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公开(公告)号：CN104059876A
公开(公告)日：2014-09-24
申请号：CN201410273222.0
申请日：2014-06-18
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了一种提高鸡骨骼肌细胞氧化代谢能力的培养方法，属于生物技术领域。本发明所提供的方法是将经过分离、纯化的鸡骨骼肌成肌细胞和肌源成纤维细胞分别接种于Transwell培养皿的上室和下室，二者以1μm孔径的PET膜分开但共享添加有H2O2的成肌分化培养基；经过成肌分化诱导培养7-10天获得具有自主收缩能力的肌管，期间每隔8-12小时进行1次低温冲击刺激。本发明提供的方法能够显著提高鸡骨骼肌细胞的线粒体含量及其跨膜电位和有氧代谢酶的活性，同时降低了ATPase的活性。该方法具有培养周期短、效果稳定的特点，为研究鸡骨骼肌能量代谢规律、纤维类型形成机制等奠定了基础，具有良好的研究及应用价值。
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公开(公告)号：CN104152406A
公开(公告)日：2014-11-19
申请号：CN201410400520.1
申请日：2014-08-15
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明公开了一种提高鸡骨骼肌成肌细胞分化能力的制剂及其应用，属于生物工程技术领域。本发明所提供的制剂是由肌源成纤维细胞提取物、丙酮酸盐和钙盐组成。其中，肌源成纤维细胞提取物是鸡肌源成纤维细胞经超声波裂解后，分离得到小于10KDa的蛋白液经真空干燥获得的；钙盐和丙酮酸盐可为丙酮酸钙。本发明所提供的制剂具有成份简单易得、使用简便有效的特点，可显著提高鸡骨骼肌成肌细胞的融合率，促进骨骼肌纤维直径的增大及功能性收缩蛋白的表达。利用本发明提供的制剂培养成肌细胞，成肌细胞的融合率提高32.01％，肌管中的平均细胞核数提高91.63％，肌管平均直径增加45.59％。
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公开(公告)号：CN104152406B
公开(公告)日：2017-05-24
申请号：CN201410400520.1
申请日：2014-08-15
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明公开了一种提高鸡骨骼肌成肌细胞分化能力的制剂及其应用，属于生物工程技术领域。本发明所提供的制剂是由肌源成纤维细胞提取物、丙酮酸盐和钙盐组成。其中，肌源成纤维细胞提取物是鸡肌源成纤维细胞经超声波裂解后，分离得到小于10KDa的蛋白液经真空干燥获得的；钙盐和丙酮酸盐可为丙酮酸钙。本发明所提供的制剂具有成份简单易得、使用简便有效的特点，可显著提高鸡骨骼肌成肌细胞的融合率，促进骨骼肌纤维直径的增大及功能性收缩蛋白的表达。利用本发明提供的制剂培养成肌细胞，成肌细胞的融合率提高32.01％，肌管中的平均细胞核数提高91.63％，肌管平均直径增加45.59％。
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公开(公告)号：CN104059876B
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201410273222.0
申请日：2014-06-18
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了一种提高鸡骨骼肌细胞氧化代谢能力的培养方法，属于生物技术领域。本发明所提供的方法是将经过分离、纯化的鸡骨骼肌成肌细胞和肌源成纤维细胞分别接种于Transwell培养皿的上室和下室，二者以1μm孔径的PET膜分开但共享添加有H2O2的成肌分化培养基；经过成肌分化诱导培养7?10天获得具有自主收缩能力的肌管，期间每隔8?12小时进行1次低温冲击刺激。本发明提供的方法能够显著提高鸡骨骼肌细胞的线粒体含量及其跨膜电位和有氧代谢酶的活性，同时降低了ATPase的活性。该方法具有培养周期短、效果稳定的特点，为研究鸡骨骼肌能量代谢规律、纤维类型形成机制等奠定了基础，具有良好的研究及应用价值。
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