一种肿瘤样本免疫检查点相关基因的mRNA检测引物组、试剂盒和方法

    公开(公告)号:CN110029170A

    公开(公告)日:2019-07-19

    申请号:CN201910406714.5

    申请日:2019-05-16

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明提供了一种肿瘤样本免疫检查点相关基因的mRNA表达检测引物组、试剂盒和方法,属于肿瘤检测和治疗技术领域,所述引物组包括分别检测GBP5基因、ICAM1基因、CAMK2D基因、IRF1基因、CD44基因、CCL2基因和CD274基因的引物对;所述试剂盒,包括所述的引物组、cDNA合成逆转录液和荧光定量PCR反应液。所述引物组及试剂盒能够准确的检测免疫检查点相关基因GBP5、ICAM1、CAMK2D、IRF1、CD44、CCL2和CD274的表达水平,能够准确反映肿瘤局部免疫应答状态,为肿瘤样本的免疫治疗提供依据。

    一种肿瘤样本免疫检查点相关基因的mRNA检测引物组、试剂盒和方法

    公开(公告)号:CN110029170B

    公开(公告)日:2020-06-02

    申请号:CN201910406714.5

    申请日:2019-05-16

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明提供了一种肿瘤样本免疫检查点相关基因的mRNA表达检测引物组、试剂盒和方法,属于肿瘤检测和治疗技术领域,所述引物组包括分别检测GBP5基因、ICAM1基因、CAMK2D基因、IRF1基因、CD44基因、CCL2基因和CD274基因的引物对;所述试剂盒,包括所述的引物组、cDNA合成逆转录液和荧光定量PCR反应液。所述引物组及试剂盒能够准确的检测免疫检查点相关基因GBP5、ICAM1、CAMK2D、IRF1、CD44、CCL2和CD274的表达水平,能够准确反映肿瘤局部免疫应答状态,为肿瘤样本的免疫治疗提供依据。

    一种DC细胞的快速制备方法

    公开(公告)号:CN103589685A

    公开(公告)日:2014-02-19

    申请号:CN201310610764.8

    申请日:2013-11-26

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明涉及细胞制备领域,具体地说是一种DC细胞的快速制备方法,本发明同现有技术相比,将制备时间由现有技术的7-9天缩短至3天;将DC细胞的活力由现有技术的68-75%提高至88-95%,纯度由现有技术的60-65%提高至80-90%;采用本发明方法制备的DC细胞具有完全成熟表型,表达趋化因子CCR7,分泌高浓度IL-12细胞因子并有效促进T细胞增殖。

    一种DC细胞的快速制备方法

    公开(公告)号:CN103589685B

    公开(公告)日:2015-09-30

    申请号:CN201310610764.8

    申请日:2013-11-26

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明涉及细胞制备领域,具体地说是一种DC细胞的快速制备方法,本发明同现有技术相比,将制备时间由现有技术的7-9天缩短至3天;将DC细胞的活力由现有技术的68-75%提高至88-95%,纯度由现有技术的60-65%提高至80-90%;采用本发明方法制备的DC细胞具有完全成熟表型,表达趋化因子CCR7,分泌高浓度IL-12细胞因子并有效促进T细胞增殖。

    一种冻存细胞的方法
    7.
    发明授权

    公开(公告)号:CN103518702B

    公开(公告)日:2015-08-26

    申请号:CN201210226668.9

    申请日:2012-07-02

    Applicant: 复旦大学

    Inventor: 储以微 郑秀娟

    Abstract: 本发明涉及细胞生物技术领域,涉及一种细胞的冻存方法,尤其是一种改良的快速冷冻法,该方法能在保证细胞特性不变的情况下提高细胞的活力。本方法中采用带孔的纱布袋,将冻存管悬吊在液氮的蒸汽层中,能使冻存管内细胞迅速降温,复苏后细胞的活力高达95-99%;采用10%的DMSO+90%的血清作为冻存液,能提高细胞膜对水的通透性,保证细胞外结晶短时间内冻住,避免水分的渗入对细胞造成损伤;本方法适用于对任何细胞系的长期保存,与现有技术比较,省略了步骤,简化了工艺,复苏后的细胞活力高且细胞特性不变,可实现长期保存的目的。

    一种冻存细胞的方法
    8.
    发明公开

    公开(公告)号:CN103518702A

    公开(公告)日:2014-01-22

    申请号:CN201210226668.9

    申请日:2012-07-02

    Applicant: 复旦大学

    Inventor: 储以微 郑秀娟

    Abstract: 本发明涉及细胞生物技术领域,涉及一种细胞的冻存方法,尤其是一种改良的快速冷冻法,该方法能在保证细胞特性不变的情况下提高细胞的活力。本方法中采用带孔的纱布袋,将冻存管悬吊在液氮的蒸汽层中,能使冻存管内细胞迅速降温,复苏后细胞的活力高达95-99%;采用10%的DMSO+90%的血清作为冻存液,能提高细胞膜对水的通透性,保证细胞外结晶短时间内冻住,避免水分的渗入对细胞造成损伤;本方法适用于对任何细胞系的长期保存,与现有技术比较,省略了步骤,简化了工艺,复苏后的细胞活力高且细胞特性不变,可实现长期保存的目的。

    一种树突状细胞疫苗制备方法

    公开(公告)号:CN102847145A

    公开(公告)日:2013-01-02

    申请号:CN201210370072.6

    申请日:2012-09-27

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体地说是一种树突状细胞疫苗制备方法,其特征在于采用如下制备步骤:(1)取病患自体血,采用人淋巴细胞分离液分离出红细胞、单核淋巴细胞、血浆;(2)调整单核淋巴细胞浓度;(3)加入6孔板中,贴壁16小时;(4)吸弃6孔板的每个孔内的上层未贴壁细胞;(5)加入DC培养基3ml,置于二氧化碳培养箱内,二氧化碳浓度为5%,温度为37℃,培养2~3天;(6)进行半量换液;(7)第6天,荷载自体肿瘤抗原,使6孔板的每个孔内的自体肿瘤抗原的浓度为20μg/ml;(8)24小时后检测成熟DC细胞的数量和成熟度。本发明同现有技术相比,成熟的树突状细胞数至少达到1×107,成熟度>85%。

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