适配体、基于适配体联合CRISPR-Cas12a的荧光可视传感器及其应用

    公开(公告)号:CN119372207A

    公开(公告)日:2025-01-28

    申请号:CN202411593916.2

    申请日:2024-11-08

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明涉及一种适配体、基于适配体联合CRISPR‑Cas12a的荧光可视传感器及其应用,适配体包括至少一组如SEQ ID NO.1‑16所示核苷酸序列。本发明适配体(DuW)的核苷酸序列(SEQ ID NO.1‑16)均能与ThT染料结合,并在425 nm的激发光下,ThT染料发出荧光。根据这一特征,将本发明适配体与CRSPR‑Cas12系统联合,建立CRSPR‑Cas12a‑DuW检测方法,同时为了提高检测的灵敏性,将RAA扩增技术与CRSPR‑Cas12a‑DuW联合建立RAA‑Cas12a‑DuW检测方法,通过观察ThT染料发光的情况,推断适配体DuW是否被切割,进而判断是否有检测对象。本发明可以实现快速现场诊断(POCT),而且显色方式成本低,在蓝光下可观察到荧光,且该荧光与FAM荧光相比更稳定,无需高级设备或专业培训。

    用于猴痘病毒检测的crRNA、核酸分子组合物、检测体系及应用

    公开(公告)号:CN115820939B

    公开(公告)日:2024-09-13

    申请号:CN202211628896.9

    申请日:2022-12-18

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于猴痘病毒检测的crRNA、核酸分子组合物、检测体系及应用,所述crRNA包括至少一组如SEQ ID NO 1‑6所示核苷酸序列。核酸分子组合物包括crRNA和RAA引物对,所述crRNA包括SEQ ID NO 1‑6所示的核苷酸序列。本发明检测体系为CRISPR‑Cas12检测体系或CRISPR‑Cas13检测体系或CRISPR‑Cas12‑Cas13双通道检测体系。本发明基于猴痘病毒基因,设计了猴痘病毒特异性crRNA,同时结合CRISPR‑Cas荧光/适配体检测系统,可以短时间检测出是否存在猴痘病毒,能特异性区分不同亚型的猴痘病毒,且操作方便,不需要精密的仪器,特异性好、灵敏度高,最低检测限可达4copies。

    用于猴痘病毒检测的crRNA、核酸分子组合物、检测体系及应用

    公开(公告)号:CN115820939A

    公开(公告)日:2023-03-21

    申请号:CN202211628896.9

    申请日:2022-12-18

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于猴痘病毒检测的crRNA、核酸分子组合物、检测体系及应用,所述crRNA包括至少一组如SEQ ID NO 1‑6所示核苷酸序列。核酸分子组合物包括crRNA和RAA引物对,所述crRNA包括SEQ ID NO 1‑6所示的核苷酸序列。本发明检测体系为CRISPR‑Cas12检测体系或CRISPR‑Cas13检测体系或CRISPR‑Cas12‑Cas13双通道检测体系。本发明基于猴痘病毒基因,设计了猴痘病毒特异性crRNA,同时结合CRISPR‑Cas荧光/适配体检测系统,可以短时间检测出是否存在猴痘病毒,能特异性区分不同亚型的猴痘病毒,且操作方便,不需要精密的仪器,特异性好、灵敏度高,最低检测限可达4copies。本发明建立的CRISPR‑Cas12‑Cas13双通道检测体系可检测在一个样本中除了猴痘病毒外是否带有其它病毒,进一步丰富了检测内容。

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