公开(公告)号：CN118028521A

公开(公告)日：2024-05-14

申请号：CN202410265784.4

申请日：2024-03-08

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 戴婷婷 ,  徐小侨 ,  臧家辉 ,  张晓瑞 ,  陶源 ,  陈超

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/77

Abstract: 本发明公开了一种松树脂溃疡病原菌(Fusarium circinatum)的特异性检测靶标Fcir_CM004511.1.g143.t1，同时，本发明还基于该靶标建立了CRISPR‑Cas12a体系可视化检测方法。该方法通过重组酶聚合酶扩增后的目的DNA片段，再在crRNA序列介导下，引导CRISPR‑Cas12a体系对扩增产物进行识别结合并切割目标双链DNA激活非特异性核酸酶功能，然后任意切割体系中的单链DNA荧光探针得到裂解产物，最后通过裂解产物的显色检测进行判断，实现CRISPR‑Cas12a的特异性荧光检测。该检测靶标特异性强，检测方法可视化强，在灵敏度上可低至1pg·μL‑1，对于港口的进境植物上携带的松树脂溃疡病病原菌(F.circinatum)实现即检即防，具有很高的应用价值。