公开(公告)号：CN100465616C

公开(公告)日：2009-03-04

申请号：CN200610070803.X

申请日：2006-03-10

Applicant: 厦门大学

Inventor： 彭宣宪 ,  肖昆 ,  王三英

IPC: G01N21/17 ,  G01N33/48 ,  C12Q1/02

Abstract: 活菌微量检测方法，涉及一种病原性活菌，提供一种微量快速检测病原性活菌的方法。步骤为免疫捕捉，将针对病原菌的特异性抗体包被至已经预加碳酸缓冲液的固相载体各孔中静置或孵育，用含有非离子型去污剂的磷酸盐-吐温缓冲液洗板；加入小牛血清封闭甩干；加入细菌溶液，温育得病原菌；捕捉到病原菌后，在固相载体的各孔中加入培养基，培养后离心，丢弃上清，加入无菌双蒸水混匀作为PCR反应模板；取无菌的新枪头分别吸加10×PCR缓冲液，dNTP，MgCl2溶液，两条引物，Taq酶及PCR反应模板于PCR管中心至管底；扩增后取PCR产物电泳上样缓冲液混合，点样于琼脂糖凝胶中电泳，观察结果。快速简便，高效灵敏。

公开(公告)号：CN1821749A

公开(公告)日：2006-08-23

申请号：CN200610070803.X

申请日：2006-03-10

Applicant: 厦门大学

Inventor： 彭宣宪 ,  肖昆 ,  王三英

IPC: G01N21/17 ,  G01N33/48 ,  C12Q1/02

Abstract: 活菌微量检测方法，涉及一种病原性活菌，提供一种微量快速检测病原性活菌的方法。步骤为免疫捕捉，将针对病原菌的特异性抗体包被至已经预加碳酸缓冲液的固相载体各孔中静置或孵育，用含有非离子型去污剂的磷酸盐－吐温缓冲液洗板；加入小牛血清封闭甩干；加入细菌溶液，温育得病原菌；捕捉到病原菌后，在固相载体的各孔中加入培养基，培养后离心，丢弃上清，加入无菌双蒸水混匀作为PCR反应模板；取无菌的新枪头分别吸加10×PCR缓冲液，dNTP，MgCl2溶液，两条引物，Taq酶及PCR反应模板于PCR管中心至管底；扩增后取PCR产物电泳上样缓冲液混合，点样于琼脂糖凝胶中电泳，观察结果。快速简便，高效灵敏。