一种运用于希瓦氏菌的质粒载体构建方法

    公开(公告)号:CN105505822A

    公开(公告)日:2016-04-20

    申请号:CN201511015681.X

    申请日:2015-12-29

    Applicant: 厦门大学

    CPC classification number: C12R1/01 C12N15/74 C12N2800/101

    Abstract: 一种运用于希瓦氏菌的质粒载体构建方法,涉及希瓦氏菌。厦门希瓦氏菌(Shewanella xiamenensis)BC01,保藏编号CGMCC No.11687。由厦门希瓦氏菌BC01提取质粒,纯化得pSXM33,将其送检测序;根据得到的序列信息,与NCBI数据库信息比对,确定pSXM33质粒上开放阅读框的分布状况,并绘制该质粒的图谱。运用基因工程手段,从pSXM33中截取带有复制起始部分的片段,与pET28a质粒的抗性及复制原点片段连接,构建成pETSXM1与pETSXM2两种质粒。经验证pETSXM1与pETSXM2能穿梭于大肠杆菌与希瓦氏菌MR-1中。

    裂殖壶藻胞外多糖的分离纯化方法

    公开(公告)号:CN103204951B

    公开(公告)日:2015-08-05

    申请号:CN201310167325.4

    申请日:2013-05-08

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 裂殖壶藻胞外多糖的分离纯化方法,涉及胞外多糖。包括以下步骤:1)以裂殖壶菌发酵液为原料,用乙醇沉淀发酵液中多糖,有机溶剂清洗不溶物,再用去离子水溶解不溶物,三氯乙酸法去除蛋白,再次使用乙醇沉淀得多糖粗品,使用去离子水为溶媒,配制成待分级溶液;2)将步骤1)配制成的待分级溶液经快流速纤维素琼脂糖凝胶阴离子交换树脂梯度洗脱分管收集,硫酸苯酚法测定各管多糖浓度,绘制洗脱曲线,将收集的各个部分合并,浓缩,经透析膜出去小分子杂质,冻干后即得分离纯化的裂殖壶藻胞外多糖。操作简便﹑高效,适用于大规模工业生产,获得多糖性质专一,生理活性高。

    一种产电微生物酶的筛选及鉴定方法

    公开(公告)号:CN102925535B

    公开(公告)日:2015-03-25

    申请号:CN201210488906.3

    申请日:2012-11-26

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 一种产电微生物酶的筛选及鉴定方法,涉及一种微生物酶。由蛋白质组学分析获得基因组讯息,并设计随机引物进行基因克隆,从而获得两个全新的蛋白质,经比对为彭氏变形杆菌ATCC 35198的漆酶与孔蛋白F,其氨基酸相似度分别为87.8%与84.4%。报道了产电变形杆菌的漆酶及其酶活特征,以及漆酶与孔蛋白基因;并发现以2.5mmol/L的硫酸铜对漆酶的诱导生产可得269.2U/g-DCW的酶活,是未诱导的30.6倍。该发明提供产电微生物的新颖酶的筛选及蛋白质鉴定方法,有望应用于缓解石化燃料日渐短缺的危机及减少二氧化碳排放。

    一种产电微生物酶的筛选及鉴定方法

    公开(公告)号:CN102925535A

    公开(公告)日:2013-02-13

    申请号:CN201210488906.3

    申请日:2012-11-26

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 一种产电微生物酶的筛选及鉴定方法,涉及一种微生物酶。由蛋白质组学分析获得基因组讯息,并设计随机引物进行基因克隆,从而获得两个全新的蛋白质,经比对为彭氏变形杆菌ATCC 35198的漆酶与孔蛋白F,其氨基酸相似度分别为87.8%与84.4%。报道了产电变形杆菌的漆酶及其酶活特征,以及漆酶与孔蛋白基因;并发现以2.5mmol/L的硫酸铜对漆酶的诱导生产可得269.2U/g-DCW的酶活,是未诱导的30.6倍。该发明提供产电微生物的新颖酶的筛选及蛋白质鉴定方法,有望应用于缓解石化燃料日渐短缺的危机及减少二氧化碳排放。

    一种可高产达托霉素的玫瑰孢链霉菌的筛选方法

    公开(公告)号:CN102586147A

    公开(公告)日:2012-07-18

    申请号:CN201210038423.3

    申请日:2012-02-17

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 一种可高产达托霉素的玫瑰孢链霉菌的筛选方法,涉及一种菌株的筛选方法。以玫瑰孢链霉菌为出发菌株,以葡萄糖、麦芽提取物、酵母提取物、CaCO3、琼脂粉作为培养基的主要原料用于培养菌株孢子,应用于菌株筛选工作。筛选所得的抗性菌株摇瓶发酵生物量达到30g/L,达托霉素产量达到59mg/L,相对原始菌株产量提高63.8%。相对于其他筛选方法,菌株筛选方法简便、高效,可用于菌株的大量筛选,对于玫瑰孢链霉菌的达托霉素生产能力有显著的提高。而达托霉素的作为一种新的脂肽类抗生素,具有很好的医用市场前景,菌株筛选方法具有显著的经济和社会意义。

