公开(公告)号：CN108251372A

公开(公告)日：2018-07-06

申请号：CN201810038929.1

申请日：2018-01-16

Applicant: 南京中医药大学

Inventor： 郭杨 ,  潘娅岚 ,  马勇 ,  周龙云 ,  苑文超 ,  郑苏阳 ,  黄桂成 ,  王磊

IPC: C12N5/079 ,  C12N5/0793

Abstract: 本发明公开了原代小胶质细胞/损伤神经元共培养体系及其构建方法和应用，所述体系包括原代小胶质细胞和损伤神经元，其中，损伤神经元被原代小胶质细胞吞噬于胞内；所述体系为体外共培养体系。本发明所述原代小胶质细胞/损伤神经元共培养体系较传统方法培养的静息小胶质细胞的不足，模拟神经损伤的微环境以激活小胶质细胞，保留了小胶质细胞的吞噬功能；本发明所述体系中的小胶质细胞能够被损伤神经元激活为巨噬细胞，增强其吞噬神经元碎片的能力；本发明所述方法构建的体系中原代细胞数量可观、性状稳定、活性较高，能够为后续的神经损伤或退变性疾病的基础研究提供可靠的共培养体系。

公开(公告)号：CN106749604A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201710065717.8

申请日：2017-02-06

Applicant: 南京中医药大学

Inventor： 闵文 ,  黄桂成 ,  方彭华 ,  袁翰 ,  黄正泉 ,  朱燕 ,  韩龙 ,  王磊 ,  周龙云

IPC: C07K14/47 ,  C07K1/14

CPC classification number: C07K14/47

Abstract: 本发明公开了一种经济实用型骨组织蛋白提取与分离方法，属于分子生物学技术领域，具体步骤如下：将称重后的离心管置于冰上预冷；量取磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂及苯甲基磺酰氟加到裂解缓冲液后，置于冰上并搅拌均匀；称取股骨干0.3～0.5g；将股骨干放在盛有液氮的研钵内，并将其研磨成粉末状；将股骨干转移至备用的离心管中并称重，即得股骨干的质量，将该质量乘以1/3后，按照0.2～0.4g/mL向离心管中添加裂解液；将混合液在低温下震荡后静置；将悬浊液置于4℃、3000～5000rpm的条件下离心，将上清液吸至新的离心管后，分装保存。本发明中的提取与分离工艺简单且分离出的蛋白质纯度高，因此，该提取与分离的工艺适合在生物学领域推广应用。