公开(公告)号：CN106596967B

公开(公告)日：2018-08-10

申请号：CN201611054074.9

申请日：2016-11-25

Applicant: 厦门大学

Inventor： 高祥 ,  黄成婷 ,  赵玉芬

IPC: G01N33/68

Abstract: 一种稳定同位素磷酰化标记蛋白质的定量方法，涉及蛋白质定量分析。以市售含有碳‑13、氧‑18或氘‑2等标记的小分子为原料，通过卤代烃在银盐促进下的水解作用，选择性地合成含碳‑13和氧‑18等同位素标记的醇，再通过基团交换反应得到含碳‑13、氧‑18或氘‑2等稳定同位素标记的亚磷酸酯标记试剂。通过组合不同的稳定同位素标记亚磷酸酯，获得两标、三标、四标或五标等多通量蛋白相对定量分析，各标记之间的分子量差异大于或等于3个道尔顿。稳定同位素N‑磷酰化标记蛋白质定量具有较好的准确性、高灵敏度、无同位素效应干扰及广泛的适用性。

公开(公告)号：CN111499686A

公开(公告)日：2020-08-07

申请号：CN202010303845.3

申请日：2020-04-17

Applicant: 厦门大学

Inventor： 高祥 ,  王晓宇 ,  黄成婷 ,  赵玉芬

IPC: C07K5/062 ,  C07K1/06 ,  C07K1/02 ,  C07K1/13 ,  G01N33/68 ,  G01N30/06

Abstract: 本发明公开了一种含等重稳定同位素的磷酰化蛋白标记试剂及其制备方法与应用，所述蛋白标记试剂为含氘-2、碳-13、氧-18和氮-15等稳定同位素标记的磷酰化二肽有机磷试剂。所述蛋白标记试剂的制备方法为：(1)N端保护的含等重稳定同位素的氨基酸制备，(2)含等重稳定同位素的氨基酸活化酯Fmoc/Boc-R1-NHS的制备，(3)含等重稳定同位素的二肽的制备，(4)含等重稳定同位素的亚磷酸酯的制备，(5)含等重稳定同位素的亚磷酸酯二肽的制备，(6)稳定同位素标记N-磷酰化氨基酸活化酯的制备。本发明所提供的蛋白标记试剂可实现多肽、标准蛋白、细胞中蛋白质、尿样及血样中蛋白定量分析，具有较好的准确性、高灵敏度、无同位素效应干扰及广泛的适用性等优点。

公开(公告)号：CN106596967A

公开(公告)日：2017-04-26

申请号：CN201611054074.9

申请日：2016-11-25

Applicant: 厦门大学

Inventor： 高祥 ,  黄成婷 ,  赵玉芬

IPC: G01N33/68

Abstract: 一种稳定同位素磷酰化标记蛋白质的定量方法，涉及蛋白质定量分析。以市售含有碳‑13、氧‑18或氘‑2等标记的小分子为原料，通过卤代烃在银盐促进下的水解作用，选择性地合成含碳‑13和氧‑18等同位素标记的醇，再通过基团交换反应得到含碳‑13、氧‑18或氘‑2等稳定同位素标记的亚磷酸酯标记试剂。通过组合不同的稳定同位素标记亚磷酸酯，获得两标、三标、四标或五标等多通量蛋白相对定量分析，各标记之间的分子量差异大于或等于3个道尔顿。稳定同位素N‑磷酰化标记蛋白质定量具有较好的准确性、高灵敏度、无同位素效应干扰及广泛的适用性。