重组杆状病毒表达的鳜鱼弹状病毒糖蛋白的制备方法

    公开(公告)号:CN111850046A

    公开(公告)日:2020-10-30

    申请号:CN202010638286.1

    申请日:2020-07-06

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种重组杆状病毒表达的鳜鱼弹状病毒糖蛋白的制备方法,包括:引物设计与合成:目的基因的扩增与纯化;重组供体质粒pFastBac-G的构建;重组穿梭质粒rBacmid-G的构建;重组杆状病毒的制备;目的蛋白的纯化及Western blot检测。本发明可以获得大量抗原性、免疫原性较好的、与天然蛋白功能相似的可溶性重组蛋白,适用于鳜鱼弹状病毒糖蛋白的高效表达及DNA疫苗制备。

    鱼类弹状病毒双重PCR检测的引物组、试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN111705165A

    公开(公告)日:2020-09-25

    申请号:CN202010631052.4

    申请日:2020-07-03

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种鱼类弹状病毒双重PCR检测的引物组、试剂盒及检测方法,检测方法包括:从待测样品鱼的肾组织中提取RNA,以RNA为模板合成cDNA;以合成的cDNA为模板,采用合成的引物组,进行双重PCR扩增;将双重PCR扩增所得的产物进行琼脂糖凝胶电泳,将凝胶置于成像系统中观察结果。本发明针对乌鳢水泡病毒保守基因序列,设计相关特异性引物,以及相适宜的PCR反应条件,建立一种乌鳢水泡病毒双重PCR检测方法,具有特异性强、灵敏度高等特点,能够快速、准确地检测出乌鳢水泡病毒,为乌鳢水泡病毒的临床诊断与预防提供了一项重要的技术手段,对实施乌鳢水泡病毒的鉴定、分离、流行病学调查等研究提供了技术方案。

    一种弗氏柠檬酸杆菌的LAMP检测引物组合及其试剂盒和检测方法

    公开(公告)号:CN118006814A

    公开(公告)日:2024-05-10

    申请号:CN202410222317.3

    申请日:2024-02-28

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种弗氏柠檬酸杆菌的可视化LAMP检测方法,以弗氏柠檬酸杆菌OmpA基因为检测靶标设计特异性的环介导等温扩增引物,以弗氏柠檬酸杆菌DNA为模板,建立LAMP检测反应体系,开展特异性和灵敏度验证,借助羟基萘酚蓝(Hydroxynaphthol blue,HNB)染料指示剂即可进行结果的可视化判定,建立了一种用于弗氏柠檬酸杆菌快速检测的特异性强、灵敏度高、操作简便、结果可靠的可视化LAMP检测方法。相比传统PCR技术,本发明无需昂贵的仪器,可用肉眼直接观察检测结果,是一种更适合现场、基层快速检测的方法。

    鱼类弹状病毒巢式PCR检测的引物组、试剂盒、检测方法及应用

    公开(公告)号:CN110607403A

    公开(公告)日:2019-12-24

    申请号:CN201911006928.X

    申请日:2019-10-22

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及鱼类弹状病毒巢式PCR检测的引物组、试剂盒、检测方法及应用,属于分子生物学技术领域。本发明以待测样品总RNA为模板,进行反转录反应,得到待测样品cDNA;以待测样品cDNA为模板进行第一轮PCR扩增反应;再以第一轮PCR扩增产物为模板进行第二轮PCR扩增反应;将第二轮PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,将凝胶置于成像系统中观察是否出现阳性扩增条带,判定待测样品是否含有鱼类弹状病毒。本发明具有灵敏性高、特异性强的特点,能够快速、准确地检测出鱼类弹状病毒-乌鳢水泡病毒。

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