公开(公告)号：CN110698550A

公开(公告)日：2020-01-17

申请号：CN201911096082.3

申请日：2019-11-11

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 郑唐春 ,  张启翔 ,  李平 ,  李璐璐 ,  程堂仁 ,  王佳 ,  袁存权

IPC: C07K14/415 ,  C12N15/29 ,  C12N15/11 ,  C12Q1/6895

Abstract: 本发明涉及植物基因工程与分子生物学技术领域，具体涉及一种快速鉴定真梅/杏梅品系的分子检测方法。本发明提供梅花PmEIL蛋白，其序列如SEQ ID NO.1所示。PmEIL蛋白参与梅花响应季节性气候变化，在真梅和杏梅品系中受温度、日照等季节性气候变化的调控方式存在明显差异，可用于鉴定真梅/杏梅品系，实现在梅花的幼苗期快速、准确地鉴定梅花品系，缩短了育种周期，极大地减少了育种工作量。本发明还提供与PmEIL基因相关且与梅花茎色相关的SNP分子标记，为梅花茎色性状的鉴定和真梅/杏梅品系的鉴定提供了基础和分子工具。

公开(公告)号：CN110698550B

公开(公告)日：2021-07-06

申请号：CN201911096082.3

申请日：2019-11-11

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 郑唐春 ,  张启翔 ,  李平 ,  李璐璐 ,  程堂仁 ,  王佳 ,  袁存权

IPC: C07K14/415 ,  C12N15/29 ,  C12N15/11 ,  C12Q1/6895

Abstract: 本发明涉及植物基因工程与分子生物学技术领域，具体涉及一种快速鉴定真梅/杏梅品系的分子检测方法。本发明提供梅花PmEIL蛋白，其序列如SEQ ID NO.1所示。PmEIL蛋白参与梅花响应季节性气候变化，在真梅和杏梅品系中受温度、日照等季节性气候变化的调控方式存在明显差异，可用于鉴定真梅/杏梅品系，实现在梅花的幼苗期快速、准确地鉴定梅花品系，缩短了育种周期，极大地减少了育种工作量。本发明还提供与PmEIL基因相关且与梅花茎色相关的SNP分子标记，为梅花茎色性状的鉴定和真梅/杏梅品系的鉴定提供了基础和分子工具。

公开(公告)号：CN108715902B

公开(公告)日：2020-09-25

申请号：CN201810415993.7

申请日：2018-05-03

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 张启翔 ,  李素珍 ,  卓孝康 ,  郑唐春 ,  李璐璐 ,  邱丽珂 ,  孙丽丹 ,  程堂仁 ,  王佳

IPC: C12Q1/6895 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了梅花垂枝性状SNP分子标记及其应用，具体包括分子标记Marker301243和/或Marker311414，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本发明利用SLAF‑seq技术开发获得2个梅花垂枝性状SNP分子标记Marker301243和Marker311414，并提供了其序列扩增引物和等位特异性PCR引物。所述分子标记Marker301243和/或Marker311414及其引物在鉴定梅花品种时，具有较高的准确性、稳定性且重复性好。将其用于分子辅助选择育种，可实现苗期提早选择，快速鉴定梅花垂枝性状，减少工作量，大大缩短梅花育种时间。

公开(公告)号：CN108715902A

公开(公告)日：2018-10-30

申请号：CN201810415993.7

申请日：2018-05-03

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 张启翔 ,  李素珍 ,  卓孝康 ,  郑唐春 ,  李璐璐 ,  邱丽珂 ,  孙丽丹 ,  程堂仁 ,  王佳

IPC: C12Q1/6895 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了梅花垂枝性状SNP分子标记及其应用，具体包括分子标记Marker301243和/或Marker311414，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本发明利用SLAF-seq技术开发获得2个梅花垂枝性状SNP分子标记Marker301243和Marker311414，并提供了其序列扩增引物和等位特异性PCR引物。所述分子标记Marker301243和/或Marker311414及其引物在鉴定梅花品种时，具有较高的准确性、稳定性且重复性好。将其用于分子辅助选择育种，可实现苗期提早选择，快速鉴定梅花垂枝性状，减少工作量，大大缩短梅花育种时间。

公开(公告)号：CN108645893A

公开(公告)日：2018-10-12

申请号：CN201810385154.5

申请日：2018-04-26

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 张启翔 ,  丁安琪 ,  包菲 ,  张智勇 ,  姜良宝 ,  张腾旬 ,  李璐璐 ,  汤佳

