蛋壳表面；获得蛋壳粉末；将所述蛋壳粉末与水和裂解液混匀，冰浴1.5～2.5h后煮沸8～15min，离心，将上清液置于92～97℃金属浴中，敞口保温0.8～1.2h；提取、纯化DNA。该方法能够大大降低提取成本，并具有更高的可重复型，能够保证从长期储存(至少60天)的每一枚鸡蛋蛋壳样品中提取到能够满足多种研究所需DNA。