一种基于细胞层面进行全蛋白质组学分析的方法

    公开(公告)号:CN108226317B

    公开(公告)日:2020-10-20

    申请号:CN201611190958.7

    申请日:2016-12-21

    Applicant: 复旦大学

    Inventor: 陆豪杰 熊云 张莹

    Abstract: 本发明属蛋白质分析领域,涉及基于细胞层面的全蛋白质组学分析的方法,本发明中,收集的细胞直接通过吸胀的方式进入真空干燥后的聚丙烯酰胺凝胶粒中,然后直接进行胶内酶解获得质谱分析所需的肽段;本方法中不需要单独的细胞裂解和蛋白提取步骤,使四个基本步骤减少为两步,在不提高酶量的情况下,实验耗时明显缩短;本方法与传统方法比较,在细胞蛋白质组鉴定,尤其是高分子量蛋白的鉴定上存在明显优势;本发明方法步骤简单、操作方便、快速高效,可以实现同时进行细胞裂解和蛋白酶解,为高灵敏质谱分析提供样品保证;由于摆脱了对去垢剂的依赖,适用于后续诸多翻译后修饰的研究。

    一种基于细胞层面进行全蛋白质组学分析的方法

    公开(公告)号:CN108226317A

    公开(公告)日:2018-06-29

    申请号:CN201611190958.7

    申请日:2016-12-21

    Applicant: 复旦大学

    Inventor: 陆豪杰 熊云 张莹

    CPC classification number: G01N30/02 G01N33/6848

    Abstract: 本发明属蛋白质分析领域,涉及基于细胞层面的全蛋白质组学分析的方法,本发明中,收集的细胞直接通过吸胀的方式进入真空干燥后的聚丙烯酰胺凝胶粒中,然后直接进行胶内酶解获得质谱分析所需的肽段;本方法中不需要单独的细胞裂解和蛋白提取步骤,使四个基本步骤减少为两步,在不提高酶量的情况下,实验耗时明显缩短;本方法与传统方法比较,在细胞蛋白质组鉴定,尤其是高分子量蛋白的鉴定上存在明显优势;本发明方法步骤简单、操作方便、快速高效,可以实现同时进行细胞裂解和蛋白酶解,为高灵敏质谱分析提供样品保证;由于摆脱了对去垢剂的依赖,适用于后续诸多翻译后修饰的研究。

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