公开(公告)号：CN104593312B

公开(公告)日：2018-02-13

申请号：CN201510054612.3

申请日：2015-02-02

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 王天女 ,  赵敏 ,  卢磊 ,  王靖瑶 ,  刘彤 ,  郑小芳

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12N9/02 ,  C12R1/125

Abstract: 实现一株胞内表达枯草芽孢杆菌漆酶的基因工程菌株及高效产胞外漆酶的诱导方法，涉及一株胞内表达枯草芽孢杆菌漆酶的基因工程菌株及实现该菌株高效释放重组漆酶到培养基中的诱导方法。该基因工程菌株的制备方法：一、芽孢杆菌基因组DNA的提取和细菌漆酶基因的克隆；二、重组表达菌株的构建。实现重组漆酶高效产胞外漆酶的诱导方法：一、将工程菌株接入LB培养基培养至OD600为0.8；二、加入0.1mM IPTG和0.1mM CuSO4，25℃，120rpm培养4h，随后在30℃下静止培养。本发明所提供的诱导方法可有效将重组胞内漆酶释放到培养基中，相较于传统大肠杆菌分泌表达漆酶，其胞外漆酶产量得到显著提高，操作简单，对于工业大规模发酵胞外漆酶具有很好的参考价值。

公开(公告)号：CN104593312A

公开(公告)日：2015-05-06

申请号：CN201510054612.3

申请日：2015-02-02

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 王天女 ,  赵敏 ,  卢磊 ,  王靖瑶 ,  刘彤 ,  郑小芳

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12N9/02 ,  C12R1/125

CPC classification number: C12N9/0061 ,  C12Y110/03002

Abstract: 一株胞内表达枯草芽孢杆菌漆酶的基因工程菌株及实现该菌株分泌表达漆酶的诱导方法，涉及一株胞内表达枯草芽孢杆菌漆酶的基因工程菌株及实现该菌株分泌表达漆酶的诱导方法。该基因工程菌株的制备方法：一、芽孢杆菌基因组DNA的提取和细菌漆酶基因的克隆；二、重组表达菌株的构建。实现重组漆酶分泌表达的诱导方法：一、将工程菌株接入LB培养基培养至OD600为0.8；二、加入0.1mM IPTG和0.1mM CuSO4，25℃，120rpm培养4h，随后在30℃下静止培养。本发明所提供的诱导方法可显著提高重组漆酶分泌效果，操作简单，对于提高重组大肠杆菌分泌漆酶具有很好的参考价值。