公开(公告)号：CN100567482C

公开(公告)日：2009-12-09

申请号：CN200610016136.7

申请日：2006-10-12

Applicant: 南开大学

Inventor： 朱天慧 ,  张道永 ,  闫继东 ,  杨爽

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/12 ,  A61K35/12 ,  C12N15/09

Abstract: 本发明涉及构建一种可以高效表达外源rhBMP2的CHO细胞株。主要是利用二氢叶酸还原酶缺陷型中华仓鼠卵巢细胞(CHO-dhfr-)作为宿主细胞，稳定转染外源的hBMP2质粒，经药物抗性筛选和基因扩增后得到稳定、高效表达rhBMP2的细胞株。细胞株的分泌表达产物能高效诱导成肌细胞系C2C12表达碱性磷酸酶来显示其刺激成骨的活性。获得CHO(rhBMP-2)单克隆细胞株，其BMP2表达量最高可达7.83ug/24h·106细胞。通过本方法建立的重组CHO细胞株表达的rhBMP2具有与天然人BMP2相似的理化性质和生物活性，可用于治疗临床上不同原因引起骨缺损、骨不连和骨折延迟愈合等疾病。

公开(公告)号：CN101012453A

公开(公告)日：2007-08-08

申请号：CN200610016136.7

申请日：2006-10-12

Applicant: 南开大学

Inventor： 朱天慧 ,  张道永 ,  闫继东 ,  杨爽

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/12 ,  A61K35/12 ,  C12N15/09

Abstract: 本发明涉及构建一种可以高效表达外源rhBMP2的CHO细胞株。主要是利用二氢叶酸还原酶缺陷型中华仓鼠卵巢细胞(CHO－dhfr－)作为宿主细胞，稳定转染外源的hBMP2质粒，经药物抗性筛选和基因扩增后得到稳定、高效表达rhBMP2的细胞株。细胞株的分泌表达产物能高效诱导成肌细胞系C2C12表达碱性磷酸酶来显示其刺激成骨的活性。获得CHO(rhBMP－2)单克隆细胞株，其BMP2表达量最高可达7.83ug/24h·106细胞。通过本方法建立的重组CHO细胞株表达的rhBMP2具有与天然人BMP2相似的理化性质和生物活性，可用于治疗临床上不同原因引起骨缺损、骨不连和骨折延迟愈合等疾病。