公开(公告)号：CN118326084A

公开(公告)日：2024-07-12

申请号：CN202410586054.4

申请日：2024-05-13

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 李文贵 ,  施徐森 ,  段新慧 ,  冉李燕 ,  邓秋慧

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于病毒检测技术领域，提供了BVDV、BCoV、BRV及BNeV的四重RT‑PCR检测引物组及检测方法，方法包括以下步骤：S1、模板制备，使用BRV、BCoV、BVDV、BNeV的基因片段作为阳性样品模板；S2、以BRV、BCoV、BVDV、BNeV的基因片段为阳性样品模板，分别用各自引物对BRV‑VP6基因、BCoV‑NSP2基因、BVDV‑5’UTR基因、BNeV‑RDRP基因序列进行RT‑PCR扩增；S3、电泳分析；S4、胶回收、克隆和连接转化；S5、质粒提取和测序；S6、结果分析；本发明通过四重RT‑PCR检测法，获得与单一RT‑PCR检测法一样的特异性和敏感性，大大节省了检测成本，对临床标本的准确诊断和养牛业的健康发展具有较强的实用价值。