一种中和肠道病毒71型嵌合单克隆抗体的制备方法

    公开(公告)号:CN104610450B

    公开(公告)日:2017-09-29

    申请号:CN201510024575.1

    申请日:2015-01-18

    Abstract: 本发明涉及一种中和肠道病毒71型嵌合单克隆抗体的制备方法。一种中和肠道病毒71型嵌合单克隆抗体或其片段,其特征在于:所述的单克隆抗体或其片段的重链可变区具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列;轻链可变区具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。将EV71 VP4蛋白嵌合到HBcAg病毒样颗粒中制备而成的融合蛋白,将其作为抗原免疫Balb/c小鼠。利用噬菌体展示抗体文库技术筛选获得能特异性中和EV71 VP4蛋白的单克隆抗体。本发明提供一种具有广谱中和活性的预防与治疗手足口病的单克隆抗体潜在药物的制备方法。

    一种中和肠道病毒71型嵌合单克隆抗体的制备方法

    公开(公告)号:CN104610450A

    公开(公告)日:2015-05-13

    申请号:CN201510024575.1

    申请日:2015-01-18

    Abstract: 本发明涉及一种中和肠道病毒71型嵌合单克隆抗体的制备方法。一种中和肠道病毒71型嵌合单克隆抗体或其片段,其特征在于:所述的单克隆抗体或其片段的重链可变区具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列;轻链可变区具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。将EV71 VP4蛋白嵌合到HBcAg病毒样颗粒中制备而成的融合蛋白,将其作为抗原免疫Balb/c小鼠。利用噬菌体展示抗体文库技术筛选获得能特异性中和EV71 VP4蛋白的单克隆抗体。本发明提供一种具有广谱中和活性的预防与治疗手足口病的单克隆抗体潜在药物的制备方法。

    柯萨奇病毒B3型病毒样颗粒的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN102899336B

    公开(公告)日:2015-03-11

    申请号:CN201210349983.0

    申请日:2012-09-19

    Abstract: 本发明公开了柯萨奇病毒B3型病毒样颗粒的制备方法。本发明所提供的方法包括如下步骤:1)将柯萨奇病毒B3型的VP1基因和VP4基因克隆到目的质粒1中,得到重组表达载体1,将VP2基因和VP3基因克隆到目的质粒2中,得到重组表达载体2;2)用步骤1)得到的重组表达载体1和重组表达载体2共转化目的酵母细胞,得到表达所述VP1基因、所述VP2基因、所述VP3基因和所述VP4基因的重组酵母细胞;3)裂解步骤2)得到的重组酵母细胞,分离得到柯萨奇病毒B3型病毒样颗粒。实验证明,利用本发明所提供的方法,在酵母表达系统中成功的制备了柯萨奇病毒B3型的病毒样颗粒,可将其进一步用于病毒性心肌炎与I型糖尿病候选预防性疫苗和药物组合物。

    重组脊髓灰质炎Ⅰ型病毒样颗粒的制备方法

    公开(公告)号:CN102876688A

    公开(公告)日:2013-01-16

    申请号:CN201210390943.0

    申请日:2012-10-15

    CPC classification number: Y02A50/466

    Abstract: 本发明公开了重组脊髓灰质炎Ⅰ型病毒样颗粒的制备方法。本发明所提供的方法包括如下步骤:1)将脊髓灰质炎Ⅰ型的P1基因和3CD基因克隆到目的质粒中,得到重组表达载体;2)用所述重组表达载体转化目的酵母细胞,得到表达所述P1基因和所述3CD基因的重组酵母细胞;3)裂解所述重组酵母细胞,分离得到重组的脊髓灰质炎Ⅰ型病毒样颗粒。实验证明,利用本发明所提供方法,在酵母表达系统中制备了脊髓灰质炎病毒Ⅰ型的病毒样颗粒,同时较野生型P1基因和3CD基因相比,本发明对P1基因和3CD基因的密码子优化大大提高了脊髓灰质炎病毒Ⅰ型的病毒样颗粒在酵母表达系统中的产量,可将其进一步用于生产婴幼儿手足口病候选预防性疫苗和药物组合物。

