公开(公告)号：CN118222576A

公开(公告)日：2024-06-21

申请号：CN202410530739.7

申请日：2024-04-29

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 孙丽丹 ,  苗润田 ,  蒙娟 ,  李子葳 ,  吴昊 ,  张启翔 ,  程堂仁

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H5/12 ,  A01H6/74

Abstract: 本发明提供一种梅花PDS基因VIGS沉默体系及其构建方法与应用，为一种基于VIGS技术的梅花‘淡丰后’基因瞬时沉默体系的构建方法，并对所构建的沉默体系进行了应用验证，结果显示该沉默体系可显著降低梅花叶片中PmdPDS的表达量，植株沉默率达84％。本发明的基因沉默体系简便、快速、高效，为梅花遗传改良和分子育种相关的研究提供有力支持。

公开(公告)号：CN119162242A

公开(公告)日：2024-12-20

申请号：CN202411687618.X

申请日：2024-11-25

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 孙丽丹 ,  赵春旭 ,  吴昊 ,  李子葳 ,  苗润田 ,  蒙娟 ,  张启翔 ,  程堂仁

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/65 ,  A01H4/00 ,  C12Q1/6895 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及植物基因工程技术领域，具体涉及一种杏梅系梅花叶片愈伤组织的遗传转化方法。本发明先制备梅花遗传转化受体，然后以RUBY基因为报告基因转化农杆菌制备侵染菌液，再经过愈伤组织侵染和共培养，最终筛选获得抗性愈伤组织。本发明提供的方法可通过观察或PCR检测的方式对抗性愈伤组织进行鉴定。本发明成功侵染梅花愈伤组织并获得有RUBY报告基因表达的红色愈伤组织，诱导率高，为梅花遗传体系的建立及遗传改良提供了良好基础。

公开(公告)号：CN117965793A

公开(公告)日：2024-05-03

申请号：CN202410197876.3

申请日：2024-02-22

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 孙丽丹 ,  蒙娟 ,  张启翔 ,  程堂仁 ,  苗润田 ,  李子葳 ,  刘栩

IPC: C12Q1/6895 ,  C12N15/11 ,  A01H1/04

Abstract: 本发明涉及分子生物学及植物分子育种技术领域，尤其涉及一种与梅花紫色叶性状共分离的染色体倒位及其应用。利用所述染色体倒位断点两侧的核苷酸序列设计引物，开发了一个与‘美人’梅紫色叶性状共分离的染色体倒位分子标记，标记引物序列如SEQ ID NO.5‑10所示。本发明从基因组层面解释了所述染色体倒位的进化关系与来源，明确‘美人’梅紫色叶性状的遗传进化关系。本发明提供的分子标记能够高效地对梅花紫色叶性状进行精准预测，准确率高，效果显著，具有很高的分子辅助育种应用前景，能够精准鉴定梅花或李属种质资源中由于远缘杂交产生的紫色叶性状基因型。

公开(公告)号：CN118389569A

公开(公告)日：2024-07-26

申请号：CN202410470262.8

申请日：2024-04-18

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 孙丽丹 ,  蒙娟 ,  苗润田 ,  刘栩 ,  李子葳 ,  张启翔

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/06 ,  A01H6/74

Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种梅花毛状根遗传转化体系的构建方法及应用。本发明提供的梅花毛状根遗传转化体系的构建方法以梅花种子的萌发幼苗作为侵染外植体；以OD600为0.8‑0.9的发根农杆菌的菌液作为侵染液；侵染部位为子叶结节上下1.5‑2.0cm处的茎段。本发明提供的方法以梅花幼苗为实验材料，材料获得便捷，且不采用组培无菌条件，直接利用基质培养即可完成，实验操作技术简单易上手。转化方法周期短，可重复性和有效性高，能够快速实现梅花分子研究中对基因功能验证的需求。

公开(公告)号：CN119162242B

公开(公告)日：2025-04-01

申请号：CN202411687618.X

申请日：2024-11-25

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 孙丽丹 ,  赵春旭 ,  吴昊 ,  李子葳 ,  苗润田 ,  蒙娟 ,  张启翔 ,  程堂仁

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/65 ,  A01H4/00 ,  C12Q1/6895 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及植物基因工程技术领域，具体涉及一种杏梅系梅花叶片愈伤组织的遗传转化方法。本发明先制备梅花遗传转化受体，然后以RUBY基因为报告基因转化农杆菌制备侵染菌液，再经过愈伤组织侵染和共培养，最终筛选获得抗性愈伤组织。本发明提供的方法可通过观察或PCR检测的方式对抗性愈伤组织进行鉴定。本发明成功侵染梅花愈伤组织并获得有RUBY报告基因表达的红色愈伤组织，诱导率高，为梅花遗传体系的建立及遗传改良提供了良好基础。

公开(公告)号：CN118185994A

公开(公告)日：2024-06-14

申请号：CN202410530670.8

申请日：2024-04-29

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 孙丽丹 ,  李子葳 ,  苗润田 ,  蒙娟 ,  王桂佳 ,  张俊瑞 ,  张启翔 ,  程堂仁

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/65 ,  A01H4/00 ,  A01H5/06 ,  A01H6/74

Abstract: 本发明提供一种梅花无菌体系的毛状根诱导方法，并构建了基于RUBY报告基因作为筛选标记的梅花毛状根遗传转化体系。本发明对影响梅花毛状根诱导效率的外植体类型、生长环境、侵染方法、侵染浓度等条件进行筛选，成功诱导梅花毛状根生长并获得RUBY报告基因启动的红色毛状根，为利用RUBY作为筛选标记为后续外源基因的导入及利用基因工程技术探究基因在梅花本体中的功能提供技术支撑。