公开(公告)号：CN105734047A

公开(公告)日：2016-07-06

申请号：CN201610079752.0

申请日：2016-02-04

Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所

Inventor： 王雁 ,  黄昕蕾

IPC: C12N15/10

CPC classification number: C12N15/1003

Abstract: 本发明公开了一种RNA质量及浓度较好的石斛盛开期花瓣总RNA提取方法，将?80℃保存的0.1g盛花期花瓣在液氮中研磨成粉末后，转入1.5mL离心管中，加入1mL1.5％SDS裂解液涡旋1min；室温静置25min，4℃下取10000g离心l5min，取上清加入1/3体积8mol/L的LiCl溶液，混匀后?20℃静置4h；4℃下取15000g离心30min，用0.6mL0.2mol/L的NaCl溶液重溶沉淀，加入等体积的酚?氯仿?异戊醇混合液，4℃下取12000g离心15min，吸取上清并重复抽提1次；加入等体积氯仿?异戊醇，4℃下取12000g离心15min；吸取上清加入2倍体积的乙醇，?80℃下放置1h，4℃12000g离心10min，将沉淀用75％乙醇洗涤2次，待RNA沉淀略干后，加30uL的DEPC处理水溶解。成本低、耗时短、操作简单，同时提取的RNA质量及浓度较好。