    一种通过温度转换发酵生产含γ-亚麻酸油脂的方法

    公开(公告)号:CN103834698B

    公开(公告)日:2017-01-25

    申请号:CN201410113472.8

    申请日:2014-03-25

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 一种通过温度转换发酵生产含γ-亚麻酸油脂的方法。涉及生产γ-亚麻酸油脂的方法。将小克银汉霉菌接种于PDA平板培养基中培养,再将菌块接种于新PDA平板培养基中再培养,新PDA平板培养基上的菌块接种于另一新的PDA平板培养基中培养;然后将另一新的PDA平板培养基上的菌块接种于装有种子培养基的摇瓶中,pH值调至5~7,培养后,得摇瓶种子;将所得摇瓶种子接种于装有发酵培养基的摇瓶中,pH值调至5~7,先于30~40℃培养6~8d,转速为100~250rpm,再于10~20℃培养4~6d,转速为100~250rpm,得发酵液,抽滤,润洗,得湿菌体,烘干、研磨、萃取,得到含γ-亚麻酸油脂。

    一种鼠李糖乳杆菌胞外多糖的提纯方法

    公开(公告)号:CN106011196A

    公开(公告)日:2016-10-12

    申请号:CN201610339049.9

    申请日:2016-05-19

    Applicant: 厦门大学

    CPC classification number: C12P19/04 C08B37/0003

    Abstract: 一种鼠李糖乳杆菌胞外多糖的提纯方法,涉及胞外多糖。从保种的MRS固体培养基上选取单菌落接至MRS液体培养基中培养得已活化的发酵液;在MRS液体培养基中添加终浓度为10mM的CaCl2,取已活化的发酵液进行转接,得转接后的发酵液,取培养0,2,4,6,12,24h的1ml转接后的发酵液测定OD600、pH值;取中转接后的发酵液,除去细胞与蛋白之后,加入冰乙醇,冰箱里过夜,离心,去除上清留沉淀,将沉淀冷冻干燥后取出,透析,再冷冻干燥后即得粗胞外多糖,然后溶解于纯水中,取经过透析冻干后的粗胞外多糖样品溶于蒸馏水中,配制20mg/mL的溶液,离心,取上清液离子柱层析得鼠李糖乳杆菌胞外多糖。

    一种制备花生四烯酸的方法

    公开(公告)号:CN104450810A

    公开(公告)日:2015-03-25

    申请号:CN201410800525.3

    申请日:2013-09-13

    Applicant: 厦门大学

    CPC classification number: C12P7/6427

    Abstract: 一种制备花生四烯酸的方法,涉及花生四烯酸。对高山被孢霉产ARA的培养条件进行优化,在基础培养基分批发酵,在优化培养基中以酵母粉和玉米浆为氮源分批发酵,再以酵母粉为氮源进行的发酵罐放大实验,对高山被孢霉进行高糖驯化及对驯化后的菌种在混合氮源优化培养基中进行2L分批发酵,在2L发酵罐中装入混合氮源优化培养基,在当葡萄糖浓度降至10g/L时,流加600g/L葡萄糖,使残糖控制在10g/L,培养168h后开始收获干菌体、油脂和ARA。

    从发酵液中提取达托霉素的方法

    公开(公告)号:CN102492024A

    公开(公告)日:2012-06-13

    申请号:CN201110409339.3

    申请日:2011-12-09

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 从发酵液中提取达托霉素的方法,涉及一种发酵液。发酵液离心后得上清液,经有机溶剂萃取后,达托霉素进入有机相,再用醋酸钠-醋酸缓冲液反萃取至水相得反萃取液;将反萃取液经疏水作用层析纯化,用异丙醇-醋酸钠-醋酸缓冲液恒定浓度洗脱得疏水作用层析洗脱液,再经离子交换层析分离纯化,得离子交换洗脱液,再以醋酸钠-醋酸缓冲液为基础液,加入中性盐洗脱,完成从发酵液中提取达托霉素。综合运用有机溶剂萃取和树脂层析技术,运用该方法可从发酵液中分离纯化出纯度高于85%的达托霉素。相对于其他的分离纯化工艺,操作条件温和,成本低,可有效减少达托霉素酸解。达托霉素作为一种新型的脂肽类抗生素,具有良好的医用市场前景。

    壳聚糖在制备化妆品中的应用

    公开(公告)号:CN103932910A

    公开(公告)日:2014-07-23

    申请号:CN201410151100.4

    申请日:2013-04-02

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 壳聚糖在制备化妆品中的应用,涉及壳聚糖。提供壳聚糖在制备化妆品中的应用。所述壳聚糖为一种高分子壳聚糖,相对分子量为20000~30000。所述化妆品为发用香波组合物,包括A相和B相,A相包括去离子水、月桂醇聚醚硫酸酯钠、椰油酰胺二乙醇胺、椰油酰胺丙基甜菜碱、乳酸和壳聚糖,去离子水、月桂醇聚醚硫酸酯钠、椰油酰胺二乙醇胺、椰油酰胺丙基甜菜碱、乳酸和壳聚糖按质量百分比为去离子水为69.13%~77.27%、月桂醇聚醚硫酸酯钠为14%~16%、椰油酰胺二乙醇胺为4%~6%、椰油酰胺丙基甜菜碱为4%~6%、乳酸为0.5%~2%和壳聚糖为0.2%~0.8%;B相为防腐剂,防腐剂为0.03%~0.07%。

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