公开(公告)号：CN118581112A

公开(公告)日：2024-09-03

申请号：CN202410640199.8

申请日：2024-05-22

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 辛志宏 ,  王梦溪 ,  郑杰 ,  殷晨悦 ,  李文庆

IPC: C12N15/31 ,  C07K14/32 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12P21/02 ,  C07K7/64 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明发现一种枯草芽孢杆菌外排泵膜蛋白YoeA，具有将枯草芽孢杆菌抗菌脂肽plipastatin外排至细胞外的功能，降低plipastatin对细胞生长的自抑制作用，促进细胞生长，增加抗菌脂肽plipastatin的产量。通过对plipastatin基因簇上下游进行生物信息学分析，在基因簇上游2767碱基对发现一个假定的编码Na+驱动转运蛋白yoeA基因，该基因与炭疽芽孢杆菌中的多药及毒性化合物外排蛋白(META)YoeA具有70.84％的同源性。采用增加拷贝数的方式过表达该基因，将plipastatin的产量提高至出发菌株的2.84倍，而利用CRISPR/Cas9技术敲除yoeA基因后，plipastatin产量下降70％；将该基因通过游离质粒回补至敲除yoeA基因的菌株中，plipastatin的产量得以恢复。这一结果证实了YoeA转运蛋白在提升枯草芽孢杆菌plipastatin产量中发挥重要作用，为工业化生产plipastatin提供了技术支持。