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公开(公告)号：CN113804531B
公开(公告)日：2024-02-06
申请号：CN202111059744.7
申请日：2021-09-10
Applicant: 北京大学
IPC: G01N1/30 , G01N1/31 , G01N33/533 , C12M1/42 , C12N13/00
Abstract: 本发明实施例提供了一种细胞高活性染色方法，所述方法包括：将包含目标细胞的样本和特异性的直标抗体混合；通过电极对样本中的目标细胞进行电穿孔标记，在电穿孔过程中，特异性的直标抗体进入目标细胞，完成特异性标记；对完成特异性标记的目标细胞进行静置，以使目标细胞的细胞膜复原。在本发明中，利用电穿孔方法将特异性的直标抗体导入目标细胞的过程中，不会对细胞造成不可逆的破坏，在完成电穿孔操作之后，目标细胞的细胞膜在10分钟内即可复原，恢复高活性且标记特异性接近100％。
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公开(公告)号：CN112812945A
公开(公告)日：2021-05-18
申请号：CN202110233280.0
申请日：2021-03-03
Applicant: 北京大学第一医院
Abstract: 本申请提供了一种恶性胸腔积液肿瘤细胞分离装置和分离方法，分离装置包括容纳罐、振动过滤筛、引流漏斗和过滤杯，振动过滤筛、引流漏斗和过滤杯均位于容纳罐内，振动过滤筛设有第一微孔滤膜，过滤杯设有第二微孔滤膜，过滤杯设置于振动过滤筛内，使得第二微孔滤膜对准第一微孔滤膜。第一微孔滤膜和第二微孔滤膜的微孔孔径设置，使得含有待去除细胞的胸腔积液依次经过第一微孔滤膜和第二微孔滤膜时，胸腺肿瘤细胞能够残留在第二微孔滤膜上。分离方法包括该分离装置的使用方法。本发明具有快速、高效的从胸腔积液中分离、富集肿瘤细胞的优点，可为下游的胸腔肿瘤细胞检测鉴定提供高纯度、高浓度的样本，提高了病原体检测的时间和准确性。
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公开(公告)号：CN109999248B
公开(公告)日：2021-01-29
申请号：CN201910159937.6
申请日：2019-03-04
Applicant: 北京大学 , 大连医科大学附属第二医院
Abstract: 本发明涉及一种活体动物循环肿瘤细胞体外功能化仪器，是基于生物微机电系统实现的活体动物全血中循环肿瘤细胞及其聚集体的高俘获率分离、高选择性标记、高活性再回输的一体化仪器。本仪器包括：CTC分离模块，用于小动物全身血液中所有循环肿瘤细胞及其聚集体的分离；CTC标记模块，用于循环肿瘤细胞的标记；CTC回输模块：用于可视化循环肿瘤细胞的快速再回输；机电控制模块：用于整个仪器的自动化控制与信号处理。本发明可用来可视化研究CTC及其聚集体在肿瘤发生、发展、转移、放/化疗术后等不同阶段的时空异质性特征，为肿瘤发生发展机制研究提供关键技术途径，为肿瘤的精准诊治提供高效能手段。
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公开(公告)号：CN114162779B
公开(公告)日：2024-07-16
申请号：CN202111227408.9
申请日：2021-10-21
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明涉及一种微纳复合滤膜的制备方法。本发明的制备方法基于聚对二甲苯‑微机电系统(MEMS)翻模工艺，首先在硅衬底上加工出微米柱与纳米柱复合结构作为模具，之后通过用聚对二甲苯填充微米柱与纳米柱的间隙来形成微纳复合滤膜结构。本发明方法可以精确控制纳米孔层的厚度，纳米通孔的孔径、孔间距和孔分布，以及支撑层厚度和微米通孔的孔径等。本发明还涉及通过所述制备方法获得的微纳复合滤膜及其应用。
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公开(公告)号：CN112608820A
公开(公告)日：2021-04-06
申请号：CN202011483579.3
申请日：2020-12-15
Applicant: 北京大学
IPC: C12M1/12 , C12M1/42 , C12M1/00 , C12N5/071 , C12N5/0786 , C12N5/09 , C12N1/14 , C12N1/20 , C12Q1/04 , C12Q1/02
Abstract: 本发明提供了一种高细胞活性稀有细胞分离与富集的方法及装置和应用，该方法主要包括：先利用高孔隙率精准微孔滤膜对样本中的背景细胞和稀有目标细胞分别实现初次高效率去除与回收；再利用与背景细胞特异结合的免疫磁珠对背景细胞进行再次去除；最后，再次利用微孔滤膜对稀有目标细胞进行回收和富集。本发明提供的“先滤膜过滤，再磁珠负选”的方法，在实现背景细胞最大限度去除，保证稀有目标细胞高细胞活性、高体积通量、高灵敏度、高纯度分离与富集的同时，降低了免疫磁珠用量及经济成本。因此，本发明提供的方法，不仅操作流程简单、集成度高，避免了离心、液体转移等造成的细胞活性降低；而且经济成本低、装置便携，应用范围广、潜能大。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110437971A
