公开(公告)号：CN110845606A

公开(公告)日：2020-02-28

申请号：CN201911017609.9

申请日：2019-10-24

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 赵娜 ,  赵敏 ,  崔岱宗 ,  苗艳梅 ,  王宁 ,  王珏玉 ,  杨悦 ,  韦庆慧

IPC: C07K16/10 ,  C07K16/06 ,  C07K14/08 ,  C07K1/22 ,  C12N15/40 ,  C12N15/70 ,  G01N33/569

Abstract: 一种赤瓟花叶病毒的多克隆抗体制备及ELISA检测方法，所述制备方法包括如下步骤：以赤瓟花叶病毒核酸基因组RNA为模板，基于赤瓟花叶病毒保守CP蛋白核苷酸序列，采用引物ThDMV-CP1和ThDMV-CP2进行RT-PCR扩增，扩增产物经纯化后连接于pET-30a(+)表达载体上，并对CP蛋白进行表达和纯化，将纯化蛋白与弗氏佐剂混合免疫兔子，采集兔子血液，经亲和层析纯化获得赤瓟花叶病毒多克隆抗体。本发明利用ThDMV病毒制备出相应的特异性多克隆抗体，并建立了具有高特异性和灵敏性的相应的间接ELISA检测病毒方法，具有操作方便、灵敏度高、特异性强、成本低等优势，同时适于大批量样品检测。