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公开(公告)号：CN113604417A
公开(公告)日：2021-11-05
申请号：CN202110789128.0
申请日：2021-07-13
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明涉及植物组织培养技术领域，具体涉及一种培养毛竹原生质体及诱导细胞壁再生的方法及其应用。本发明通过对来源于毛竹胚性愈伤组织的原生质体进行培养，诱导其再生出完整的细胞壁，再生效果优良且成功率高，同时再生结果还具有较高的重复性。此外，利用本发明的方法还可以对原生质体及细胞壁再生过程进行监测，为研究毛竹以及其他物种细胞壁合成与调控机理、材质改良以及生物质能源等领域的研究提供切实可行的模型，为改善竹材细胞壁的质量与产量提供了理论指导，对竹产业的建设发展具有深远影响和长远意义。
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公开(公告)号：CN112314435A
公开(公告)日：2021-02-05
申请号：CN202011126266.2
申请日：2020-10-20
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种喜马拉雅紫茉莉愈伤组织继代培养基及其应用。所述继代培养基中的激素包括TDZ、NAA、脯氨酸和酵母提取物。利用本发明提供的喜马拉雅紫茉莉愈伤组织继代培养基，可筛选出高产喜马拉雅紫茉莉愈伤组织细胞系，实现在常温下快速生长，在改变培养条件的情况下可诱导喜马拉雅紫茉莉愈伤组织产生花青素，且类黄酮含量提高，实现了常温大量培养与诱导重要次生代谢产物相结合的二段式培养方式，解决了细胞生长与次生代谢产物积累的矛盾问题。
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公开(公告)号：CN110438062B
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN201910707028.1
申请日：2019-08-01
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12N5/04 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明公开了一种毛竹笋高活性线粒体的提取纯化及鉴定方法。本发明提供了一种提取毛竹笋线粒体的方法，包括如下步骤：将毛竹笋依次进行匀浆、差速离心和蔗糖密度梯度离心，即得到纯化线粒体；所述差速离心采用离心力依次为1300‑1700g、5000‑7000g和12000‑15000g。本发明的方法对线粒体的损伤小，提取的线粒体活性高，对线粒体以外的细胞核组分、叶绿体或前质体组分、酚类和多糖等分离较为彻底，且从纯化的线粒体中可提取到高质量的线粒体RNA，这对后续的分子生物学实验，如PCR反应、cDNA文库构建、线粒体转录组研究等奠定了良好的基础。
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公开(公告)号：CN110396495B
公开(公告)日：2021-02-26
申请号：CN201910749434.4
申请日：2019-08-14
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明涉及植物组织培养技术领域，具体公开了一种喜马拉雅紫茉莉愈伤组织、增殖方法与悬浮细胞繁殖方法。本发明的喜马拉雅紫茉莉愈伤组织诱导增殖方法是以诱导培养基对喜马拉雅紫茉莉无菌苗的叶片进行诱导培养形成愈伤组织后，将此愈伤组织用增殖培养基进一步增殖培养获得继代愈伤组织；其中，诱导与增殖培养基中的激素均为TDZ和NAA。该方法诱导率高、分化少、生长周期短，所得的愈伤组织松软易碎，利于后续利用。本发明还提供一种喜马拉雅紫茉莉悬浮细胞繁殖方法，其是以包含TDZ、NAA和水解酪蛋白的液体培养基对制备得到的喜马拉雅紫茉莉愈伤组织进行悬浮培养。该方法操作简单、细胞增殖率高，生长周期短，成本低，可实现工业化周年生产。
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公开(公告)号：CN112229949A
公开(公告)日：2021-01-15
申请号：CN202011015221.8
申请日：2020-09-24
Applicant: 北京林业大学
IPC: G01N33/00
Abstract: 本发明涉及检测领域，具体涉及一种用于测定毛竹笋组织细胞线粒体呼吸的试剂盒及方法。所述试剂盒包括呼吸缓冲液和呼吸抑制剂，所述呼吸抑制剂包括细胞色素呼吸抑制剂和抗氰呼吸抑制剂中的至少一种，其中，所述呼吸缓冲液中含有4～6mM KH2PO4，8～15mM TES，8～15mM NaCl，2～5mM MgSO4，溶剂为水；所述细胞色素呼吸抑制剂为包含NaN3、溶剂为蒸馏水的溶液；所述抗氰呼吸抑制剂为包含SHAM、溶剂为乙醇的溶液。本发明可以实现对毛竹笋不同部位组织细胞中线粒体呼吸代谢的实时活体测定，通量高、操作简便，且重复性很好。通过不同的呼吸抑制剂处理，可鉴定线粒体的呼吸代谢途径。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110396495A
