公开(公告)号：CN114591882A

公开(公告)日：2022-06-07

申请号：CN202210201087.3

申请日：2022-03-03

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 范桂枝 ,  高兴蕾 ,  王滋涵 ,  由香玲 ,  詹亚光

IPC: C12N5/04 ,  C12N15/82 ,  C12N5/10 ,  C12N15/12

Abstract: 本发明是一种利用酶解法获得刺五加愈伤组织单细胞，并对其进行农杆菌转化获得转GFP基因的方法，它属于生物技术领域。采用1.5％纤维素酶R‑10和0.2％离析酶R‑10酶解刺五加愈伤组织6h后400×g离心5min时，单细胞产量最大、活力最强，分别为1.88×106个·g‑1和90％。40％PEG浓度下农杆菌转化单细胞40min时，单细胞瞬时转化效率达30.34％。本发明提供了一种高产刺五加单细胞的酶解体系，同时获得了一致的转GFP基因的单细胞，该发明将为从单细胞水平研究基因的功能，为基因在不同种类细胞中的功能分析提供技术支撑。

公开(公告)号：CN116965337B

公开(公告)日：2023-12-01

申请号：CN202311225996.1

申请日：2023-09-22

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 范桂枝 ,  姚大彬 ,  唐中华 ,  李德文 ,  由香玲 ,  詹亚光 ,  高兴蕾

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种同步促进刺五加胚性愈伤组织生长和黄酮累积的方法，属于生物技术领域。本发明提供了电刺激在同步促进刺五加胚性愈伤组织生长和黄酮累积中的应用，所述电刺激的电流强度为100mA，处理时间为30min。具体包括对刺五加胚性愈伤组织依次进行电刺激和暗培养，所述暗培养的培养时间为28d；所述胚性愈伤组织为经过继代培养2个周期的胚性愈伤组织。本发明协调了诱导或调控下活性物质累积和细胞生长不能同时兼顾的问题，为利用植物细胞工程技术生产活性物质提供了技术支撑。

公开(公告)号：CN118703562A

公开(公告)日：2024-09-27

申请号：CN202410972775.9

申请日：2024-07-19

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 范桂枝 ,  仝亚倩 ,  唐中华 ,  高兴蕾

IPC: C12N15/84 ,  A01H4/00 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明公开了一种刺五加遗传转化体系的构建方法，属于植物遗传转化领域。本发明采用真空或者超声条件下农杆菌浸染刺五加茎段和叶片，之后转入共培养培养基共培养，再脱菌和筛选抗性愈伤组织；其中，在浸染和共培养阶段，在农杆菌浸染液和共培养培养基中添加氯化镧；将筛选得到的抗性愈伤组织继续培养，得到抗性刺五加苗。本发明成功构建刺五加遗传转化体系，并得到稳定遗传的抗性刺五加幼苗，抗性刺五加幼苗不定根量大，长势好，这对刺五加育种和栽培具有重要意义。

公开(公告)号：CN116965337A

公开(公告)日：2023-10-31

申请号：CN202311225996.1

申请日：2023-09-22

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 范桂枝 ,  姚大彬 ,  唐中华 ,  李德文 ,  由香玲 ,  詹亚光 ,  高兴蕾

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种同步促进刺五加胚性愈伤组织生长和黄酮累积的方法，属于生物技术领域。本发明提供了电刺激在同步促进刺五加胚性愈伤组织生长和黄酮累积中的应用，所述电刺激的电流强度为100mA，处理时间为30min。具体包括对刺五加胚性愈伤组织依次进行电刺激和暗培养，所述暗培养的培养时间为28d；所述胚性愈伤组织为经过继代培养2个周期的胚性愈伤组织。本发明协调了诱导或调控下活性物质累积和细胞生长不能同时兼顾的问题，为利用植物细胞工程技术生产活性物质提供了技术支撑。