公开(公告)号：CN101824080A

公开(公告)日：2010-09-08

申请号：CN201010168584.5

申请日：2010-05-04

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 张凌云 ,  于彦丽 ,  李彦泽 ,  郑成超

IPC: C07K14/415 ,  C12N15/29 ,  C12N15/63 ,  C12N5/10 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明公开了一种青杄转录因子PwHAP5及其编码基因与应用。所述PwHAP5是如下1)或2)的蛋白质：1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)将序列表中序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物种子萌发相关的由1)衍生的蛋白质。将PwHAP5蛋白的编码基因导入拟南芥中后，转基因拟南芥的种子在高盐或干旱环境下的萌发率显著高于野生型拟南芥。

公开(公告)号：CN101492485B

公开(公告)日：2012-02-08

申请号：CN200910079897.0

申请日：2009-03-13

Applicant: 北京林业大学 ,  山东农业大学

Inventor： 张凌云 ,  于彦丽 ,  郑成超 ,  李彦泽

IPC: C12N15/10 ,  C07H21/02 ,  C07H1/08

Abstract: 本发明公开了一种提取裸子植物组织中RNA的方法。该方法包括以下步骤：1)用RNA提取缓冲液处理植物材料；2)去蛋白：用等体积的氯仿/异戊醇抽提两次；3)用LiCl沉淀RNA和用SSTE回溶RNA；4)去除多糖：将无水乙醇和醋酸钾加入到步骤3)得到的回溶溶液中，放入冰浴中沉淀多糖；5)再次经氯仿/异戊醇抽提；6)再次沉淀RNA和DEPC·H2O回溶RNA。为了去除DNA，还可进行以下步骤：a)用无RNase污染的DNase去除DNA；b)用氯仿/异戊醇抽提去除DNase；c)重复步骤6)。其中，所述RNA提取缓冲液中含有100mmol/L Tris HCl(pH 8.0)、2g/100mlCTAB、2g/100mlPVP、2mol/LNaCl、25mmol/L EDTA，使用前加入终浓度10mmol/L二硫苏糖醇和2％(体积百分比)的β-巯基乙醇。这样解决了多糖、多酚等干扰，得到的RNA纯度高。

公开(公告)号：CN101492485A

公开(公告)日：2009-07-29

申请号：CN200910079897.0

申请日：2009-03-13

Applicant: 北京林业大学 ,  山东农业大学

Inventor： 张凌云 ,  于彦丽 ,  郑成超 ,  李彦泽

IPC: C07H21/02 ,  C07H1/08 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种提取裸子植物组织中RNA的方法。该方法包括以下步骤：1)用RNA提取缓冲液处理植物材料；2)去蛋白：用等体积的氯仿/异戊醇抽提两次；3)用LiCl沉淀RNA和用SSTE回溶RNA；4)去除多糖：将无水乙醇和醋酸钾加入到步骤3)得到的回溶溶液中，放入冰浴中沉淀多糖；5)再次经氯仿/异戊醇抽提；6)再次沉淀RNA和DEPC·H2O回溶RNA。为了去除DNA，还可进行以下步骤：a)用无RNase污染的DNase去除DNA；b)用氯仿/异戊醇抽提去除DNase；c)重复步骤6)。其中，所述RNA提取缓冲液中含有100mmol/L Tris HCl(pH 8.0)、2g/100mlCTAB、2g/100mlPVP、2mol/LNaCl、25mmol/L EDTA，使用前加入终浓度10mmol/L二硫苏糖醇和2％(体积百分比)的β－巯基乙醇。这样解决了多糖、多酚等干扰，得到的RNA纯度高。

公开(公告)号：CN101824080B

公开(公告)日：2012-05-30

申请号：CN201010168584.5

申请日：2010-05-04

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 张凌云 ,  于彦丽 ,  李彦泽 ,  郑成超

IPC: C07K14/415 ,  C12N15/29 ,  C12N15/63 ,  C12N5/10 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明公开了一种青杆转录因子PwHAP5及其编码基因与应用。所述PwHAP5是如下1)或2)的蛋白质：1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)将序列表中序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物种子萌发相关的由1)衍生的蛋白质。将PwHAP5蛋白的编码基因导入拟南芥中后，转基因拟南芥的种子在高盐或干旱环境下的萌发率显著高于野生型拟南芥。

公开(公告)号：CN101503468A

公开(公告)日：2009-08-12

申请号：CN200910079896.6

申请日：2009-03-13

Applicant: 北京林业大学 ,  山东农业大学

Inventor： 张凌云 ,  于彦丽 ,  李彦泽 ,  郑成超

IPC: C07K14/415 ,  C12N15/29 ,  C12N15/63 ,  C12N5/10 ,  C12N1/00 ,  C12N15/11 ,  C12N15/82

Abstract: 本发明公开了一种与花粉萌发和/或花粉管生长相关的蛋白及其编码基因与应用。该蛋白，是如下1)或2)的蛋白质：1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)将序列表中序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与花粉萌发和/或花粉管生长相关的由1)衍生的蛋白质。本发明的与花粉萌发和/或花粉管生长相关的蛋白及其编码基因可用于植物的遗传转化研究，提高植物的花粉萌发率和/或花粉管生长速度、提高植物的生殖效率、缩短育种进程，对于生长发育缓慢的木本类植物进行生殖发育调控、基因工程育种、加速木本类植物的遗传改良具有重要的理论及实际意义。

公开(公告)号：CN101503468B

公开(公告)日：2012-02-08

申请号：CN200910079896.6

申请日：2009-03-13

Applicant: 北京林业大学 ,  山东农业大学

Inventor： 张凌云 ,  于彦丽 ,  李彦泽 ,  郑成超

IPC: C07K14/415 ,  C12N15/29 ,  C12N15/63 ,  C12N5/10 ,  C12N1/00 ,  C12N15/11 ,  C12N15/82

Abstract: 本发明公开了一种与花粉萌发和/或花粉管生长相关的蛋白及其编码基因与应用。该蛋白，是如下1)或2)的蛋白质：1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)将序列表中序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与花粉萌发和/或花粉管生长相关的由1)衍生的蛋白质。本发明的与花粉萌发和/或花粉管生长相关的蛋白及其编码基因可用于植物的遗传转化研究，提高植物的花粉萌发率和/或花粉管生长速度、提高植物的生殖效率、缩短育种进程，对于生长发育缓慢的木本类植物进行生殖发育调控、基因工程育种、加速木本类植物的遗传改良具有重要的理论及实际意义。