公开(公告)号：CN117106745B

公开(公告)日：2025-02-14

申请号：CN202310944988.6

申请日：2022-06-01

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司

Inventor： 肖晓文 ,  王文朋 ,  李妍 ,  李可欣 ,  张雪静

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种MMLV逆转录突变体，其通过将野生型MMLV逆转录酶的RNaseH结构域替换为增强与RNA‑DNA杂交链结合的结构域来获得。本发明还对所述突变体进行了突变设计，其中优选的突变组合为E69K、H126Y、N131M、H204R、T306K。与野生型相比，本发明的MMLV逆转录突变体具有更高的扩增效率。本发明还提供了本发明的MMLV逆转录酶突变体的序列及其在逆转录反应中的应用。

公开(公告)号：CN119709687A

公开(公告)日：2025-03-28

申请号：CN202510088442.4

申请日：2022-12-23

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司

Inventor： 肖晓文 ,  王文朋 ,  李可欣 ,  孙艳妮

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12Q1/6806 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开Tth DNA聚合酶突变体，所述突变体在Tth野生型聚合酶基础上具有如下一组突变：S515K、I640F、S741G和L789F；D734G和M763T；或E617D、D734G和M763T。本发明的Tth DNA聚合酶突变体在不依赖锰离子的条件下，其逆转录活性接近M‑MLV RT野生型的活性。适于将本发明的Tth DNA聚合酶突变体制备成试剂盒，具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN117106745A

公开(公告)日：2023-11-24

申请号：CN202310944988.6

申请日：2022-06-01

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司

Inventor： 肖晓文 ,  王文朋 ,  李妍 ,  李可欣 ,  张雪静

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种MMLV逆转录突变体，其通过将野生型MMLV逆转录酶的RNaseH结构域替换为增强与RNA‑DNA杂交链结合的结构域来获得。本发明还对所述突变体进行了突变设计，其中优选的突变组合为E69K、D200K、P326K、P401K、T330P和T306K。与野生型相比，本发明的MMLV逆转录突变体具有更高的扩增效率。本发明还提供了本发明的MMLV逆转录酶突变体的序列及其在逆转录反应中的应用。

公开(公告)号：CN116004564B

公开(公告)日：2023-08-18

申请号：CN202210621426.3

申请日：2022-06-01

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司

Inventor： 肖晓文 ,  王文朋 ,  李妍 ,  李可欣 ,  张雪静

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种MMLV逆转录突变体，其通过将野生型MMLV逆转录酶的RNaseH结构域替换为增强与RNA‑DNA杂交链结合的结构域来获得。本发明还对所述突变体进行了突变设计，其中优选的突变组合为E69K、D200K、P326K、P401K、T330P和T306K。与野生型相比，本发明的MMLV逆转录突变体具有更高的扩增效率。本发明还提供了本发明的MMLV逆转录酶突变体的序列及其在逆转录反应中的应用。

公开(公告)号：CN116286715B

公开(公告)日：2025-02-21

申请号：CN202211666064.6

申请日：2022-12-23

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司

Inventor： 肖晓文 ,  王文朋 ,  李可欣 ,  孙艳妮

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/6806 ,  C12P19/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开Tth DNA聚合酶突变体，所述突变体在Tth野生型聚合酶基础上具有如下一组突变：S515K、I640F、S741G和L789F；D734G和M763T；或E617D、D734G和M763T。本发明的Tth DNA聚合酶突变体在不依赖锰离子的条件下，其逆转录活性接近M‑MLV RT野生型的活性。适于将本发明的Tth DNA聚合酶突变体制备成试剂盒，具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN115873811B

公开(公告)日：2023-08-08

申请号：CN202210975676.7

申请日：2022-08-15

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司

Inventor： 肖晓文 ,  王文朋 ,  张雅茜 ,  李可欣

IPC: C12N9/00 ,  C12N15/70 ,  C12N15/52 ,  C12P19/34

Abstract: 本发明公开了一种PBCV‑1连接酶突变体、表达纯化方法及应用，对野生型PBCV‑1连接酶的第43位苏氨酸、第84位苏氨酸、第178位苏氨酸、第222位苏氨酸、第283位半胱氨酸中的任一或多个氨基酸位点进行突变得到PBCV‑1连接酶突变体，PBCV‑1连接酶突变体通过表达纯化方法得到，能够实现对大片段DNA序列的有效环化。

公开(公告)号：CN116144630B

公开(公告)日：2023-10-10

申请号：CN202211348149.X

申请日：2022-10-31

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司

Inventor： 肖晓文 ,  王文朋 ,  王朵 ,  李可欣

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本申请涉及双链特异性核酸酶，特别涉及双链特异性核酸酶变体及其应用。本申请的双链特异性核酸酶突变体的氨基酸序列与SEQ ID NO：1所示序列相比，具有一个或多个氨基酸取代，取代位点包括第95位、第104位、第107位、第111位、第326位和第327位中至少一个。本申请的双链特异性核酸酶变体与现有的DSN相比，活性更高；极大的推动了低成本、高效获取高活性DSN的工业化进程。

公开(公告)号：CN117106746B

公开(公告)日：2024-11-22

申请号：CN202310944992.2

申请日：2022-06-01

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司

Inventor： 肖晓文 ,  王文朋 ,  李妍 ,  李可欣 ,  张雪静

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种MMLV逆转录突变体，其通过将野生型MMLV逆转录酶的RNaseH结构域替换为增强与RNA‑DNA杂交链结合的结构域来获得。本发明还对所述突变体进行了突变设计，其中优选的突变组合为P326K、P401K、H126Y和N131M。与野生型相比，本发明的MMLV逆转录突变体具有更高的扩增效率。本发明还提供了本发明的MMLV逆转录酶突变体的序列及其在逆转录反应中的应用。

公开(公告)号：CN117106746A

公开(公告)日：2023-11-24

申请号：CN202310944992.2

申请日：2022-06-01

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司

Inventor： 肖晓文 ,  王文朋 ,  李妍 ,  李可欣 ,  张雪静

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种MMLV逆转录突变体，其通过将野生型MMLV逆转录酶的RNaseH结构域替换为增强与RNA‑DNA杂交链结合的结构域来获得。本发明还对所述突变体进行了突变设计，其中优选的突变组合为E69K、D200K、P326K、P401K、T330P和T306K。与野生型相比，本发明的MMLV逆转录突变体具有更高的扩增效率。本发明还提供了本发明的MMLV逆转录酶突变体的序列及其在逆转录反应中的应用。