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公开(公告)号：CN113604458A
公开(公告)日：2021-11-05
申请号：CN202110842248.2
申请日：2021-07-26
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明属于生物学技术领域，公开了一种鸡白痢沙门菌噬菌体裂解酶的发酵制备方法，包括：进行鸡白痢沙门菌、沙门菌噬菌体YSP2的培养，并提取沙门菌噬菌体YSP2基因组；以噬菌体YSP2的全基因组为模板，利用引物LySP2‑ZF/LySP2‑ZR对裂解酶目的基因LySP2进行PCR扩增；进行表达载体pPICZ‑LySP2的构建与鉴定，进行重组毕赤酵母菌株X33‑pPICZ‑LySP2的筛选和鉴定；同时进行重组毕赤酵母菌X33‑pPICZ‑LySP2的诱导发酵及条件优化。本发明构建了重组裂解酶LySP2基因的毕赤酵母表达菌株X33‑pPICZ‑LySP2。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113430175A
公开(公告)日：2021-09-24
申请号：CN202110769239.5
申请日：2021-07-07
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种鸡白痢沙门菌特异性裂解噬菌体的分离纯化方法，包括鸡白痢沙门菌噬菌体的分离；采用斑点法和双层琼脂平板法进行噬菌体的鉴定；采用双层琼脂平板法进行噬菌体的纯化；噬菌体效价测定：采用双层琼脂平板法对噬菌斑计数，根据噬菌体效价与噬菌斑数的关系式对噬菌体效价进行计算。本发明以鸡白痢沙门菌临床分离株为宿主菌，从污水中分离筛选出一株强裂解性噬菌体YSP2，该噬菌体属于有尾病毒目长尾病毒科，生物学特性稳定，特异性裂解沙门菌，噬菌体YSP2对鸡白痢有较好的治疗效果，在其与宿主菌同时进入体内时可达到最佳治疗效果。
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公开(公告)号：CN103233035B
公开(公告)日：2015-01-14
申请号：CN201210051429.4
申请日：2012-03-01
Applicant: 吉林大学
Abstract: 一种中国鲎素组成型酵母表达载体及其制备方法，属于生物技术领域。本发明的目的是采用微生态理论和分子生物学技术，将中国鲎抗菌肽TachyplesinsI（TPI）基因克隆到组成型表达载体pGAPZαA中，构建鲎素抗菌肽基因GAP启动子酵母表达载体。本发明首先根据tachyplesins基因的测序结果设计引物TPI-NNX1和TPI-NNX2，然后根据pGAPZα使用手册合成通用引物，对TPI基因的克隆质粒pMD-18T-TPI和酵母表达载体pGAPZαA进行双酶切，回收酶切目的片段，用T4DNA连接酶连接，连接产物转化大肠杆菌DH5α，筛选阳性转化子，提取质粒，进行PCR和双酶切鉴定，并进行测序。本发明筛选能够高效表达、零污染的鲎素抗菌肽酵母高效表达基因工程菌。
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公开(公告)号：CN103710276A
公开(公告)日：2014-04-09
申请号：CN201210051423.7
申请日：2012-03-01
Applicant: 吉林大学
Abstract: 一种中国鲎素组成型毕赤酵母阳性表达菌株，属于生物技术领域。本发明菌株为中国鲎素组成型毕赤酵母阳性表达菌株，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏号为CGMCC No.5462。本发明菌剂，其活性成分为中国鲎素组成型毕赤酵母阳性表达菌株，CGMCC No.5462。本发明应用的两个关键点在于：一是抗菌肽的高效表达。抗菌肽是动物的体内成分之一，是一类小分子短肽，具有安全、无残留、无毒副作用的良好特性，是理想的安全抗菌制剂，无任何毒副作用，对多种病毒和细菌性疾病均有显著的预防效果，同时具有改善畜禽生产生长性能、减少机体发病的作用，能有效替代饲用抗生素或化学合成药物的使用，具有良好的推广应用前景。二是酵母菌体蛋白。发酵产物富含生物活性蛋白、优质的维生素及促生长因子，可显著提高机体免疫力和健康水平。具有天然酸、甜、酒曲、酵母芳香味，诱食效果佳，可显著提高畜禽出栏重。
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公开(公告)号：CN103710276B
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201210051423.7
申请日：2012-03-01
Applicant: 吉林大学
Abstract: 一种中国鲎素组成型毕赤酵母阳性表达菌株，属于生物技术领域。本发明菌株为中国鲎素组成型毕赤酵母阳性表达菌株，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏号为CGMCC No.5462。本发明菌剂，其活性成分为中国鲎素组成型毕赤酵母阳性表达菌株，CGMCC No.5462。本发明应用的两个关键点在于：一是抗菌肽的高效表达。抗菌肽是动物的体内成分之一，是一类小分子短肽，具有安全、无残留、无毒副作用的良好特性，是理想的安全抗菌制剂，无任何毒副作用，对多种病毒和细菌性疾病均有显著的预防效果，同时具有改善畜禽生产生长性能、减少机体发病的作用，能有效替代饲用抗生素或化学合成药物的使用，具有良好的推广应用前景。二是酵母菌体蛋白。发酵产物富含生物活性蛋白、优质的维生素及促生长因子，可显著提高机体免疫力和健康水平。具有天然酸、甜、酒曲、酵母芳香味，诱食效果佳，可显著提高畜禽出栏重。
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公开(公告)号：CN103233035A
公开(公告)日：2013-08-07
申请号：CN201210051429.4
申请日：2012-03-01
Applicant: 吉林大学
Abstract: 一种中国鲎素组成型酵母表达载体及其制备方法，属于生物技术领域。本发明的目的是采用微生态理论和分子生物学技术，将中国鲎抗菌肽TachyplesinsI（TPI）基因克隆到组成型表达载体pGAPZαA中，构建鲎素抗菌肽基因GAP启动子酵母表达载体。本发明首先根据tachyplesins基因的测序结果设计引物TPI-NNX1和TPI-NNX2，然后根据pGAPZα使用手册合成通用引物，对TPI基因的克隆质粒pMD-18T-TPI和酵母表达载体pGAPZαA进行双酶切，回收酶切目的片段，用T4DNA连接酶连接，连接产物转化大肠杆菌DH5α，筛选阳性转化子，提取质粒，进行PCR和双酶切鉴定，并进行测序。本发明筛选能够高效表达、零污染的鲎素抗菌肽酵母高效表达基因工程菌。
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