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公开(公告)号：CN109929852A
公开(公告)日：2019-06-25
申请号：CN201910284374.3
申请日：2019-04-09
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/00
Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸体胚胚根伸长关键基因LhHB9及其应用。该杂交鹅掌楸体胚胚根伸长关键基因LhHB9的DNA序列如SEQ ID NO.1所示。本发明克隆出杂交鹅掌楸的LhHB9基因的cDNA序列，构建LhHB9基因的过表达载体，以杂交鹅掌楸胚性愈伤为受体材料，采用农杆菌介导法进行遗传转化。经G418筛选得到转基因愈伤后，对其进行检测，初步确定转基因成功。通过对LhHB9基因转基因愈伤体胚诱导发现，转基因体胚胚根有明显的伸长，统计数据显示，35S：LhHB9体细胞胚胚根与对照CK相比最显著，说明过表达靶基因可以促进胚根的伸长，具有很好的实用性。
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公开(公告)号：CN109929852B
公开(公告)日：2021-03-23
申请号：CN201910284374.3
申请日：2019-04-09
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/00
Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸体胚胚根伸长关键基因LhHB9及其应用。该杂交鹅掌楸体胚胚根伸长关键基因LhHB9的DNA序列如SEQ ID NO.1所示。本发明克隆出杂交鹅掌楸的LhHB9基因的cDNA序列，构建LhHB9基因的过表达载体，以杂交鹅掌楸胚性愈伤为受体材料，采用农杆菌介导法进行遗传转化。经G418筛选得到转基因愈伤后，对其进行检测，初步确定转基因成功。通过对LhHB9基因转基因愈伤体胚诱导发现，转基因体胚胚根有明显的伸长，统计数据显示，35S：LhHB9体细胞胚胚根与对照CK相比最显著，说明过表达靶基因可以促进胚根的伸长，具有很好的实用性。
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公开(公告)号：CN106212287B
公开(公告)日：2018-04-03
申请号：CN201610654581.X
申请日：2016-08-10
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种利用去离子甲酰胺进行杂交鹅掌楸体胚纯固体培养植株再生方法，包括：1）杂交鹅掌楸胚性愈伤组织的诱导；2）以3/4MS+VC 5mg/L+蔗糖30g/L+去离子甲酰胺0.01~1mg/L为基本培养基，24℃暗培养杂交鹅掌楸胚性愈伤组织；3）将材料转移至光照培养室组培瓶中，以3/4MS基本培养基继续培养至再生植株；4）将再生植株驯化后移栽。本发明通过纯固体培养方式，跳过体胚发生过程中悬浮培养和平板培养这两个体胚诱导环节，优化并丰富杂交鹅掌楸体胚发生系统，从而更加高效便捷地获得高质量体胚再生植株。建立出稳固、高频、操作简单、苗木抗性良好的杂交鹅掌楸纯固体培养基体胚发生体系，为建立更加高效的杂交鹅掌楸遗传转化受体体系提供参考。
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公开(公告)号：CN106212287A
公开(公告)日：2016-12-14
申请号：CN201610654581.X
申请日：2016-08-10
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种利用去离子甲酰胺进行杂交鹅掌楸体胚纯固体培养植株再生方法，包括：1）杂交鹅掌楸胚性愈伤组织的诱导；2）以3/4MS+VC 5mg/L+蔗糖30g/L+去离子甲酰胺0.01~1mg/L为基本培养基，24℃暗培养杂交鹅掌楸胚性愈伤组织；3）将材料转移至光照培养室组培瓶中，以3/4MS基本培养基继续培养至再生植株；4）将再生植株驯化后移栽。本发明通过纯固体培养方式，跳过体胚发生过程中悬浮培养和平板培养这两个体胚诱导环节，优化并丰富杂交鹅掌楸体胚发生系统，从而更加高效便捷地获得高质量体胚再生植株。建立出稳固、高频、操作简单、苗木抗性良好的杂交鹅掌楸纯固体培养基体胚发生体系，为建立更加高效的杂交鹅掌楸遗传转化受体体系提供参考。
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