公开(公告)号：CN114965403B

公开(公告)日：2025-04-04

申请号：CN202210541471.8

申请日：2022-05-18

Applicant: 南京大学

Inventor： 张宴 ,  余杰 ,  任洪强

IPC: G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种基于BRET的磷酸盐生物传感器、构建方法及其应用，该生物传感器为由对磷酸盐特异性响应的铜绿假单胞菌磷酸盐结合蛋白Pa PBP、纳米荧光素酶NanoLuc和黄色荧光蛋白VenusΔC10融合得到的融合蛋白，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；其中，铜绿假单胞菌磷酸盐结合蛋白Pa PBP与纳米荧光素酶NanoLuc及黄色荧光蛋白VenusΔC10均通过柔性肽接头连接，铜绿假单胞菌磷酸盐结合蛋白Pa PBP，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；本发明构建的生物传感器对磷酸盐具备极强的选择性，通过耦合生物发光共振能量转移技术，能够将磷酸盐浓度信号转换为比率荧光信号输出，实现对磷酸盐的快速、灵敏和高通量检测，该生物传感器适用于对自来水、地表水和城市污水等不同环境水体中磷酸盐检测。

公开(公告)号：CN117088985A

公开(公告)日：2023-11-21

申请号：CN202310632356.6

申请日：2023-05-31

Applicant: 南京大学

Inventor： 张宴 ,  余杰 ,  任洪强

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12N15/64 ,  C07K1/14 ,  C07K1/22 ,  C07K1/34 ,  C07K1/36 ,  C07K1/13 ,  G01N33/53 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明公开了一种基于BRET的甲基对硫磷生物传感器、构建方法及其应用，该生物传感器为由对甲基对硫磷特异性响应的单链可变区片段抗体MP scFv、半胱氨酸标签Cys‑tag和纳米荧光素酶Nluc融合表达得到的融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；单链可变区片段抗体MP scFv与半胱氨酸标签Cys‑tag及纳米荧光素酶Nluc通过柔性肽接头连接，单链可变区片段抗体MP scFv的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，半胱氨酸标签Cys‑tag偶联R6G马来亚酰胺荧光染料；本发明生物传感器不仅对甲基对硫磷有较好的选择性，而且能够实现对甲基对硫磷的简便快速、高灵敏度的检测，可用于不同环境水体中甲基对硫磷的检测。

公开(公告)号：CN114965403A

公开(公告)日：2022-08-30

申请号：CN202210541471.8

申请日：2022-05-18

Applicant: 南京大学

Inventor： 张宴 ,  余杰 ,  任洪强

IPC: G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种基于BRET的磷酸盐生物传感器、构建方法及其应用，该生物传感器为由对磷酸盐特异性响应的铜绿假单胞菌磷酸盐结合蛋白Pa PBP、纳米荧光素酶NanoLuc和黄色荧光蛋白VenusΔC10融合得到的融合蛋白，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；其中，铜绿假单胞菌磷酸盐结合蛋白Pa PBP与纳米荧光素酶NanoLuc及黄色荧光蛋白VenusΔC10均通过柔性肽接头连接，铜绿假单胞菌磷酸盐结合蛋白Pa PBP，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；本发明构建的生物传感器对磷酸盐具备极强的选择性，通过耦合生物发光共振能量转移技术，能够将磷酸盐浓度信号转换为比率荧光信号输出，实现对磷酸盐的快速、灵敏和高通量检测，该生物传感器适用于对自来水、地表水和城市污水等不同环境水体中磷酸盐检测。

公开(公告)号：CN117088985B

公开(公告)日：2024-05-10

申请号：CN202310632356.6

申请日：2023-05-31

Applicant: 南京大学

Inventor： 张宴 ,  余杰 ,  任洪强

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12N15/64 ,  C07K1/14 ,  C07K1/22 ,  C07K1/34 ,  C07K1/36 ,  C07K1/13 ,  G01N33/53 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明公开了一种基于BRET的甲基对硫磷生物传感器、构建方法及其应用，该生物传感器为由对甲基对硫磷特异性响应的单链可变区片段抗体MP scFv、半胱氨酸标签Cys‑tag和纳米荧光素酶Nluc融合表达得到的融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；单链可变区片段抗体MP scFv与半胱氨酸标签Cys‑tag及纳米荧光素酶Nluc通过柔性肽接头连接，单链可变区片段抗体MP scFv的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，半胱氨酸标签Cys‑tag偶联R6G马来亚酰胺荧光染料；本发明生物传感器不仅对甲基对硫磷有较好的选择性，而且能够实现对甲基对硫磷的简便快速、高灵敏度的检测，可用于不同环境水体中甲基对硫磷的检测。