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公开(公告)号：CN112816395B
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202011612806.8
申请日：2020-12-30
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明涉及活细胞检测技术领域，尤其涉及一种RNA标记物及包含该标记物的活细胞标记方法和应用。所述方法包括标记待测基因，具体为使用RNA标记物一对一地标记待检测基因，所述RNA标记物包含多个茎环结构；其中，每个茎环结构独立地选自两种不同的茎环结构；任意两个不同的RNA标记物之间，所述两种不同的茎环结构中的任一种占自身茎环结构总数比例的差值为15～50％。本发明利用不同的RNA茎环结构标记基因后相对荧光强度和绝对荧光强度不同的原理实现了同时对更多种mRNA的标记和观测，拓展了可用的mRNA标记物数量，节约了所用荧光蛋白种类，对于复杂的基因网络的成像和生物学过程研究具有重要意义。
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公开(公告)号：CN116064597B
公开(公告)日：2024-04-26
申请号：CN202310078321.2
申请日：2023-01-17
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明涉及一种正交的甲病毒RNA复制系统REPLACE系统来进化基于RNA的元件，使RNA复制酶辅助的哺乳动物细胞的持续体内进化成为可能。本发明的方法能够持续多样化和选择超过10亿的自主复制RNA拷贝，通过复制酶限制模式的RNA复制和强大的可诱导的RNA突变。本发明进化了荧光蛋白、转录因子和微型Cas蛋白(dCasMINI)的新功能或改进了现有功能。本发明表明，装备了REPLACE的细胞可以通过不断进化携带癌症相关的关键基因(即MEK1和KRAS)的自主复制RNA来适应细胞外部或内部的挑战。本发明的全新的基于RNA的进化平台将为哺乳动物合成生物学提供新的高性能的工具箱，并助力哺乳动物细胞和组织的适应性工程改造。
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公开(公告)号：CN116064597A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202310078321.2
申请日：2023-01-17
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明涉及一种正交的甲病毒RNA复制系统REPLACE系统来进化基于RNA的元件，使RNA复制酶辅助的哺乳动物细胞的持续体内进化成为可能。本发明的方法能够持续多样化和选择超过10亿的自主复制RNA拷贝，通过复制酶限制模式的RNA复制和强大的可诱导的RNA突变。本发明进化了荧光蛋白、转录因子和微型Cas蛋白(dCasMINI)的新功能或改进了现有功能。本发明表明，装备了REPLACE的细胞可以通过不断进化携带癌症相关的关键基因(即MEK1和KRAS)的自主复制RNA来适应细胞外部或内部的挑战。本发明的全新的基于RNA的进化平台将为哺乳动物合成生物学提供新的高性能的工具箱，并助力哺乳动物细胞和组织的适应性工程改造。
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公开(公告)号：CN112816395A
公开(公告)日：2021-05-18
申请号：CN202011612806.8
申请日：2020-12-30
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明涉及活细胞检测技术领域，尤其涉及一种RNA标记物及包含该标记物的活细胞标记方法和应用。所述方法包括标记待测基因，具体为使用RNA标记物一对一地标记待检测基因，所述RNA标记物包含多个茎环结构；其中，每个茎环结构独立地选自两种不同的茎环结构；任意两个不同的RNA标记物之间，所述两种不同的茎环结构中的任一种占自身茎环结构总数比例的差值为15～50％。本发明利用不同的RNA茎环结构标记基因后相对荧光强度和绝对荧光强度不同的原理实现了同时对更多种mRNA的标记和观测，拓展了可用的mRNA标记物数量，节约了所用荧光蛋白种类，对于复杂的基因网络的成像和生物学过程研究具有重要意义。
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