公开(公告)日：2019-11-12
申请号：CN201910677432.9
申请日：2019-07-25
Applicant: 北京大学
Abstract: 本申请提供了一种循环肿瘤细胞的泵驱动式循环俘获系统及其控制方法，包括抗凝管、密封胶塞盖、进液管道、微量蠕动泵、过滤装置以及出液管道；进液管道的一端穿过密封胶塞盖进入抗凝管的内部，进液管道的另一端连接在微量蠕动泵的输入端；过滤装置的一端连接在微量蠕动泵的输出端，过滤装置的另一端连接在出液管道的一端，出液管道的另一端穿过密封胶塞盖进入抗凝管的内部；进液管道、微量蠕动泵、上连接头、膜负载结构、高孔隙率滤膜、下连接头以及出液管道闭合形成循环回路。本发明旨在通过循环过滤方法基于物理性质差异实现CTC的高效、高活性分离。本发明的操作简单、条件可控，可应用于生物医学工程领域，为临床应用提供了有效手段。
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公开(公告)号：CN109999248A
公开(公告)日：2019-07-12
申请号：CN201910159937.6
申请日：2019-03-04
Applicant: 北京大学 , 大连医科大学附属第二医院
Abstract: 本发明涉及一种活体动物循环肿瘤细胞体外功能化仪器，是基于生物微机电系统实现的活体动物全血中循环肿瘤细胞及其聚集体的高俘获率分离、高选择性标记、高活性再回输的一体化仪器。本仪器包括：CTC分离模块，用于小动物全身血液中所有循环肿瘤细胞及其聚集体的分离；CTC标记模块，用于循环肿瘤细胞的标记；CTC回输模块：用于可视化循环肿瘤细胞的快速再回输；机电控制模块：用于整个仪器的自动化控制与信号处理。本发明可用来可视化研究CTC及其聚集体在肿瘤发生、发展、转移、放/化疗术后等不同阶段的时空异质性特征，为肿瘤发生发展机制研究提供关键技术途径，为肿瘤的精准诊治提供高效能手段。
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公开(公告)号：CN112608820B
公开(公告)日：2022-04-15
申请号：CN202011483579.3
申请日：2020-12-15
Applicant: 北京大学
IPC: C12N5/09 , C12M1/12 , C12M1/42 , C12M1/00 , C12N5/071 , C12N5/0786 , C12N1/14 , C12N1/20 , C12Q1/04 , C12Q1/02
Abstract: 本发明提供了一种高细胞活性稀有细胞分离与富集的方法及装置和应用，该方法主要包括：先利用高孔隙率精准微孔滤膜对样本中的背景细胞和稀有目标细胞分别实现初次高效率去除与回收；再利用与背景细胞特异结合的免疫磁珠对背景细胞进行再次去除；最后，再次利用微孔滤膜对稀有目标细胞进行回收和富集。本发明提供的“先滤膜过滤，再磁珠负选”的方法，在实现背景细胞最大限度去除，保证稀有目标细胞高细胞活性、高体积通量、高灵敏度、高纯度分离与富集的同时，降低了免疫磁珠用量及经济成本。因此，本发明提供的方法，不仅操作流程简单、集成度高，避免了离心、液体转移等造成的细胞活性降低；而且经济成本低、装置便携，应用范围广、潜能大。
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公开(公告)号：CN107694347B
公开(公告)日：2020-11-13
申请号：CN201710679586.2
申请日：2017-08-10
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种微孔阵列滤膜及其制备方法和应用，基于保形淀积的聚合物的微机电系统工艺(如Parylene MEMS工艺)制造了具有1平方厘米以上工作面积、可精确调控孔径及孔间隙的微孔阵列滤膜，该微孔阵列滤膜具有2.5维特点和超高孔隙率，能够实现超大体积通量的细胞富集分离。
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公开(公告)号：CN109554285A
公开(公告)日：2019-04-02
申请号：CN201811643014.X
申请日：2018-12-29
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明涉及生物医药与先进制造技术领域，具体涉及一种柔性微孔膜及应用其制备的细胞分离装置；本发明所述柔性微孔膜包括微孔孔径≥15μm，孔隙率≥50％的工作区域，还包括支撑区域，所述支撑区域赋予工作区域刚性、硬度和机械强度，避免其发生变形；本发明还提供了一种细胞分离装置，所述细胞分离装置包括至少一个初级分离膜和至少一个末级分离膜，所述初级分离膜采用本发明所述的柔性微孔膜，所述初级分离膜用以分离复杂液体样品的大块背景成分和细胞成分，防止分离膜的堵塞，增加通量，所述末级分离膜孔径≤15μm，孔隙率≥25％，过滤截留液体样品后，初级分离膜和末级分离膜都可于显微镜下观察，增加目标物阳性检出率，实用性好。
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