公开(公告)号：CN111961680B

公开(公告)日：2022-04-15

申请号：CN202010885928.8

申请日：2020-08-28

Applicant: 扬州大学

Inventor： 徐小勇 ,  张越良 ,  张亦武 ,  周一鹏 ,  孔维文

IPC: C12N15/53 ,  C12N9/02 ,  C12N15/11 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/82

Abstract: 本发明提出了一种从甜橙中分离、克隆得到的抗寒功能基因CsLac18，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其对应的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。将本发明的基因CsLac18导入到烟草及枳壳中进行功能验证，发现获得的转基因超表达植物抗寒能力明显提高，而转基因沉默表达植物抗寒能力明显降低。本发明为植物抗寒基因工程提供重要的基因资源，能够提高植物的抗寒性能。

公开(公告)号：CN115386644A

公开(公告)日：2022-11-25

申请号：CN202210735591.1

申请日：2022-06-27

Applicant: 扬州大学

Inventor： 徐小勇 ,  黄小三 ,  朱雨 ,  王晓雨 ,  张绍铃 ,  乔清海 ,  徐康 ,  刘普

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/04 ,  C12Q1/40 ,  C12Q1/527 ,  C12Q1/26 ,  C12R1/07

Abstract: 本发明公开了快速鉴定生防菌株对梨炭疽病防治效果的方法，该方法通过梨炭疽病病原菌与生防菌株平板对峙的方法，验证生防菌株对炭疽菌菌落生长的抑制效果；通过离体梨树叶片与果实接种梨炭疽菌与生防菌株，观察不同处理下梨树叶片与果实病情发展来鉴定生防菌株对梨树炭疽病病情发展的抑制效果；通过培养梨树炭疽菌的分生孢子，并初步提取生防菌株的发酵液，验证生防菌株发酵液对分生孢子萌发的抑制效果。本发明具有快速、全面的优点，缩短了生防菌株对梨炭疽病防治效益探究的周期，提高了鉴定结果的准确性，节省了鉴定的人力物力，实现了鉴定的高通量。

公开(公告)号：CN112760276A

公开(公告)日：2021-05-07

申请号：CN202110312495.1

申请日：2021-03-24

Applicant: 扬州大学

Inventor： 徐小勇 ,  张亦武 ,  陆春毅 ,  缪星辰 ,  顾铭洲

IPC: C12N5/04

Abstract: 本发明提出了一种柑橘原生质体的制备方法，该方法以下步骤：外植体热激处理、原生质体的酶解、原生质体的纯化。本发明的优点是采用热处理和酶解法分离出高质量的柑橘原生质体，该方法制备得到的原生质体产量高，活性好，其产量在5×106个/克鲜重以上，活力超过80％。

公开(公告)号：CN119614587A

公开(公告)日：2025-03-14

申请号：CN202411879401.9

申请日：2024-12-19

Applicant: 扬州大学

Inventor： 徐小勇 ,  黄小三 ,  董慧珍 ,  付逸菲

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/10 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20 ,  A01H6/74

Abstract: 本发明提供一种从杜梨砧木中分离并克隆出含BRZL结构域的抗寒基因PbbZIP44，并提供该基因在植物抗寒性提升中的应用。通过构建PbbZIP44基因的超表达载体和沉默载体，并利用农杆菌介导的遗传转化方法将其导入拟南芥、茄梨愈伤组织和杜梨实生苗中，实现了稳定表达和瞬时表达，从而获得稳定的超表达植株和TRV介导的沉默株系，用于低温抗性功能分析。研究结果显示，在低温胁迫条件下，超表达株系相较于野生型植株表现出更强的生长状态、更低的丙二醛含量和相对电导率，以及更高的光合效率和抗氧化能力；而沉默株系则表现出相反的生理反应。

公开(公告)号：CN104278007B

公开(公告)日：2017-12-29

申请号：CN201410591784.X

申请日：2014-10-27

Applicant: 扬州大学

Inventor： 徐小勇 ,  钱荣 ,  陈学好 ,  李良俊 ,  程立宝 ,  徐强 ,  高红胜 ,  齐晓花

IPC: C12N5/04

Abstract: 本发明涉及一种慈姑原生质体的制备方法。本发明将慈姑经过慈姑茎尖培养、试管苗水培预处理、原生质体的酶解、原生质体的纯化、原生质体的悬浮得到慈姑原生质体。本发明克服了现有慈姑的常规育种非常困难，易造成栽培品种遗传基础单一，阻碍慈姑品种改良等缺陷。本发明利用了茎尖组织培养技术获得了无菌的慈姑壮苗，为原生质体的分离提供了最佳的外植体，其次采用酶解法分离出高质量的慈姑原生质体，且其产量在2×106个/克以上，活力超过80％，绝大多数为球形的，其细胞膜完整且富含叶绿体，具有较高活力，能满足后续各种研究需要。

公开(公告)号：CN111961680A

公开(公告)日：2020-11-20

申请号：CN202010885928.8

申请日：2020-08-28

Applicant: 扬州大学

Inventor： 徐小勇 ,  张越良 ,  张亦武 ,  周一鹏 ,  孔维文

IPC: C12N15/53 ,  C12N9/02 ,  C12N15/11 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/82

Abstract: 本发明提出了一种从甜橙中分离、克隆得到的抗寒功能基因CsLac18，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其对应的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。将本发明的基因CsLac18导入到烟草及枳壳中进行功能验证，发现获得的转基因超表达植物抗寒能力明显提高，而转基因沉默表达植物抗寒能力明显降低。本发明为植物抗寒基因工程提供重要的基因资源，能够提高植物的抗寒性能。

公开(公告)号：CN119685351A

公开(公告)日：2025-03-25

申请号：CN202411879400.4

申请日：2024-12-19

Applicant: 扬州大学

Inventor： 徐小勇 ,  黄小三 ,  董慧珍 ,  付逸菲

IPC: C12N15/52 ,  C12N9/00 ,  C12N15/10 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20 ,  A01H6/74

Abstract: 本发明公开了一种从杜梨中分离和克隆的低温响应基因PbXBAT31，以及该基因在降低植物抗寒能力方面的应用，本发明通过构建PbXBAT31的超表达载体并利用农杆菌介导的转化技术，将该基因导入拟南芥和茄梨愈伤组织中，获得了超表达株系。抗寒功能的试验结果表明，克隆的PbXBAT31基因具有显著负调控植物抗寒性的能力。

公开(公告)号：CN104278007A

公开(公告)日：2015-01-14

申请号：CN201410591784.X

申请日：2014-10-27

Applicant: 扬州大学

Inventor： 徐小勇 ,  钱荣 ,  陈学好 ,  李良俊 ,  程立宝 ,  徐强 ,  高红胜 ,  齐晓花

IPC: C12N5/04

Abstract: 本发明涉及一种慈姑原生质体的制备方法。本发明将慈姑经过慈姑茎尖培养、试管苗水培预处理、原生质体的酶解、原生质体的纯化、原生质体的悬浮得到慈姑原生质体。本发明克服了现有慈姑的常规育种非常困难，易造成栽培品种遗传基础单一，阻碍慈姑品种改良等缺陷。本发明利用了茎尖组织培养技术获得了无菌的慈姑壮苗，为原生质体的分离提供了最佳的外植体，其次采用酶解法分离出高质量的慈姑原生质体，且其产量在2×106个/克以上，活力超过80％，绝大多数为球形的，其细胞膜完整且富含叶绿体，具有较高活力，能满足后续各种研究需要。