    柯萨奇病毒B3型病毒样颗粒的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN102899336A

    公开(公告)日:2013-01-30

    申请号:CN201210349983.0

    申请日:2012-09-19

    Abstract: 本发明公开了柯萨奇病毒B3型病毒样颗粒的制备方法。本发明所提供的方法包括如下步骤:1)将柯萨奇病毒B3型的VP1基因和VP4基因克隆到目的质粒1中,得到重组表达载体1,将VP2基因和VP3基因克隆到目的质粒2中,得到重组表达载体2;2)用步骤1)得到的重组表达载体1和重组表达载体2共转化目的酵母细胞,得到表达所述VP1基因、所述VP2基因、所述VP3基因和所述VP4基因的重组酵母细胞;3)裂解步骤2)得到的重组酵母细胞,分离得到柯萨奇病毒B3型病毒样颗粒。实验证明,利用本发明所提供的方法,在酵母表达系统中成功的制备了柯萨奇病毒B3型的病毒样颗粒,可将其进一步用于病毒性心肌炎与I型糖尿病候选预防性疫苗和药物组合物。

    一种重组脊髓灰质炎病毒Ⅰ型病毒样颗粒的制备方法

    公开(公告)号:CN102876707A

    公开(公告)日:2013-01-16

    申请号:CN201210390829.8

    申请日:2012-10-15

    CPC classification number: Y02A50/466

    Abstract: 本发明公开了重组脊髓灰质炎病毒Ⅰ型病毒样颗粒的制备方法。本发明所提供的方法包括如下步骤:1)将脊髓灰质炎病毒Ⅰ型的P1基因和3ABC基因克隆到目的质粒中,得到重组表达载体;2)用所述重组表达载体转化目的酵母细胞,得到表达所述P1基因和所述3ABC基因的重组酵母细胞;3)裂解所述重组酵母细胞,分离得到重组的脊髓灰质炎病毒Ⅰ型病毒样颗粒。实验证明,利用本发明所提供方法,在酵母表达系统中制备了脊髓灰质炎病毒Ⅰ型的病毒样颗粒,同时较野生型P1基因和3ABC基因相比,本发明对P1基因和3ABC基因的密码子优化大大提高了脊髓灰质炎病毒Ⅰ型的病毒样颗粒在酵母表达系统中的产量,可将其进一步用于生产婴幼儿手足口病候选预防性疫苗和药物组合物。

    一种重组脊髓灰质炎病毒Ⅰ型病毒样颗粒的制备方法

    公开(公告)号:CN102876707B

    公开(公告)日:2014-05-28

    申请号:CN201210390829.8

    申请日:2012-10-15

    CPC classification number: Y02A50/466

    Abstract: 本发明公开了重组脊髓灰质炎病毒Ⅰ型病毒样颗粒的制备方法。本发明所提供的方法包括如下步骤:1)将脊髓灰质炎病毒Ⅰ型的P1基因和3ABC基因克隆到目的质粒中,得到重组表达载体;2)用所述重组表达载体转化目的酵母细胞,得到表达所述P1基因和所述3ABC基因的重组酵母细胞;3)裂解所述重组酵母细胞,分离得到重组的脊髓灰质炎病毒Ⅰ型病毒样颗粒。实验证明,利用本发明所提供方法,在酵母表达系统中制备了脊髓灰质炎病毒Ⅰ型的病毒样颗粒,同时较野生型P1基因和3ABC基因相比,本发明对P1基因和3ABC基因的密码子优化大大提高了脊髓灰质炎病毒Ⅰ型的病毒样颗粒在酵母表达系统中的产量,可将其进一步用于生产婴幼儿手足口病候选预防性疫苗和药物组合物。

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