公开(公告)日：2019-11-01
申请号：CN201910749434.4
申请日：2019-08-14
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明涉及植物组织培养技术领域，具体公开了一种喜马拉雅紫茉莉愈伤组织、增殖方法与悬浮细胞繁殖方法。本发明的喜马拉雅紫茉莉愈伤组织诱导增殖方法是以诱导培养基对喜马拉雅紫茉莉无菌苗的叶片进行诱导培养形成愈伤组织后，将此愈伤组织用增殖培养基进一步增殖培养获得继代愈伤组织；其中，诱导与增殖培养基中的激素均为TDZ和NAA。该方法诱导率高、分化少、生长周期短，所得的愈伤组织松软易碎，利于后续利用。本发明还提供一种喜马拉雅紫茉莉悬浮细胞繁殖方法，其是以包含TDZ、NAA和水解酪蛋白的液体培养基对制备得到的喜马拉雅紫茉莉愈伤组织进行悬浮培养。该方法操作简单、细胞增殖率高，生长周期短，成本低，可实现工业化周年生产。
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公开(公告)号：CN113604417B
公开(公告)日：2023-09-26
申请号：CN202110789128.0
申请日：2021-07-13
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明涉及植物组织培养技术领域，具体涉及一种培养毛竹原生质体及诱导细胞壁再生的方法及其应用。本发明通过对来源于毛竹胚性愈伤组织的原生质体进行培养，诱导其再生出完整的细胞壁，再生效果优良且成功率高，同时再生结果还具有较高的重复性。此外，利用本发明的方法还可以对原生质体及细胞壁再生过程进行监测，为研究毛竹以及其他物种细胞壁合成与调控机理、材质改良以及生物质能源等领域的研究提供切实可行的模型，为改善竹材细胞壁的质量与产量提供了理论指导，对竹产业的建设发展具有深远影响和长远意义。
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公开(公告)号：CN110438062A
公开(公告)日：2019-11-12
申请号：CN201910707028.1
申请日：2019-08-01
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12N5/04 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明公开了一种毛竹笋高活性线粒体的提取纯化及鉴定方法。本发明提供了一种提取毛竹笋线粒体的方法，包括如下步骤：将毛竹笋依次进行匀浆、差速离心和蔗糖密度梯度离心，即得到纯化线粒体；所述差速离心采用离心力依次为1300-1700g、5000-7000g和12000-15000g。本发明的方法对线粒体的损伤小，提取的线粒体活性高，对线粒体以外的细胞核组分、叶绿体或前质体组分、酚类和多糖等分离较为彻底，且从纯化的线粒体中可提取到高质量的线粒体RNA，这对后续的分子生物学实验，如PCR反应、cDNA文库构建、线粒体转录组研究等奠定了良好的基础。
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公开(公告)号：CN106577279B
公开(公告)日：2018-08-24
申请号：CN201611127132.6
申请日：2016-12-09
Applicant: 北京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种诱导西藏绵头雪莲愈伤组织产生花青素的方法。本发明以西藏绵头雪莲种子为材料，通过组织培养技术诱导愈伤组织，筛选得到花青素高产且遗传稳定细胞系。本发明筛选的绵头雪莲愈伤组织细胞系在常温下生长快，遗传特性稳定，继代培养15‑20天即可获得大量增殖细胞，在改变培养条件的情况下可诱导西藏绵头雪莲愈伤组织产生花青素，实现了常温大量培养与诱导花青素相结合的二段式培养方式，不仅解决了细胞生长与次生代谢产物积累的矛盾问题，也解决了花青素生产的原料问题，可实现雪莲花青素的工业化生产，并且生产成本低，培养周期短，不受自然环境及气候的影响，可以实现周年生产，具有重要理论意义及广阔的市场应用前景。
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公开(公告)号：CN106577279A
公开(公告)日：2017-04-26
申请号：CN201611127132.6
申请日：2016-12-09
Applicant: 北京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种诱导西藏绵头雪莲愈伤组织产生花青素的方法。本发明以西藏绵头雪莲种子为材料，通过组织培养技术诱导愈伤组织，筛选得到花青素高产且遗传稳定细胞系。本发明筛选的绵头雪莲愈伤组织细胞系在常温下生长快，遗传特性稳定，继代培养15‑20天即可获得大量增殖细胞，在改变培养条件的情况下可诱导西藏绵头雪莲愈伤组织产生花青素，实现了常温大量培养与诱导花青素相结合的二段式培养方式，不仅解决了细胞生长与次生代谢产物积累的矛盾问题，也解决了花青素生产的原料问题，可实现雪莲花青素的工业化生产，并且生产成本低，培养周期短，不受自然环境及气候的影响，可以实现周年生产，具有重要理论意义及广阔的市场应用前景。
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