IPC: G01N27/06

Abstract: 本发明提供一种评定梅花抗寒性的方法，包括：将经过零下低温处理后的梅花枝条剪切成4～8mm的枝段，且将所述枝段加入去离子水中得到溶液，测定所述溶液的电导率并计算其离子渗漏率，根据所述离子渗漏率评定梅花的抗寒性。本发明提供的评定梅花抗寒性的方法，依据梅花枝条在低温胁迫下渗透物质会增加，从而溶有梅花枝条组织的溶液的电导率会变化，进而来评定梅花的抗寒性，该评定方法方便可靠，得出的结果与实践中得出的结论大致相同，为梅花的引种和育种提供重要的理论基础。

公开(公告)号：CN111718886B

公开(公告)日：2022-06-24

申请号：CN202010378846.4

申请日：2020-05-07

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 郑唐春 ,  张启翔 ,  李璐璐 ,  卓孝康 ,  袁存权 ,  程堂仁 ,  王佳

IPC: C12N5/04 ,  C12N9/00 ,  C12N9/42

Abstract: 本发明涉及一种绿萼梅原生质体分离的方法及其应用，所述方法包括：选取绿萼梅枝条，剥皮后完全浸入酶解液中，在27～28℃温度酶解40～50min；酶解液包括：1.5～2.0％纤维素酶R‑10、0.75～1.0％离析酶R‑10、0.5M甘露醇、10mM KCl、20mM CaCl2、10mM MES、0.1％BSA和0.3％PVP，pH值为5.7～5.8。本发明将绿萼梅茎段木质部通过酶解进行原生质体分离，制备的原生质体产量大，活性高，产量最高为2.3×107个/g，活性达到93％以上。本发明制备得到的绿萼梅原生质体转化效率较高，在绿萼梅遗传转化和基因功能验证方面具备较大的应用价值。

公开(公告)号：CN111718886A

公开(公告)日：2020-09-29

申请号：CN202010378846.4

申请日：2020-05-07

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 郑唐春 ,  张启翔 ,  李璐璐 ,  卓孝康 ,  袁存权 ,  程堂仁 ,  王佳

IPC: C12N5/04 ,  C12N9/00 ,  C12N9/42

Abstract: 本发明涉及一种绿萼梅原生质体分离的方法及其应用，所述方法包括：选取绿萼梅枝条，剥皮后完全浸入酶解液中，在27～28℃温度酶解40～50min；酶解液包括：1.5～2.0％纤维素酶R-10、0.75～1.0％离析酶R-10、0.5M甘露醇、10mM KCl、20mM CaCl2、10mM MES、0.1％BSA和0.3％PVP，pH值为5.7～5.8。本发明将绿萼梅茎段木质部通过酶解进行原生质体分离，制备的原生质体产量大，活性高，产量最高为2.3×107个/g，活性达到93％以上。本发明制备得到的绿萼梅原生质体转化效率较高，在绿萼梅遗传转化和基因功能验证方面具备较大的应用价值。

公开(公告)号：CN109006106A

公开(公告)日：2018-12-18

申请号：CN201810713038.1

申请日：2018-06-29

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 郑唐春 ,  张启翔 ,  袁存权 ,  孙丽丹 ,  卓孝康 ,  李璐璐 ,  程堂仁 ,  王佳

IPC: A01G17/00 ,  A01C1/00 ,  A01G24/28 ,  A01G24/15 ,  A01N43/12 ,  A01N59/16 ,  A01N59/20 ,  A01P21/00

CPC classification number: A01G17/005 ,  A01C1/00 ,  A01G24/15 ,  A01G24/28 ,  A01N43/12 ,  A01N59/16 ,  A01N59/20

Abstract: 本发明提供了一种梅花种子播种育苗方法，包括梅花种子预催芽处理、冷藏基质制备、解除休眠、幼苗移栽步骤，本发明方法能够提早打破梅花种子休眠、缩短梅花种子解除休眠时间，缩短育苗周期，并且降低种子在冷藏和播种过程的死亡率，提高低温冷藏后梅花种子的萌发率，有很强的生产实践价值。传统的梅花育苗方法需要在播种前低温沙藏处理2个月以上以解除梅花种子休眠，而本发明可以在2月内获得大量梅花健康幼苗，发芽率达87％以上，成苗率达95％以上，与现有技术相比育苗更加快速高效。在本发明的方法在梅花新优品种的繁育和生产方面具有良好是应用前景。