一种室内针对蚜虫的杀蚜蛋白的生物测定方法

    公开(公告)号:CN107085094A

    公开(公告)日:2017-08-22

    申请号:CN201710451895.4

    申请日:2017-06-15

    Applicant: 华侨大学

    Inventor: 林毅 张斌武

    CPC classification number: G01N33/5014

    Abstract: 本发明公开了一种室内针对蚜虫的杀蚜蛋白的生物测定方法,包括如下步骤:(1)将一膜囊覆盖在一筒状支架的一端,膜囊内填充有混有待测蛋白的蚜虫人工培养液;(2)通过毛笔将若干蚜虫置于上述筒状支架内的膜囊上;(3)在上述筒状支架的另一端覆盖一层透光透气薄膜;(4)将上述筒状支架置于恒温室内,每隔相同的时间间隔检查蚜虫的死亡率,并计算毒力测试结果。本发明的生物测定方法能够稳定有效的测定毒素蛋白的效力。

    一种筛选抗蚜Cry蛋白的方法

    公开(公告)号:CN111500674A

    公开(公告)日:2020-08-07

    申请号:CN202010316262.4

    申请日:2020-04-21

    Applicant: 华侨大学

    Abstract: 本发明提供了一种筛选抗蚜Cry蛋白的方法,包括将反应缓冲液、蚜虫Cathepsin B蛋白酶和苏云金杆菌Cry蛋白混合静置反应,得到混合酶液,将所述混合酶液与底物混合反应后,得到检测液,检测所述检测液在405nm下的吸光度值,得到检测值;以Cathepsin B酶活抑制剂和激活剂为对照,得到抑制检测值和激活检测值;当所述检测值大于等于激活检测值,或所述检测值小于等于抑制检测值时,所述苏云金杆菌Cry蛋白为抗蚜Cry蛋白;所述底物包括Z-Arg-Arg-pNA和/或BSA;所述反应缓冲液包括乙酸钠、二硫苏糖醇和乙二胺四乙酸。本发明提供的筛选方法检测结果精准,能够大批量测定,进而实现大规模筛选。

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