公开(公告)号：CN118792448A

公开(公告)日：2024-10-18

申请号：CN202410745418.9

申请日：2024-06-11

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 黄晓红 ,  潘莹 ,  黄友华 ,  秦启伟 ,  潘国俊 ,  谢新域

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种SGIV病毒的RPA‑CRISPR‑Cas12a检测方法及其应用。该试剂盒包括RPA引物对、crRNA、ssDNA‑FQ报告探针，所用的引物探针组能特异扩增并靶向目标序列，与其他病毒不存在交叉反应，提高SGIV检测的特异性。设计的ssDNA‑FQ报告探针，利用LbCas12a的反式切割活性，将ssDNA‑FQ进行切割产生荧光信号，可将检测结果可视化。此外，将RPA和CRISPR‑Cas12a联合构建SGIV的检测方法，极大提高了检测灵敏度，达到10copies/μL。本发明的SGIV检测方法特异性好、灵敏度和准确度高及适用性强，可快速地检测SGIV，具有较高的现场应用前景。

公开(公告)号：CN116042910A

公开(公告)日：2023-05-02

申请号：CN202211047441.8

申请日：2022-08-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 黄友华 ,  杨家辉 ,  潘莹 ,  黄晓红 ,  秦启伟

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种用于检测大口黑鲈虹彩病毒的LFD‑RPA引物探针组、试剂盒及检测方法，属于基因检测技术领域。所述LFD‑RPA引物组序列如SEQ ID NO.1‑2所示，所述探针序列如SEQ ID NO.3所示。本发明中提供的探针和引物特异性强、重复性好。基于此构建的LFD‑RPA试剂盒可常温反应，静置5min即可完成反应，在10min内可观察到结果，无需借助任何仪器；反应结果通过试纸条检测线和质控线条带进行判断；且具有很高的灵敏度，最低检测限为1×101copies/μL。相比PCR的方法具有时间和检测灵敏的优势，有望开发成适用于现场检测LMBV的LFD‑RPA可视化试剂盒。