公开(公告)号：CN117660688A

公开(公告)日：2024-03-08

申请号：CN202311758435.8

申请日：2023-12-20

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 陈劲枫 ,  赵勤政 ,  程春燕 ,  娄群峰 ,  王瑜晖

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/682 ,  C12Q1/6841 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供了一种基于信号增强的单倍型寡核苷酸涂染方法及其应用，属于分子细胞遗传技术领域。首先开发植物单倍型寡核苷酸，并对其进行重构，具体由基因组序列、两侧35bp增强序列以及亚文库特异序列构成，合成的双链DNA寡核苷酸探针通过招募荧光团修饰的二级寡核苷酸，增加荧光团数目从而实现FISH信号增强。本发明具有高度的可及性和突出的适用性，不仅能够降低探针设计密度和合成成本，同时能极大地增强荧光信号强度和提高识别分辨率。本发明可利用极少数目的寡核苷酸探针实现对小片段或单基因的定位、渐渗片段的鉴定及小基因组植物的同源染色体的可视化识别，极大地提高精准育种中对于重大目标性状相关片段或基因的定位和筛选效率。

公开(公告)号：CN111979297A

公开(公告)日：2020-11-24

申请号：CN201910432072.6

申请日：2019-05-22

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 娄群峰 ,  毕云飞 ,  赵勤政

IPC: C12Q1/6806

Abstract: 本发明公开了基于多重PCR合成寡核苷酸探针的方法。基于黄瓜基因组序列信息，筛选设计黄瓜染色体的寡核苷酸文库，并通过双接头的连接方式将寡核苷酸文库进行分段。在此基础上，提出了一种基于多重PCR的寡核苷酸探针合成方法，根据实验需要自主选择合成所需的染色体区段，通过PCR快速的合成大量满足实验所需的寡核苷酸探针。本发明基于多重PCR合成寡核苷酸探针的方法，可以大量、快速、简便、永久的合成分段寡核苷酸探针和整条染色体的探针，为寡核苷酸探针的推广应用创造了条件，同时也为植物染色体研究提供了灵活、有力的方法。

公开(公告)号：CN111979297B

公开(公告)日：2023-10-27

申请号：CN201910432072.6

申请日：2019-05-22

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 娄群峰 ,  毕云飞 ,  赵勤政

IPC: C12Q1/6806

Abstract: 本发明公开了基于多重PCR合成寡核苷酸探针的方法。基于黄瓜基因组序列信息，筛选设计黄瓜染色体的寡核苷酸文库，并通过双接头的连接方式将寡核苷酸文库进行分段。在此基础上，提出了一种基于多重PCR的寡核苷酸探针合成方法，根据实验需要自主选择合成所需的染色体区段，通过PCR快速的合成大量满足实验所需的寡核苷酸探针。本发明基于多重PCR合成寡核苷酸探针的方法，可以大量、快速、简便、永久的合成分段寡核苷酸探针和整条染色体的探针，为寡核苷酸探针的推广应用创造了条件，同时也为植物染色体研究提供了灵活、有力的方法。