公开(公告)号：CN101240292A

公开(公告)日：2008-08-13

申请号：CN200810019697.1

申请日：2008-03-12

Applicant: 南京大学

Inventor： 秦浚川 ,  彭薇 ,  吕海芹 ,  臧宇辉 ,  朱洁 ,  张驰 ,  姜晓玲

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/55 ,  C12N15/89 ,  C12N9/16 ,  A61K48/00 ,  A61P1/16

Abstract: 本发明属于生物技术制药技术领域。本发明应用人对氧磷酶3基因(hPON3)构建了哺乳动物细胞中表达的重组质粒pCI－hPON3，使用电转移法在小鼠骨骼肌组织中使hPON3得到高效表达并分泌入血，提高了血清中PON3水平，使小鼠抗氧化压力的能力加强，有效的防治肝脏损伤。hPON3转基因表达小鼠血清水解二氢香豆素的活性升高约1.4倍，并可持续24天。转基因组和正常小鼠分别腹腔注射四氯化碳建立小鼠急性和亚急性肝损伤模型后，转基因组小鼠与CCl4对照组相比血清ALT和AST水平显著降低，肝脏匀浆的丙二醛(MDA)水平降低，还原型谷胱甘肽(GSH)和总抗氧化能力(T－AOC)升高，病理学切片结果显示转基因组小鼠肝细胞损伤程度明显低于CCl4对照组，表明重组人PON3质粒转基因表达可有效提高血清PON3活性，降低肝脏氧化压力，可用于肝脏损伤的预防和治疗。

公开(公告)号：CN1962874A

公开(公告)日：2007-05-16

申请号：CN200610097968.6

申请日：2006-11-24

Applicant: 南京大学

Inventor： 秦浚川 ,  张驰 ,  朱洁 ,  臧宇辉 ,  彭薇 ,  姜晓玲

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/52 ,  A61K31/7088 ,  A61P1/16

Abstract: 本发明属于生物技术制药技术领域。本发明应用重组的Q型对氧磷酶基因1(hPON1Q)表达质粒经骨骼肌电刺激转移异位分泌表达，有效地提高血清PON1水平，防治肝脏的损伤，从而作为新型基因药物而保护肝脏。构建hPON1Q在哺乳动物细胞中表达的重组质粒pcDNA3.0－hPON1Q，运用电刺激介导的方法使之在小鼠骨骼肌组织中高效表达并大量分泌，血清对氧磷酶活力在转基因10天后上升到正常小鼠的1.5倍并可维持到第16天以上。转基因组和正常小鼠(阳性对照组)分别腹腔注射四氯化碳建立小鼠急性肝损伤模型24小时后，转基因组小鼠血清ALT和AST水平显著低于阳性对照组(P＜0.01)，病理学分析显示转基因组小鼠各项肝细胞损伤指标均显著低于阳性对照组(P＜0.01)。以上结果表明重组人PON1Q质粒可作为基因药物提高血清PON1活性，用于肝脏损伤的预防和治疗。